全反式维甲酸促进造血干/祖细胞植入的实验研究

目的　通过小鼠脐血移植 (UCBT)模型在体内观察全反式维甲酸 (RA)对脐血造血干 祖细胞 (HSPC)植入的影响。方法　用 380mg kg致死量环磷酰胺 (CTX)预处理后 ,将C57BL 6(H 2 b)的胎鼠和新生鼠外周血 (FNPB) (有核细胞数为 1× 1 0 6和 0 .5× 1 0 6个 )分别输注至BALB c(H 2 d)小鼠体内 ,于移植前 2天至移植后 2天分别用 1 5mg·kg-1 ·d-1 和 5mg·kg-1 ·d-1 RA处理受鼠 ,观察受鼠造血和免疫恢复、移植物抗宿主病 (GVHD)、植入水平和存活率。结果　经两种剂量RA处理后 ,造血和免疫重建明显加快 (P <0 .0 5)。未见急性GVHD。受鼠植入水平比对照组明显提高。当移植 1× 1 0 6细胞数时 ,两种剂量RA处理组均可提高移植后 30天和 60天存活率 (分别为 72 .73 %和 70 .83 % ) ,与对照组(41 .67% )相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5) ;当移植 0 .5× 1 0 6细胞数时 ,两种剂量RA亦能提高存活率(分别为 42 86 %和 43 .48% ) ,与未经RA处理对照组 (1 4 .2 9% )相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5) ,并且与移植 1× 1 0 6细胞数未经RA处理组的存活率相当。结论　在小鼠UCBT模型中 ,RA能促进脐血HSPC的植入 ,为RA应用于临床UCBT提供了实验依据     

螺内酯对离体大鼠胸主动脉环舒张功能的作用和机制

目的研究螺内酯(spironolactone,SPT)对离体血管平滑肌张力影响,同时探讨SPT的作用机制。方法离体血管平滑肌张力记录法,应用SPT,观测其对Sprague Dawley(SD)大鼠离体胸主动脉环的作用及不同工具药的影响。结果 SPT对KCl(30 mmol.L-1)和NE(1μmol.L-1)预收缩的血管环具有浓度依赖的舒张作用,对内皮完整和去内皮血管环舒张作用无差异,该舒张作用为非内皮依赖性。Na+/H+交换阻滞剂氨氯吡咪(amiloride,AM,1μmol.L-1)对SPT的舒血管作用有抑制作用。在KCl预收缩基础上,加入钾通道阻断剂氯化钡(BaCl2,2μmol.L-1)、四乙胺(TEA,0.2 mol.L-1)、四氨基吡啶(4-AP,1 mmol.L-1)均不能抑制SPT的舒血管效应,ATP敏感钾通道(KATP)格列苯脲(Gli,10μmol.L-1)能抑制SPT对血管的舒张作用。在无钙的生理盐溶液中,SPT对CaCl2收缩血管有明显抑制作用。结论 SPT舒张血管的作用具有浓度依赖性,其作用机制可能与抑制Na+/H+交换、ATP敏感钾通道(KATP)以及钙离子内流有关。     

黄连素对糖尿病肾损伤大鼠肾功能、氧化应激、肾脏醛糖还原酶的影响

目的观察黄连素对链脲佐菌素诱导的糖尿病肾损伤大鼠肾功能保护作用,并从抗氧化应激、抑制肾脏醛糖还原酶活性及其基因表达等方面探讨黄连素抗糖尿病大鼠肾损伤的作用机制。方法用腹腔注射链脲佐菌素方法复制糖尿病大鼠肾损伤模型。随机分为正常对照组、模型对照组、黄连素组,每组10只。黄连素经口灌胃200 mg.kg-1.d-1,每周给药6 d,共12 wk。比较各组大鼠血糖、肾脏肥大指数(肾重/体重)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、24h尿蛋白(UP24)等肾功能相关指标,比较各组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)含量、肾组织醛糖还原酶(AR)活性及其基因表达的改变。结果模型组大鼠血糖维持在较高水平、肾脏肥大指数、BUN、Cr、UP24等较正常组明显升高(P<0.05),血清SOD活性低下,MDA含量增加(P<0.05),肾脏AR活性与其基因表达明显升高(P<0.05)。黄连素组与模型组相比,能明显降低血糖、有效控制体重下降、明显改善肾脏肥大指数、BUN、Cr、UP24等指标(P<0.05),血清SOD活性增强,同时MDA含量减少(P<0.05),肾脏AR活性降低及AR mRNA水平下调(P<0.05)。结论对糖尿病肾损伤大鼠,黄连素在调节血糖的同时,可能通过提高机体抗氧化能力、减少肾脏AR活性与基因表达以抑制多元醇通路的激活发挥其肾功能的保护作用。     

我校屏障系统动物实验设施的综合管理

随着医学实验动物学科的发展及实验动物生产、使用许可证管理办法的实施,本文介绍了我校屏障系统动物实验设施的运营管理模式,包括建立完整的文件及系统内标准操作的管理体系、人员队伍的建设和管理、实验动物环境设施的管理、系统内环境物品的管理等,总结相关经验以供同行参考。     

