宁波市儿童地中海贫血基因变异分析及其与红细胞参数的相关性

目的探究宁波市儿童地中海贫血基因变异类型及构成, 并分析其与红细胞参数的相关性。方法以2019年1月至2020年12月在宁波市妇女儿童医院进行地中海贫血基因检测的785例儿童作为回顾性研究对象, 分析当地儿童地中海贫血基因变异类型及构成情况;并从中选取地中海贫血基因变异携带者238例和同期体检的健康儿童100例(对照组)进行血常规检测, 分析地中海贫血基因突变类型与血液学指标的相关性。结果在进行地中海贫血基因检测的785例儿童中, 共有571例确诊为地中海贫血基因变异携带者, 检出率为72.7%, 包括α-地中海贫血228例、β-地中海贫血337例、αβ-复合型地中海贫血6例, 涵盖17种变异类型、25种基因组合形式。对照组、α-地中海贫血组和β-地中海贫血组的红细胞计数(RBC)、红细胞比容(HCT)、血红蛋白浓度(Hb)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、平均红细胞体积(MCV)和红细胞分布宽度(RDW)比较, 差异均有统计学意义(H/F = 125.03、86.24、141.06、192.99、121.46、198.63、178.06, P均&...     

血管紧张素转换酶2基因转染对人血管内皮细胞中氧化应激水平的影响

背景血管紧张素转换酶2(ACE2)是迄今为止发现的人类 ACE 的第一个同源基因,是血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的主要降解酶,但其在氧化应激中的调控作用尚不清楚。目的探讨重组 ACE2基因转染对体外培养人血管内皮细胞中由 AngⅡ诱导的 NAPDH 氧化酶 p22~(phox)表达和丙二醛(MDA)水平的影响。方法克隆和构建含人 ACE2基因全长的重组质粒(pACE2),并将之转染人人血管内皮细胞中。分别采用实时定量 PCR 和 Western印迹技术检测转染细胞中的 p22~(phox)的 mRNA 与蛋白表达情况。采用硫代巴比妥酸比色法测定细胞中 MDA 含量。结果 AngⅡ(100 nmol/L)和 AngⅣ(100 nmol/L)刺激后均可诱导人内皮细胞中 p22~(phox)的 mRNA 及蛋白表达大大增加,伴有细胞中 MDA 水平升高(n=6,P 均<0.01)。pACE2基因转染可抑制细胞中由 AngⅡ和 AngⅣ诱导的 p22~(phox)表达,同时伴 MDA 水平下调(n=5～6,P 均<0.01)。结论 ACE2基因过表达可明显抑制人内皮细胞中 p22~(phox)的表达,而且降低 MDA 水...     

靶向survivin基因siRNA对喉癌细胞增殖、凋亡的影响

目的观察靶向survivin基因的siRNA对喉癌细胞Hep-2增殖和凋亡的影响,为喉癌的基因治疗提供有效靶点及技术。方法使用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将靶向survivin基因的siRNA转染至喉癌细胞株Hep-2;MTT[3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐]法检测对喉癌细胞Hep-2增殖的影响;RT-PCR检测喉癌细胞Hep-2survivin基因mRNA表达的变化;Western Blot检测survivin基因蛋白表达;流式细胞技术检测喉癌细胞Hep-2凋亡情况。结果各浓度survivin-siRNA转染组细胞增殖抑制率和凋亡率均明显高于对照组（〈0.05）,survivinmRNA和蛋白表达有不同程度减弱,并且有明显的浓度依赖性,随着浓度的上升表达率下降。结论利用RNA干扰技术沉默survivin基因表达可以显著抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖,并在一定程度上诱导其自发凋亡,不同浓度survivin-siRNA转染能下调survivinmRNA和蛋白表达,靶向survivin基因的RNA干扰技术在喉癌的基因治疗中具有一定价值。     

