人外周血单核细胞源性朗格汉斯细胞和表皮炎症样树突状细胞的诱导及表型分析

目的利用人外周血单核细胞体外诱导培养朗格罕氏细胞(Mo-LC)和炎症性树突状表皮细胞(Mo-IDEC)并观察其表型特点。方法联合应用LymphoPrepTM梯度离心试剂和CD14+磁珠分离和筛选外周血CD14+单核细胞;在重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和重组人白介素4(IL-4)的基础上分别于第0、2、4天加入人天然TGF-β1或β-巯基乙醇(β-ME)。培养第6天时收集细胞,通过相差显微镜观察其形态,并利用单克隆抗体和流式细胞术对诱导细胞亚群检测细胞表面分子的表达水平。结果 CD14+单核细胞体外诱导培养6 d后可形成具有树突状外观的Mo-LC和Mo-IDEC,2种细胞均不同程度表达CD1a、FcεRI、FcεRII、TLR1、TLR2;Mo-LC表达CD207,Mo-IDEC表达CD206。特应性皮炎患者来源的Mo-IDEC表面CD1a表达高于Mo-LC,且CD23、TLR2、FcεRI的表达水平显著高于健康对照组。结论利用外周血单核细胞可在体外成功诱导Mo-LC和Mo-IDEC,这2种细胞表型特点与体内分离的细胞在形态和表型上类似,为体外进一步研究这2类细胞的功能打下基础。     

Tax1结合蛋白1对B细胞功能的抑制作用

目的探讨Tax1结合蛋白1(TAX1BP1)对B细胞增殖、活化、免疫球蛋白分泌等功能的影响。方法利用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19~+B细胞,转染siRNA下调TAX1BP1的表达;并利用TAX1BP1慢病毒感染B细胞株Raji细胞系建立稳定下调TAX1BP细胞系。体外用LPS刺激B细胞后通过CCK8、流式细胞术和ELISA法分别评价TAX1BP1对B细胞增殖、B细胞表面共刺激分子表达、细胞周期以及免疫球蛋白分泌的影响。结果与对照组相比,敲低TAX1BP1促进了B细胞的增殖(P=0.008)及Raji细胞的增殖(P0.000 1),上调了B细胞表面活化分子CD69和CD80的表达(P0.001),促进了免疫球蛋白lgG及lgM的生成(P0.05)。结论TAX1BP1可以通过抑制B细胞增殖、活化、抗体产生等多方面调节B细胞功能。     

神经营养因子3-壳聚糖载体诱导神经干细胞分化为神经元的亚型及其电生理特性

背景：前期研究已证实神经营养因子3-壳聚糖载体可支持神经干细胞的存活和增殖,同时可高效诱导神经干细胞向神经元方向分化。目的：观察神经营养因子3-壳聚糖载体对神经元发育进程、发育各阶段电生理特性及发育成熟神经元亚型的影响。方法：取第3代新生大鼠脊髓神经干细胞,分4组培养：空白对照组加入神经干细胞培养基,壳聚糖组加入含壳聚糖的神经干细胞培养基,NT3组加入含神经营养因子3的神经干细胞培养基,NT3-壳聚糖组加入含神经营养因子3-壳聚糖载体的神经干细胞培养基。利用免疫荧光染色观察神经干细胞发育各阶段标志物表达情况,借助全细胞膜片钳技术评价神经干细胞发育过程中电生理特性的变化情况,利用免疫荧光染色观察神经干细胞分化21 d后中间神经元的亚型。结果与结论：(1)Nestin、DCX、Tuj1及MAP2免疫荧光染色显示,神经营养因子3-壳聚糖载体维持了神经干细胞池的稳态,并且通过加速神经母细胞的发育进程来促进神经元发育成熟;(2)全细胞膜片钳记录发育过程中的细胞发现,营养因子神经营养因子3和神经营养因子3-壳聚糖在发育早期对神经干细胞膜功能以及细胞膜上离子通道的发育成熟具有一定的促进作用,但是仅有...     

1%盐酸布替萘芬软膏治疗浅部真菌病随机单盲对照多中心临床试验

采用1%盐酸布替萘芬软膏与1%联苯苄唑乳膏治疗219例浅部真菌病,治疗结果表明,二类新药1%盐酸布替萘芬软膏对手足癣和体股癣临床疗效、真菌学疗效、不良反应发生率与对照药1%联苯苄唑乳膏相似。虽然停药后1周试验组手足癣和体股癣治愈率均高于对照组(P<0.05),但两组的有效率均差异无统计学意义(P=1.000)。     

肝细胞治疗肝衰竭的机理及临床意义

近十余年来许多学者致力于肝细胞治疗实验性肝衰竭的研究,发现移植或输注肝细胞或再生肝胞质液(Cytosol)可显著提高肝衰动物的存活率。苏联和日本学者已将动物的肝细胞输入人体来代替失去功能的肝     

