糖尿病大鼠肾组织VEGF和TGF-β1的动态表达及意义

目的动态观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾组织中血管内皮生长因子(VEGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达情况,探讨它们在糖尿病肾病(DN)发生发展中的作用及其相互关系。方法实验动物随机分为5组,依病程长短分为:(1)A组(2周组);(2)B组(4周组);(3)C组(8周组);(4)D组(16周组);(5)E组(24周组),每组分别设有正常对照组(N组)和糖尿病组(DM组)。注射STZ法复制糖尿病大鼠模型;免疫组织化学方法检测肾组织VEGF、TGF-β1及纤连蛋白(FN)的表达;PAS染色光镜观察肾小球系膜、肾小管基底膜变化及细胞外基质沉积情况等的形态学改变;生化方法测定血糖、血肌酐及24h尿蛋白量。结果(1)正常对照组大鼠肾组织VEGF和TGF-β1均有少量表达,而糖尿病大鼠肾组织两者的表达均显著高于正常对照组。(2)糖尿病16周时肾组织VEGF表达与TGF-β1呈正相关。(3)随糖尿病进展,细胞外基质纤连蛋白(FN)在肾小管及肾小球表达增多,24h尿蛋白也增多,并且VEGF、TGF-β1两者都分别和FN、24h尿蛋白呈正相关性。结论糖尿病肾病大鼠肾组织中VEGF及TGF-β1参与了早晚期蛋白尿及肾脏肥大硬化的发生,并且VEGF和TGF-β1相互作用,共同促进了肾病的发生发展。     

烟酰胺对椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原的调控作用

目的：考察烟酰胺对白介素-1β诱导的体外兔腰椎间盘退变模型中Ⅰ、Ⅱ型胶原的保护作用，并初步探讨其机制。方法：构建兔腰椎间盘组织凝胶培养模型，将其分为正常对照组，烟酰胺对照组（加入0．5mg／ml烟酰胺），退变组（加入10ng／mlIL-1β）和3个烟酰胺治疗组（加入IL-1β的同时，并分别加入0．5mg／ml，0．25mg／ml和0．05mg／ml烟酰胺）。培养3天及1周时取各组髓核和纤维环分别行Ⅰ、Ⅱ型胶原基因RT—PCR检测，培养2周时行Ⅰ、Ⅱ型胶原、iN—OS、TGF—J31及Caspase--3免疫组化检测。结果：①RT—PCR显示3天及1周时，各治疗组Ⅰ、Ⅱ型胶原表达均强于退变组，烟酰胺的保护作用随浓度增加而增强。②Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化显示，各治疗组椎间盘正常结构和胶原含量均优于退变组，以大剂量烟酰胺治疗组最显著。③iNOS、Caspase--3免疫组化显示，治疗组阳性细胞染色率均低于退变组（P〈0．01）。TGF—β1免疫组化显示，治疗组阳性细胞染色率高于退变组（P〈0．01）。结论：烟酰胺能够抑制IL-1β诱发的椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原表达及含量的下降，这种保护机制与其抑制iNOS、Caspase--3表达和维持TGF-β1表达的作用有关。     

胰岛素控制血糖对糖尿病大鼠肾组织Smad7表达及纤维化病变的影响

 目的：观察胰岛素控制糖尿病大鼠血糖后是否能上调肾组织Smad7的表达,减轻或延缓糖尿病肾病(DN)肾纤维化病变的发生发展。方法：链脲菌素复制大鼠糖尿病模型,随机分为糖尿病组(DM组) 和胰岛素治疗组(INS组) (n=8);INS组于成模13周起用胰岛素将血糖控制在4~7 mmol/L;同时设正常对照组(NC组)(n=8)。17周处死大鼠,检测相应生化指标,观察胰腺和肾组织病理学改变,免疫组化和Western blotting检测各组大鼠肾组织组织转化生长因子β1 (transforming growth factor β1, TGF-β1)、Smad泛素化调节因子2(Smad ubiquitin regulatory factor 2, Smurf2)、Smad7、 E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、层连蛋白(fibronectin, FN)和胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)的蛋白表达。结果：与NC组比较,DM组大鼠体重显著减轻,24 h尿蛋白、血糖和甘油三酯显著升高(P<0.05),病理检查显示胰岛被破坏,肾组织TGF-β1、Smurf2、α-SMA、FN和collagenⅠ蛋白的表达均显著增加(P<0.05),并伴有肾小管Smad7和E-cadherin的表达减少(P<0.05);而经胰岛素控制血糖后,INS组大鼠较DM组体重逐渐增加,24 h尿蛋白和血糖均显著降低 (P<0.05),肾纤维化病变明显改善,TGF-β1、Smurf2、α-SMA、FN和collagenⅠ蛋白的表达均显著减少(P< 0.05),Smad7和E-cadherin的表达显著上调(P<0.05)。结论：控制血糖能恢复糖尿病大鼠肾组织Smad7蛋白表达水平,减少细胞外基质的沉积,延缓DN的纤维化进展,其机制可能与肾组织中TGF-β1和Smurf2表达降低、Smad7蛋白的泛素化降解减少有关。     

