一种生物膜表面唾液酸的染色和定量方法

目的建立一种细胞、组织和器官生物膜表面唾液酸的染色及定量方法。方法设计平行实验,确定最佳染色条件。将接种在盖玻片上的细胞用PBS洗涤后,加高碘酸钠（NaIO₄,1mmol/L）于4℃轻度选择性氧化生物膜表面的唾液酸在C-7位成醛;随后,加入甘油工作液终止氧化,再用冷的PBS清洗;再加入荧光素-5-氨基硫脲（FTSC,100μmol/L）荧光染料与生成的醛基避光反应,并采用PBS洗涤;最后,采用DAPI染核并采用PBS-T清洗,甘油封片、拍照,采用图像处理软件量化分析。组织切片经多聚甲醛固定后,按照上述优化后的步骤染色。结果平行实验结果显示,FTSC染色40min细胞表面唾液酸的成像效果最佳;3种不同的细胞经唾液酸染色后均呈现强的绿色荧光,经100μmol/LH₂O₂处理24h后,荧光强度显著降低（P<0.01）;该方法可原位检测小鼠组织切片和动脉内壁的唾液酸水平。假阳性结果可通过纳入仅采用FTSC处理组排除或扣除背景。结论该方法可对不同细胞、组织和器官表面的唾液酸进行原位染色及定量分析。     

糖尿病患者与健康人脂蛋白单糖组成差异研究

目的:建立适用于检测人脂蛋白单糖组成的液相色谱方法,探讨糖尿病患者与健康人脂蛋白的单糖组成差异。方法:采用柱前衍生液相色谱法检测脂蛋白上的中性和碱性单糖,液相串联质谱法检测唾液酸的含量。结果:健康人和糖尿病患者高密度脂蛋白上的甘露糖（Man）、葡萄糖胺（GlcN）、N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）、葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）和N-乙酰神经氨酸（NANA）的含量依次为：(5.88±0.94)、(16.49±4.11)、(1.31±0.33)、（0.87±0.16）、（7.18±1.64）、（2.14±0.12)mmol/（gprotein）和(8.68±0.39）、（24.73±5.50）、（1.91±0.54）、（1.23±0.35）、（9.73±2.85）、（3.53±0.27)mmol/（gprotein）。健康人和糖尿病患者低密度脂蛋白上的Man、GlcN、GlcNAc、Glc、Gal和NANA的含量依次为：(29.20±3.57）、（50.77±4.72）、（5.28±0.64）、（10.06±1.37）、（28.44±3.96）、（6.86±0.11)mmol/（gprotein）和(30.08±3.78）、（38.52±6.38）、（3.79±0.78）、（7.63±1.50）、（20.05±2.63）、（6.45±0.18)mmol/（gprotein）;健康人和糖尿病患者极低密度脂蛋白上的Man、GlcN、Glc、Gal和NANA的含量依次为：(91.21±4.12)、(27.05±2.34)、(4230.95±15.83)、（43.40±3.75）、（2.95±0.24)mmol/（gprotein）和（82.40±0.51)、(30.16±0.32)、(4722.73±93.27)、（34.05±2.81）、(4.42±0.15）mmol/（gprotein）。结论:本文建立的柱前衍生液相色谱法适用于脂蛋白上的单糖组成分析。糖尿病患者脂蛋白的糖基化修饰与健康人相比存在显著差异。     

牙周炎促进动脉粥样硬化的机制

牙周炎作为一种常见病,被认为与许多系统性疾病密切相关,尤其是心血管疾病。动脉粥样硬化是心血管疾病发生发展的基础病变。近年来的研究表明牙周炎可促进动脉粥样硬化的发生与发展。文章回顾牙周炎在促进动脉粥样硬化方面的相关证据,重点探讨其促进动脉粥样硬化的相关机制,为临床诊治提供新思路。