酶联免疫吸附法检测血清半乳甘露聚糖用于侵袭性曲霉菌感染早期诊断的实验研究

国外学者通过对血清和尿液中曲霉菌半乳甘露聚糖(galactomannan ,GM )抗原的检测 ,发现其对侵袭性曲霉病(IA)的早期诊断有较重要价值[1 ,2 ] 。我们建立了IA兔模型 ,采用酶联免疫吸附试验法 (ELISA)检测感染后动物血清中GM的含量 ,通过与传统的血培养比较 ,评价ELISA检测GM在诊断IA中的价值。一、材料和方法1 动物和菌株来源 :烟曲霉菌 (CCCCMIDA1 )菌株购自中国微生物菌种保藏管理委员会医学真菌中心 ,日本大耳白兔购自第三军医大学动物所。2 主要试剂和仪器 :GM检测试剂盒 :PlateliaAspergillus(法国Bio Rad产品 ) ,变色…     

表皮干细胞的生物学标记物

背景：大面积烧伤、严重创伤后皮肤缺损的修复问题一直以来是急待突破的临床技术瓶颈。随着组织工程时代的到来,表皮干细胞越来越多的被应用于组织工程、细胞替代治疗及基因工程等科技领域,因此其分离、鉴定成为备受关注的研究热点。目的：综述国内外关于表皮干细胞生物学标记的研究进展。方法：计算机检索中国生物医学文献数据库、中文科技期刊全文数据库、中文学术1刊全文数据库及PubMed、EMbase数据库有关表皮干细胞特异性标志物的文章,检索词为“表皮干细胞,整合素,角蛋白,P63,CD71,连接蛋白43,端粒酶,血管紧张素转化酶,烟酸己可碱,Epidermalstemcells,integrin,keratin,P63,CD71,telomerase,ACE,cx43,Hoechst”。排除较陈旧的理论观点以及重复性研究。结果与结论：最后纳入40篇文献。结果显示,表皮干细胞在皮肤组织工程中的应用为皮肤缺损修复的组织来源带来了曙光,研究发现表皮干细胞分布在毛囊隆突部和表皮的基底层,然而整个基底细胞中只有约4％的细胞是干细胞,因此正确分离、培养、鉴定表皮肤干细胞成为关键问题,由此表皮干细胞特异性标记物的相关研究成为热点。目前在表皮干细胞的生物学标记物方面已取得多方面的进展,迄今为止,尚未能找到一种绝对、公认的表皮干细胞标记物。研究主要集中在整合素、角蛋白、P63、CD71、连接蛋白43、端粒酶等方面,另外近年来烟酸己可碱、CD90、CD98、CD200在表皮干细胞的生物学标记物研究领域有所报道。研究发现每一种标记物都有其缺陷及不足之处,目前在表皮干细胞研究领域里仍有很多问题急待解决。     

侵袭性真菌感染非培养快速诊断方法的评价

侵袭性真菌感染是深部真菌病中危害最大的一类 ,常发生于免疫功能低下的患者 ,是医院感染常见的类型之一 ,其临床表现多样化 ,病情进展快 ,常危及患者的生命。早期快速诊断有助于及时控制病情 ,改善预后。依靠常规真菌分离、培养和组织病理鉴定难以满足临床需要 ,故发展敏感、特异的早期快速诊断方法已成为条件性侵袭性真菌感染实验诊断研究领域的热点和难点[1 4 ] 。近年来 ,相继建立了一系列非培养的检测方法 ,为临床早期快速诊断侵袭性真菌感染带来了希望。一、特异性抗体的检测特异性抗体检测已广泛用于病毒、细菌等多种微生物感染的早…     

人毛囊细胞来源双层皮肤替代物的构建和组织学特征

目的 探索人毛囊细胞构建的双层皮肤替代物的组织学特征.方法 用毛乳头细胞、真皮鞘细胞分别与外根鞘细胞构建复合壳多糖双层皮肤替代物,分析其体外和移植至大白鼠后的组织学特征.结果 毛囊来源细胞构建的皮肤替代物中表皮细胞排列更紧密、角化突出,真皮内可见与表皮相连的上皮细胞柱及球形膨大细胞团形成.结论 毛囊细胞是构建皮肤替代物的良好细胞来源.     

皮肤病专业新进展与研究方向

目的总结分析近5年来国内外皮肤病专业发展现状,提出未来军队皮肤病研究方向和重点。方法应用情报学和调研的方法 ,对近5年皮肤病专业的学术发展成果和动态进行检索与整理,做出概要的综述和思考。结果近5年来,皮肤病专业取得了长足的发展,特别是银屑病、结缔组织病、白癜风、皮肤真菌病等方面的研究取得了可喜的成绩,军队皮肤病专业创办2种医学期刊,获得军队医疗成果一等奖、科技成果二等奖、军队医疗成果二等奖、中华医学科技二等奖、省科技进步二等奖各1项,"军事训练中皮肤病调查及防治研究"有突破性进展。结论今后5年,全军皮肤病的研究方向仍然是面向基层、面向部队,加强高原部队常见皮肤病的防治研究,保障部队指战员心身健康,扶植重点研究项目,促进军队皮肤病专业的更大发展。