AB亚型细胞上H抗原强度的探讨

目的探讨H抗原在AB亚型中分布的规律,对AB亚型的正确鉴定提供帮助。方法用血清学试验与分子生物学相结合的方法确定各种AB亚型,对检出的39例A2B和45例其它AB亚型做H抗原检测,并与正常O型、B型细胞比较,判断其H抗原的强度。当AB亚型的H抗原凝集评分高于B型红细胞2分或2分以上时,认为该AB亚型上存在较多的H抗原。结果只在CisAB(100%),B(A)(100%),AxB(46.2%)以及A2B(43.6%)上发现了大量H抗原,而在其它众多的AB亚型中,H抗原与B型红细胞比较没有明显增强。结论大多数H抗原的增强现象可以用“3型H抗原”的残留来解释,但是对于53.8%AxB、56.4%A2B以及A3B、AmB中H抗原不增强的现象尚无合理的解释。     

MIC基因家族研究进展

最近在人类ＭＨＣ区域内发现了一个新的基因家族—ＭＩＣ（ＭＨＣｃｌａｓｓＩｃｈａｉｎ－ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅ），ＭＩＣ基因与ＭＨＣＩ类基因连锁，同源性较高，功能有差异。ＭＩＣ基因存在于大多数哺乳类动物，主要在上皮细胞和成纤维细胞中表达。本文从ＭＩＣ基因的发现、分子结构、多态性以及与疾病相关性等方面作简要介绍     

中国类孟买血型 FUT1和 FUT2基因研究

目的　研究中国类孟买血型的 FUT1和 FUT2基因构成。方法　 10个血清学初步分析为类孟买血型的标本来源于不同地区 ,ABO常规定型 ,吸收放散试验鉴定其红细胞表面少量 A或 B抗原 ,检测唾液中分泌型血型物质 ,或通过 L ewis血型间接了解其分泌状态。聚合酶链反应 -限制性片段长度多态方法进行 ABO基因分型 ,并与血清学结果相互验证。对 FUT1(H)和 FUT2 (SE)的编码区进行 PCR产物直接测序 ,了解其 H及 SE位点基因型及核苷酸序列组成。结果　血清学和分子生物学两种方法证实 10例皆为罕见的类孟买血型。检测到 h1(nt5 4 7- 5 5 2Δag)、h2 (nt880 - 882Δtt)、h3(nt6 5 8c→ t)和 h4 (nt35 c→ t) 4个FUT1座位上的隐性基因 ,同时发现两种新的隐性等位基因 :hnew- 1 (nt5 86 c→t)和 hnew- 2 (nt32 8g→ a)。 10例中国类孟买个体 FU T2位点的研究表明 ,所有被研究标本的 FU T2基因 ,都具有 nt35 7c→ t的同义突变 ,其中 1例为 Seweak等位基因纯合子。结论　 H位点的无效等位基因具有较为广泛的遗传多态性。除了已经报道的 h等位基因外 ,在中国类孟买个体中我们检测到两种新的隐性等位基因 ,并检出 1个 Sew的类孟买个体及 Se基因的一种新的 G716 A单核苷酸多态性位点。     

血小板谱抗原的建立及其在鉴定血小板特异性抗体中的应用

目的 建立血小板谱抗原,鉴定引起血小板输注无效和新生儿血小板减少性紫癜的血小板特异性抗体,为血小板血型研究和临床治疗提供依据。方法根据中国人群人类血小板同种抗原(HPA)-1-HPA-16等位基因频率分布资料,利用聚合酶链反应-序列特异引物(PCR-SSP)技术对O型血小板供者进行HPA-1-HPA-6、HPA-15分型,筛选合适的供者,组成血小板谱抗原。通过建立的血小板谱抗原,利用简易致敏红细胞血小板血清学技术(SEPSA)鉴定同种免疫反应产生的血小板抗体的特异性。结果从O型血小板供者中筛选出11名供者,建立了血小板特异性抗体鉴定谱抗原。其可鉴定HPA-1-HPA-6,HPA-15抗体的特异性。在所筛检1 120份样本中,有3例患者检出HPA抗体,其中HPA-4b(Penb)抗体1例,HPA-15a(Govb)抗体2例。结论通过血小板谱抗原鉴定血小板抗体的特异性,对提高临床输注血小板的安全性和有效性,以及预防新生儿血小板减少性紫癜有积极的意义.     

