移植自聚合肽纳米纤维材料与RhoA-siRNA复合物修复脊髓损伤

背景：脊髓损伤后RhoA表达增高是神经再生困难的主要原因之一,本课题在前期研究证明自聚合肽纳米纤维材料能较好地促进脊髓损伤后结构与功能修复的基础上,构建了自聚合肽纳米纤维材料与RhoA-siRNA复合材料用于修复脊髓损伤。目的：探讨自聚合肽纳米纤维材料介导siRNA干扰RhoA表达促进脊髓损伤修复。方法：54只昆明小鼠随机数字表法分为4组。假手术组仅作脊髓暴露,其他3组在切除1mm脊髓组织制备全横断脊髓损伤模型后,分别于损伤腔内填充生理盐水、自聚合肽纳米纤维支架或含有RhoA特异性siRNA复合物。通过FAM标记检测siRNA转染效率;免疫组化检测RhoA表达;免疫组化和定量分析检测再生神经纤维;行为学检测评定后肢功能恢复。结果与结论：移植FAM标记的含有RhoA特异性siRNA复合物后,在脊髓内的神经纤维及大脑皮质运动区神经元胞体内均可检测到FAM荧光信号,提示siRNA可从复合材料中释放到组织中并成功导入靶细胞。与SAPNS组和生理盐水组相比,含有RhoA特异性siRNA复合物和自聚合肽纳米纤维支架组可显著降低RhoA在神经元的表达,提高脊髓损伤区内NF阳性神经纤维的密度,促进后肢功能的恢复。结果提示通过自聚合肽纳米纤维支架的介导,含有RhoA特异性siRNA复合物能有效干扰RhoA表达,从而促进脊髓损伤的修复。     

多因子联合诱导脂肪组织源性干细胞分化为神经元样细胞

背景：国内均可见有探讨脂肪干细胞向神经元诱导分化的相关研究报道,但运用差速贴壁法纯化脂肪组织源性干细胞,多因子联合诱导脂肪组织源性干细胞分化为神经元样细胞的研究鲜有报道。目的：观察多因子联合诱导和分步诱导方案诱导大鼠脂肪组织源性干细胞体外分化为神经元样细胞的可行性。方法：取SD雄性大鼠腹股沟和附睾脂肪垫脂肪组织,酶消化法分离、差速贴壁法纯化脂肪组织源性干细胞。免疫荧光细胞化学法鉴定脂肪组织源性干细胞（CD44,CD49d,CD106）;＂鸡尾酒＂式神经元诱导培养基对脂肪组织源性干细胞进行诱导分化,并用免疫荧光细胞化学法鉴定（Nestin和NeuN）分化结果。结果与结论：大鼠腹股沟和附睾脂肪垫脂肪组织内分离、原代培养的脂肪组织源性干细胞形态均一,呈长梭形,细胞核椭圆形,核仁明显,细胞质染色浅,呈旋涡状克隆样生长;CD44和CD49d阳性表达而CD106阴性;诱导培养基内培养6h后脂肪组织源性干细胞呈锥体形或不规则,有短而细的指状突起;24h后多数细胞显示类神经元的形态学特征,且Nestin和NeuN阳性。提示肪组织源性干细胞在多因子＂鸡尾酒＂式培养基内可向神经元方向分化。     