特异性微小RNA抑制剂对胃癌细胞增殖的影响

目的： 探讨特异性微小RNA抑制剂对胃癌细胞增殖的影响。方法: 设计并合成4种微小RNA（miR-17、miR-21、miR-106a和miR-421）的2’-甲氧修饰的RNA寡核苷酸（微小RNA抑制剂）,用脂质体分别转染到SGC-7901和MGC-803胃癌细胞,然后用实时定量逆转录-聚合酶链反应技术检测微小RNA的表达情况,最后用MTT方法检测胃癌细胞的增殖情况。结果: 4种微小RNA抑制剂均有效抑制了SGC-7901和MGC-803细胞中相应微小RNA的表达;除miR-21抑制剂未见抑制胃癌细胞的增殖外,其它3种微小RNA抑制剂均以剂量依赖方式抑制胃癌细胞的增殖且对SGC-7901的效果优于MGC-803。结论: 微小RNA的特异性抑制剂能有效抑制胃癌细胞的增殖,采用这种技术为研究胃癌的发病机制提供了新方法。     

中国畲族人群DYS287遗传多态性的研究

背景DYS 287位点是位于Y染色体长臂Yq11的一个Alu序列插入多态(Y chromosomal Alu insertion polymorphism,YAP),关于中国畲族人群DYS287遗传多态性的研究尚缺乏.目的揭示中国畲族群体DYS287位点多态性的分布规律,以及畲族人群与其他少数民族在此位点多态性方面的差异和联系,为医学遗传学、人类学和法医学等的研究提供可靠数据和科学依据.设计前瞻性研究.地点、对象和方法在江西、浙江、福建三省畲族世居区内随机选择无血缘关系、三代为畲族的男性个体117例,抽取静脉血5mL,倒至用肝素溶液浸泡过的纱布中,室温条件下自然干燥,制成血纱块.提取DNA后,采用PCR-SSP法对此位点进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳检测结果.主要观察指标①将电泳后的凝胶置于紫外检测仪下观察是否有455bp扩增片段.②不同地点的采样例数、YAP+例数,Alu插入频率比较.结果117例畲族男性个体中有20例为YAP+,PCR扩增片段为455bp,YAP+频率为17.1%;江西、浙江和福建三省不同地区的畲族人群Alu插入频率(即YAP+频率)分别为18.18%,18.06%,13.04%,YAP+频率比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论DYS287位点作为一种稳定、可靠的遗传标记可以为研究民族间的遗传关系及其起源提供可靠的证据.     

融合基因pCEAcd-tk/前体药物体系的体外旁观者效应的差异性

目的：观察用白细胞介素－２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｒｔ－２,ＩＬ－２）基因修饰小鼠骨髓来源的树太细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ,ＤＣ）后,ＤＣ表达细胞因子和趋化因子的变化及ＤＣ体内免疫后,小鼠体内主要脏器中ＩＬ－２表达情况。探讨其对抗原提呈微环境的改善及其可能的机制。方法：用ＥＬＩＳＡ方法检测ＤＣ培养上清和小鼠血清及脏器中ＩＬ－２的含量,用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＤＣ中ＩＬ－２,ＩＦＮ－γ,ＩＬ－     

枸杞多糖对人肝癌细胞HepG2生长的影响及其分子机制

目的探讨枸杞多糖(Lycium barbarumpolysaccharides,LBP)对人肝癌细胞HepG2生长的影响及可能机制。方法人肝癌HepG2细胞用100~1 000 mg/L LBP处理1~5 d,分别用MTT方法、流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。用Western blotting分析周期蛋白(cyclin)和周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependentkinase,CDK)表达的变化。结果 LBP以质量浓度依赖方式抑制肝癌细胞的生长,阻滞细胞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡;其分子机制为引起cyclin Dc、yclin E和CDK2蛋白表达下降。结论 LBP抑制人肝癌细胞HepG2增殖的机制包括阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡。     

中医推拿临床疗效相关影响因素探究

推拿是传统中医学的重要组成部分, 具有简便廉验的特点, 临床上在治疗肌肉筋骨病变、内脏病、妇科病、小儿常见病等方面显示出良好效果。本文对推拿疗效的影响因素进行分析, 从诊断因素、治疗因素、预后因素、患者因素和医患沟通等方面进行了探讨, 认为医者必须进行良好的医患沟通, 恰当评估患者基础病及身体素质, 在明确诊断的基础上, 针对患者体质、基础疾病与生理状态等, 采取适宜的按摩手法与预后措施, 才能达到良好的治疗效果, 提高临床疗效。