中国人RHD基因合子型检测分析

目的判定中国人群中RHD基因是否是纯合子。方法从上海地区正常献血者中选取RhD阳性、RhD阴性、Del和其它D变异型样本共50份,采用PCR-RFLP方法扩增Rhesus盒子判断RHD合子型,同时相对实时定量real-time quantitative(RQ)PCR扩增检测RHD基因第5、7外显子的特征区域。结果9份样本在2种方法的检测结果中出现矛盾。进一步对RHD基因的特异性序列进行PCR-SSP及克隆测序分析,证实这9份样本中,4份是DⅥⅢ变异型,2份是Del与RHD711del C等位基因杂合子,另外3份是携带有中国RhD阴性人群中较常见的RHD-CE(2—9)-D RH阴性等位基因。结论中国人Rh血型系统遗传背景较白种人复杂,RHD基因存在较多的变异情况。仅使用单一方法判断RHD合子型及RhD血清学表型容易产生误判,而从Rhesus盒子和RHD基因不同外显子2个角度进行综合判断,可以减少误判。     

白塞病发病机制研究进展

白塞病是一种病因未明的血管炎症性疾病,与自身免疫有关。该病罹患多个系统,临床表现包括皮肤粘膜,眼,心血管,胃肠道,支气管粘膜,肺以及中枢神经系统损害。围绕白塞病的发病机制,从人类白细胞抗原,ＭＨＣⅠ类链相关基因Ａ,人类热休克蛋白以及γδＴ细胞受体与白塞病的关系等几个方面的研究进展作一综述。     

中国人群中Del表型分子背景研究

目的研究Del表型的分子基础，并探寻新的Del等位基因。方法515名经血清学方法确定的RhD阴性血样用吸收放散试验筛选并确认Del表型。Del的基因组DNA通过多重PCR（ multiplex polymerase chain reaction, MPX PCR）检测RHD基因；用序列特异性引物PCR（ sequence-specific primer-polymerase chain reaction, PCR-SSP）检测Del等位基因：RHD（K409K）和RHD（M2951）。经PCR-SSP筛选，结果为阴性的样品通过基因组DNA测序及cDNA测序分析其分子背景。结果吸收放散试验共检出Del 79名。经多重PCR检测，79份样品均带有RHD第3、4、5、6、7、9特异性外显子。PCR-SSP结果显示，75名Del具有RHD（K409K）等位基因，无Del样品带有RHD（M2951）等位基因。经测序发现4名新RHD等位基因：RHD3G→A（GenBank DQ310735），RHD 28C→T，RHD53T→C（GenBank DQ451877、DQ451878），RHD 251T→C（GenBank DQ310734）。结论Rh血型系统非常复杂，新的D变异表型和新的RHD等位基因可能被不断发现。     

应用多重PCR-RFLP技术检测头发、口腔腭粘膜的ABO基因型

目的　探讨对头发、口腔腭粘膜等组织标本进行ABO基因分型的可行性。方法　应用多重聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (多重PCR RFLP)技术 ,检测 8例头发和 6例口腔腭粘膜标本的ABO基因型 ,标本的基因组DNA经 2对引物同时进行扩增 ,扩增后的产物同时用MspⅠ和KpnⅠ 2种限制酶进行消化 ,通过消化后产生的片段即可判断结果。然后将分析结果与血清学技术检测的ABO表现型和受检者血液标本的基因型进行比较。结果　 14例标本共检出 6种ABO基因型 ,与表现型和血液标本的基因型结果完全一致。结论　该方法操作方便 ,重复性、稳定性好 ,可鉴定 15种基因型 ,应用于法医学鉴定具有可行性。     

RH血型系统遗传学研究进展

1940年Landsteiner和Wiener用印度恒河猴红细胞免疫兔子，发现兔子的抗恒河猴红细胞抗血清，可以凝集大部分白人的红细胞，进而发现了RH血型系统。半个世纪以来，关于RH血型遗传机理的假说，众说纷纭。其中比较著名的有Fisher-Race学说及Wiener学说等。20世纪90年代，随着分子生物学技术的发展，科学家提出了崭新的观点来解释RH血型系统的遗传。RH系统由1号染色体短臂上两个高度同源的基因RHD和RHCE编码。本文就RH血型系统最近几年的研究作一综述。     

PCR-限制性酶切片段-单链构象多态合并异源二聚体分析中国人群的Kell血型系统

目的分析中国人群的Keu血型系统的多态性，寻找合适的筛选方法。方法建立聚合酶链反应-限制性酶切片段-单链构象多态性方法（polymerase chain reaction-restriction fragment-single strand conformation polymorphism，PCR-RF-SSCP）合并异源二聚体分析，筛选找出KEL基因第7～9外显子区域中具有不同格局的样品，并对其测序，找出突变位点。结果500份标本中发现两个突变，分别是KEL基因第9外显子上966G〉A和第7内含子的第67位C〉A点突变，但没有涉及氨基酸序列的变化；突变率为4／1000；没有发现PCR-RF-SSCP合并异源二聚体分析有漏检情况。结论PCR-RF-SSCP合并异源二聚体分析可以作为有效的经济简便的筛选方法，适用于基因背景不明了、没有阳性对照品的群体。中国人群的Keu血型系统有自己的特征，多态性有别于其他民族，值得进一步研究。