过度饮酒引起的酒精中毒

<正> 过度饮酒是影响健康的一个重要因素.饮酒后进入血液的酒精主要依赖于肝内的酒精脱氢酶(alcohol dehydroge-nases,ADH)将其氧化分解,ADH含量的多少关系着不同人对酒精的耐受力的不同,当饮酒量超过耐受力并出现中毒反应时即称为过度饮酒.一次性饮入较大量的酒精,血液内酒精浓度(blood alcohol concentration,BAC)将在30～45min内达到峰值.一般情况下,若BAC达到或超过100mg/dl时各器官组织都将受到不同程度的损伤,其中以脑、肝最为严重.若BAC达到250mg/dl大部分饮酒者会昏迷,达到500mg/dl时即可引起死亡.酒精是具有亲脂性的小分子物质,能迅速透过血脑屏障进入脑内.脑内短时间的高BAC,能干扰神经递质和神经受体的活动,影响神经元对信息的反应和传递,抑制大脑皮质活动,使皮质下中枢的兴奋失去控制.脑内长时间的高BAC,将促使神经元凋亡、胞体数量减少、树突变短变形、生物膜及髓鞘被溶解乃至大小脑皮质及胼胝体等变性、全脑萎缩.肝纤维化是过度饮酒对肝脏是常见的病理损伤,在酒精进一步刺激下肝纤维化将发展为肝硬化.过度饮酒还可以影响精子形成及雄性激素分泌、垂体的激素分泌活动、胃肠道内的细菌生长、改变血液内的生化成分等等.父母长期过度饮酒,尤其是母体孕期饮酒将通过遗传物质的病变严重危害下一     

胶原膜包裹及环孢素A对鸡羽根角蛋白移植物组织相容性的改善作用

背景:前期实验提出将鸡羽根角蛋白管作为神经桥按材料这一设想,发现机体组织对鸡羽根角蛋白有一定的免疫捧斥作用埋植十于料周围组织中有人量炎性细胞出现.目的:观察经胶原膜包裹或应用免疫抑制剂后,鸡羽根角蛋白材料在体埋植对周围组织的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-1012007 01在南方医科大学组织学与胚胎学实验室完成.材料:选择SD大鼠42只,按随机数字表法分成5组,空白对照组6只,其余备组各9只.方法:参照胶原蛋白提取方法,由牛跟腱提取胶原蛋白.将经特殊处理的鸡剁根角蛋白埋植入大鼠竖脊肌组织中,鸡羽根角蛋白材料 环孢素A组大鼠材料埋植后2 周腹腔注射环孢素A5 mg/(kg·d):鸡羽根角蛋白材料浸泡环孢素A组将材料组仅埋泡于2.5 g/L 环孢素A后埋植:胶原膜包裹鸡羽根角蛋白材料组应用胶原膜包裹材料后埋植:单纯鸡羽根角蛋白材料组仅埋植材料:空白对照组仅作切口,不埋植材料.主要观察指标:分别于材料埋植后2,4,8周取材,光镜下观察埋植材料的降解情况及对周围组织的影响,应用免疫组织化学方法检测周围组织巨噬细胞的浸润情况.结果:①材料埋植后备组大鼠一般状况良好,刨口未见肿胀及渗液.②材料埋植后2,4,8周,材料埋植周围组织可见大量巨噬细胞,尤其足多核巨细胞分布于材料边缘,吞噬材料:炎性细胞数量较少,以鸡羽根角蛋白材料 环孢索A组为著.③材料埋植后2,4,8周各组材料埋植周围组织均可见CD68阳性表达细胞,其中4周时巨噬细胞阳性数比其他两个时点多(P<0.05).结论:短期应用免疫抑制剂可显著改善鸡羽根角蛋白的在体组织相容性;鸡羽根角蛋自在体内可降解,巨噬细胞尤其是多核巨细胞参与了该过程.     

腺病毒介导神经营养素-3基因转染施万细胞

[目的]构建神经营养素 3(NT 3)基因转染的施万细胞.[方法] NT 3基因重组腺病毒(AdvNT 3)扩增、纯化和测定后,转染体外培养的施万细胞(SCs).用免疫细胞化学和 ELISA方法分别检测 NT 3基因转染 SCs的 NT 3表达及培养液中 NT 3的含量. [结果]实验中获得的 AdvNT 3中外源基因序列与大鼠 NT 3的 DNA序列完全一致,与未基因转染 SCs相比,NT 3基因转染 SCs的 NT 3阳性增强,培养液中 NT 3含量增高.[结论]通过腺病毒介导可以获得 NT 3过量表达的基因转染 SCs.     