地黄不同方法提取物制剂降糖作用的实验研究

水煎煮中药是中成药生产中最常用的提取方法 ,亦符合传统中医用药习惯。我们的研究表明 ,地黄、黄芪、丹参配伍的中药复方具有改善糖尿病患者的症状和一定的降糖作用[1、2 ] 。鉴于地黄水煮提取物的量很大 ,超出生药干重量的 5 0 % ,不适用于制成胶囊剂。为了减少地黄提取物的总量 ,而又不影响其效果 ,我们观察了地黄水提、醇提及水醇法提取物制剂对小鼠肾上腺素诱发高血糖的降糖作用 ,以寻找合适工艺。1　材料与方法1.1　药物　全部中药材购自贵阳市药材公司。 (1)丹参水煮二次 ,第一次 2h ,第二次 1h ,过滤 ,合并滤液 ,浓缩至相对密度为 1…     

甲状腺次全切除术28例临床分析

目的探讨甲状腺次全切除术对甲状腺疾病的疗效。方法回顾总结2002年1月至2006年12月笔者所在医院28例甲状腺次全切除术患者的临床资料。结果28例患者平均手术时间为82min（45～130min）,术中出血量为80ml（40～180ml）,于术后6～7d拆线出院,100％达I／甲愈合;术后暂时性喉返神经损伤1例,永久性喉返神经损伤1例,复发1例,再次手术后,未见再次复发。结论充分完善的术前准备、手术时精心操作、手术后认真处理,可以避免甲状腺危象等严重并发症发生。     

丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾组织PTEN的影响

目的研究丹芪合剂和依那普利对糖尿病(DM)大鼠肾组织第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)表达的影响,探讨丹芪合剂和依那普利治疗糖尿病肾病(DN)的作用及机制。方法将SD大鼠分成对照组、糖尿病组、丹芪合剂治疗组和依那普利治疗组(n=8)。尾静脉注射链脲菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型;12周处死大鼠,检测相应生化指标和计算肾脏指数;观察肾组织病理学改变;免疫组化和Western blotting检测肾组织PTEN、TGF-β1、p-AKT1(Ser473)和FN蛋白的表达;RT-PCR检测PTENmRNA的表达。结果丹芪合剂和依那普利能减轻DM大鼠肾脏肥大,显著改善肾功能,减轻DN肾脏病变及肾间质FN表达,下调TGF-β1和p-AKT1(Ser473)表达,上调PTEN蛋白和mRNA的表达。结论丹芪合剂和依那普利可能通过上调肾组织PTEN表达,抑制AKT1激活,减少FN的沉积,减轻或延缓了DN的病变。     

锂在缺碘性甲状腺肿发病中的协同作用

<正> 流行病学调查和动物实验证明,锂是一种致甲状腺肿物质,并注意到某些地方性甲状腺肿的地理分布与锂的地理分布相吻合,而且在同样缺碘情况下,甲状腺肿的发病率与人群血清锂水平呈正相关。但是,有关锂与缺碘性甲状腺肿发生发展关系的实验研究,报道较少,结果也不尽一致。为阐明锂对缺碘性甲状腺肿的影响及其在甲状腺肿发生机制中的作用,我们进行了以下实验研究。     

阑尾穿孔伴腹膜炎的手术治疗体会

基层医院，阑尾穿孔伴腹膜炎在临床上比较多见，预防并发症的出现尤为重要。现将我科自1998年以来收入的82例阑尾穿孔伴腹膜炎的手术治疗报告如下。     

胰岛β细胞Metrnl基因敲除小鼠的鉴定及初步表型分析

目的：基于Cre-LoxP重组酶系统,构建胰岛β细胞Metrnl基因敲除小鼠(Metrnl-KO),为进一步探究Metrnl基因在糖尿病疾病中的发病机制提供动物模型。方法：将雌雄基因型均为Metrnl^floxp/+的小鼠合笼杂交,筛选出基因型为Metrnl^floxp/floxp的小鼠,将该基因型小鼠与胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶(Ins-2)工具鼠进行杂交繁育,获得基因型为Metrnl^floxp/+;Cre+的小鼠;再将Metrnl^floxp/+;Cre+小鼠与Metrnl^floxp/floxp小鼠杂交获得Metrnl^{floxp/floxp;Cre+}小鼠,基因型为Metrnl^{floxp/floxp;Cre+}的小鼠即为目的鼠。采用RT-q PCR检测Metrnl和胰岛素(Ins-1和Ins-2)的m RNA水平;免疫组化和免疫荧光染色观察胰岛组织Metrnl和胰岛素的蛋白表达情况;记录小鼠体重,同时测定小鼠糖耐量和胰岛素耐量。结果：...