复方交泰丸对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用及其机制的研究

糖尿病肾病是糖尿病的主要微血管并发症,其严重性仅次于心脑血管病。目前研究抗糖尿病肾病的有效方药以控制和延缓糖尿病肾病的发展成为学科领域的热点课题。复方交泰丸可改善糖尿病临床症状,降低血糖,改善血脂及机体抗氧化状态,保护血管内皮功能[1]。本研究进一步观察复方交泰丸对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾损伤的保护作用,并从肾组织氧化应激、一氧化氮水平和醛糖还原酶(AR)活性及基因表达的变化等方面探讨其可能的作用机制,为临床应用提供实验依据。1材料与方法1.1材料复方交泰丸由中山大学药学院提取制成干粉颗粒(批号:0504011);消…     

体外培养拟胚体条件的探讨

目的: 探讨体外拟胚体培养中获得优质拟胚体的条件。方法:分别使用6种EB培养液:(1)添加5％胎牛血清;(2)添加10％胎牛血清;(3)添加15％胎牛血清;(4)添加20％胎牛血清;(5)添加25％胎牛血清;(6)添加20％胎牛血清和0.1 mmol/L β-巯基乙醇。将ES细胞复苏后直接作EB培养和传代后再作EB培养,观察拟胚体生长的情况,并对各培养液中的胚体形成率和活细胞比率使用SPSS统计软件包进行统计学分析。结果:20％胎牛血清浓度和β-巯基乙醇的EB培养液胚体形成率最高,与其他培养液比较,差异显著(P＜0.05),小胚体和结构松散胚体更多见于低血清浓度培养液,但各培养液中活细胞比率差异无显著。ES细胞复苏后经1代传代后作EB培养与复苏直接作EB培养,胚体形成率更高,差异显著(P＜0.05),而活细胞比率差异无显著。另外,观察中发现,充分摇动不仅能保证细胞悬浮培养,而且可以防止胚体过早分化。结论:提供足够细胞营养,使用传代后代细胞作EB培养以及悬浮培养是获得较好细胞活力拟胚体的重要保证。     

裸鼠肾包膜下人癌模型在抗癌药物个体化疗中的应用

目的 通过临床病人肿瘤组织抗肿瘤药物敏感试验,为临床个体化治疗提供重要依据。方法 应用裸鼠肾包膜下人癌模型抗肿瘤药物敏感试验测试12种临床常用的抗肿瘤药物,确定出每例肿瘤最敏感药物,并向临床医生推荐使用。结果 共测试了临床肿瘤标本35例,包括肺腺癌、口腔鳞癌、结肠腺癌、乳腺癌和脑星形细胞瘤等。各个病例的最敏感药物不尽相同。结论 不同类型肿瘤以及相同类型肿瘤不同个体对肿瘤药物敏感度不同。该试验可能提高临床个体化疗效果。     

聚甲基丙稀酸甲酯(PMMA)即刻植入牙槽窝的动物实验

目的：探讨聚合至面团期的聚甲基丙稀甲脂（PMMA）在拔牙后即刻植入牙槽窝获得愈合的可能性。方法：拔除免一例上下颌中切牙后，植入面团期时的PMMA。仅关闭上颌牙槽窝口，下颌牙槽窝保持自然开口，从临床、X线、组织学三方面观察组织的愈合生长情况结果：所有伤口获得良好的愈合，并始终保持稳定：植入PMMA的牙槽窝骨质未见吸收破坏一初期，在PMMA与骨质之间产生了纤雄薄膜，随后，纤维薄膜逐渐被新骨代替，使PMMA与骨质之间逐渐形成骨性结合.结论：PMMA可以在面团期时植入拔牙窝，以适应牙槽窝的形态大小，并在外露的条件下获得良好愈合，能够与骨质达成骨性直接结合。     

同种异基因脐血移植小鼠模型的建立

探讨胎鼠及新生鼠外周血（FNPB）移植特性。建立同种异基因脐血移植小鼠模型。采用体外集落培养和流式细胞术的方法，检测FNPB与骨髓（BM）造血干/祖细胞含量与特性，给致死量环磷酰胺预处理的BALB/c（H-2^d)小鼠经尾静脉输注C57BL/6（H-2^b)小鼠FNPB，移植后动态观察受鼠存活状况，植入水平，造血与免疫功能恢复及移植物抗宿主病（GVHD）发生情况。结果显示：FNPB中早期红系祖细胞（BFU-E）和CD34^ 细胞含量与BM相近，粒单系祖细胞（CFU-GM）（14天），多向祖细胞（CFU-GEMM）及Sca-1^ CD34^ 细胞亚群明显高于BM，FNPB源造血干细胞占27.94%。结论：FNPB富含造血干/祖细胞，国内首次成功建立同种异基因脐血移植小鼠模型。