酒精引起海马CA_1区突触结构可塑性变化的电镜定量分析

<正> 酒精能迅速透过血脑屏障作用于脑,海马CA_1区是脑内对酒精神经毒性最敏感的结构之一.本研究通过定量分析饮酒后小鼠海马CA_1区突触结构的形态参数变化,以探讨酒精对脑形态和功能的影响.选用18只20～30g昆明小鼠,随机均分为3组.3组动物分别以纯水、5%酒精、10%酒精为唯一饮料连续喂养60天,应用透射电镜及图像分析方法观察并测定海马CA_1区突触结构的形态参数.结果显示:与纯水组相比较,5%和10%酒精组小鼠突触结构的突触后膜致密物质厚度、突触活性区长度及突触间隙宽度均显著变小(P<0.05).10%酒精组与5%酒精组相比,突触间隙宽度显著变小(P<0.05)而突触后膜致密物质厚度和突触活性区长度无显著性差异(P>0.05).结果提示:酒精可以引起突触的可塑性变化;酒精通过改变突触结构的形态而影响神经冲动的传递功能及动物机体的学习记忆.     

施万细胞移植促进大鼠脊髓全横断损伤后大脑皮质锥体神经元和红核神经元的存活

[目的] 探讨施万细胞移植对大鼠脊髓全横断损伤后大脑皮质感觉运动区神经元和脑干红核神经元存活的影响.[方法] 大鼠脊髓全横断损伤后移植吸附施万细胞的胶原或明胶,术后 3个月计数大脑皮质感觉运动区锥体神经元和脑干红核神经元密度以及红核体积.同时以单纯移植胶原或明胶或不移植物体的脊髓损伤大鼠为对照.[结果] 脊髓全横断损伤后,大脑皮质感觉运动区锥体神经元密度和脑干红核神经元密度明显较正常大鼠相应区域内的神经元密度降低;移植施万细胞的两个组(胶原施万细胞组和明胶施万细胞组)上述两个区域的神经元密度较未移植施万细胞的 3个组(对照组,胶原组和明胶组)高,差异有统计学意义;而移植施万细胞的两个组之间比较或未移植施万细胞的 3个组之间比较,上述区域的神经元密度无显著性差异.[结论] 脊髓全横断损伤可导致大脑皮质感觉运动区锥体神经元和脑干红核神经元发生死亡,施万细胞移植能够促进脊髓损伤后大脑皮质感觉运动区锥体神经元和脑干红核神经元的存活.     

腺病毒介导神经营养素-3基因转染施万细胞

【目的】构建神经营养素-3(NT-3)基因转染的施万细胞。【方法】NT-3基因重组腺病毒(AdvNT-3)扩增、纯化和测定后，转染体外培养的施万细胞(SCs)。用免疫细胞化学和ELISA方法分别检测NT-3基因转染SCs的NT-3表达及培养液中NT-3的含量。【结果】实验中获得的AdvNT-3中外源基因序列与大鼠NT-3的DNA序列完全一致，与未基因转染SCs相比，NT-3基因转染SCs的NT-3阳性增强，培养液中NT-3含量增高。【结论】通过腺病毒介导可以获得NT-3过量表达的基因转染SCs。     

开展学生上讲台活动,提高解剖学教学效果

为了调动学生学习解剖学的积极性，培养良好的学习方法，提高学习兴趣和学习效果，同时提高其综合素质，我们在我校2003级护理大专班开展了学生上讲台做小老师的活动。方法：在每个章节内容学习完后，结合教学大纲要求的重点和难点以及护理专业特色，给学生布置若干个题目，要求全体学生课后进行准备，约一周后利用课余时间请4—6位学生上讲     

中等医学教育应推行适合中国国情的目标教学

随着目标教学在全国中等医学院校的普遍开展,我校从1995年开始在护理中专系列改革中全面地推行了目标教学,它对贯彻落实新计划和新大纲、规范教学活动和改革课堂教学等,起到了良好的作用,产生了积极的影响。 回顾实践和现状,按照唯物辩证的观点,作者认为目标教学尚有取舍和为我所用的研讨问题,否则就会步入目标教学的误区。例如调动学生积极参与不够,没有充分发挥学生的主体作用;课堂教学以大班讲授理论为主,不能实施小班群体教学;评估反馈措施不力,矫正补救不及时;缺乏目标层层控制,没有做到步步达标等。