盐酸米托蒽醌传递体的包结机理研究

探寻盐酸米托蒽醌-卵磷脂相互作用机理以解释其传递体的相关特性。用薄膜法制备盐酸米托蒽醌传递体并对其制剂学性质进行研究;用紫外-可见光分光光度法、载药传递体与空白传递体的δ-电位的变化、探针扫描显微镜、差示热分析法以及测定体外释药特性等实验手段研究盐酸米托蒽醌传递体中盐酸米托蒽醌的作用位置、作用方式及对传递体结构、体外释药特性的影响。紫外-可见光扫描图谱显示盐酸米托蒽醌与传递体的作用方式为镶嵌方式,盐酸米托蒽醌的蒽醌母核嵌入卵磷脂双分子层的亲油基部分,激光散射测定δ-电位表明盐酸米托蒽醌的烃氨基侧链与磷酸基团之间产生的静电吸引,使带负电的载药传递体的δ-电位绝对值小于空白传递体;探针扫描显微镜测定结果再次证实盐酸米托蒽醌与传递体的作用方式为镶嵌方式,故盐酸米托蒽醌传递体包封率高,缓释作用明显,稳定性增加     

加味二仙汤联合心理疏导对更年期抑郁症女性单胺类神经递质的影响

目的观察加味二仙汤联合心理疏导对更年期抑郁症女性抑郁程度和各脑区神经递质的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将135例更年期抑郁症女性患者随机分为西药组、中西医结合组和心身并治组,各组45例。西药组选用口服盐酸舍曲林,中西医结合组在西药组基础上口服加味二仙汤,心身并治组在中西医结合组基础上,加用心理疏导干预疗法,疗程均为8周。观察治疗前后各组患者汉密尔顿抑郁量表-17(Hamilton Depression Scale-17,HAMD-17)评分和各脑区神经递质的变化。结果最终完成试验病例西药组39例,中西医结合组42例,心身并治组41例,根据HAMD-17评分判定疗效,西药组的总有效率是48.89%(22/45),中西医结合组的总有效率是78.78%(35/45),心身并治组的总有效率是80.00%(36/45)。与西药组比较,中西医结合组及心身并治组治疗有效率更高(P0.05)。与本组治疗前比较,3组治疗后HAMD-17评分均明显下降(P0.01);心身并治组5-羟色胺(5-HT)水平在左枕区及左颞区升高(P0.05,P0.01);多巴胺(DA)水平在左枕区及左颞区升高(P0.05,P0.01);中西医结合组治疗后去甲肾上腺素(NE)水平在左枕区有显著升高(P0.01),在左枕区NE水平较其他组明显升高(P0.017)。结论加味二仙汤联合心理疏导可以缓解更年期抑郁症女性的抑郁程度,提高脑内5-HT、DA和NE水平,提示加味二仙汤联合心理疏导可能是通过改善中枢神经系统单胺类神经递质水平而改善更年期抑郁症女性的抑郁状态。     

甘草次酸对银屑病患者角质形成细胞增殖、凋亡及miR-21表达的影响

目的 初步探讨甘草次酸对银屑病患者角质形成细胞增殖、凋亡的影响以及可能的作用机制。方法 体外原代培养银屑病患者角质形成细胞,将传代2 ~ 3次后的角质形成细胞分为对照组和药物处理组,药物处理组加入甘草次酸,使其终浓度分别为1、2、4、8和10 mg/L,对照组不加甘草次酸。作用24 ~ 72 h后,MTS法检测甘草次酸对角质形成细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度甘草次酸处理24 h后,角质形成细胞凋亡的变化;实时荧光定量PCR检测甘草次酸对银屑病患者角质形成细胞miR-21表达的影响。结果 1 ~ 10 mg/L甘草次酸作用角质形成细胞24 ~ 72 h后,随着甘草次酸作用时间延长和浓度增加,细胞增殖率逐渐下降。1、2、4、8和10 mg/L甘草次酸作用24 h后,角质形成细胞凋亡率分别上升至（9.64 ± 0.86）%、（25.24 ± 2.93）%、（27.68 ± 3.70）%、（35.55 ± 4.23）%、（38.89 ± 2.31）%;两两比较显示,除1 mg/L甘草次酸组外,其他各组与对照组（10.09 ± 0.69）%相比,差异均有统计学意义（均P < 0.01）。1、2、4 mg/L甘草次酸处理角质形成细胞24 h后,miR-21表达水平（2-ΔΔCt）分别为0.24 ± 0.04、0.22 ± 0.07、0.17 ± 0.05,与对照组0.92 ± 0.12相比,差异有统计学意义（F = 213.10,P < 0.05）。2 mg/L甘草次酸作用18、24、48 h后,miR-21基因表达水平分别为0.55 ± 0.02、0.22 ± 0.06、0.15 ± 0.06,总体呈下降趋势,与对照组（0.98 ± 0.02）相比,差异有统计学意义（F = 238.10,P < 0.05）。结论 甘草次酸可抑制银屑病患者角质形成细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与下调miR-21表达有关。     

米托蒽醌隐形阳离子脂质体的制备及体内外抗肿瘤活性

目的:制备米托蒽醌隐形阳离子脂质体(YM),并研究其制剂学性质及体内外抗肿瘤作用。方法:膜材料中引入2-二油酰基羟丙基-3-N,N,N-三甲铵氯(DOTAP)和聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂乙醇胺(DSPE-PEG₂₀₀₀)分别作为阳性和隐形膜材,采用硫酸铵梯度法制备YM,并以泄漏率为指标,考察其稳定性;高内涵扫描仪考察2 h时其在B16F10细胞中的摄取情况;MTT 法测定其对B16F10细胞的增殖影响;B16F10皮下移植瘤模型研究其体内抗肿瘤作用。结果:YM的粒径和Zeta电位分别为(118.2±4.6)nm和(31.6±4.9)mV;载药量和包封率分别为(6.5±0.2)%和(96.2±1.8)%;血清中48 h累积泄漏率<30%,稳定性良好;YM的细胞摄取量是普通长循环脂质体(CM)的10倍,IC₅₀与CM相比显著降低(P<0.05),体内抑瘤率为58.8%,显著高于CM组的42.7%。结论:YM稳定性良好,具有较好的体内外抗肿瘤活性。     

结肠癌靶向米托蒽醌脂质体的制备及其抗肿瘤活性研究

目的:比较透明质酸(HA)修饰的脂质体(HA-LP)与普通脂质体(LP)的抗转移及抗肿瘤活性。方法:采用薄膜水化法制备空白脂质体,通过透明质酸上的羧基与膜材中DSPE的氨基反应将HA连接在脂质体上,运用硫酸铵梯度法包载模型药物米托蒽醌;通过透射电镜表征脂质体形态;免疫荧光法检测结肠癌细胞(CT26 cells)中透明质酸受体CD44表达情况;高内涵扫描仪检测结肠癌细胞对脂质体的摄取情况;划痕实验考察2组脂质体抑制细胞转移的能力;体内抗肿瘤实验考察2组脂质体的抑瘤效果。结果:所制备的脂质体形态均一,包封率均大于95%。免疫荧光结果显示,结肠癌细胞中CD44受体高度表达。相同的药物浓度下,HA-LP相较于未修饰的脂质体具有明显增加的细胞摄取。划痕实验结果表明,HA可能与受体CD44存在某种相互作用,抑制了结肠癌细胞的转移,表现出HA-LP具有更强的抗转移活性。体内抗肿瘤结果显示,HA-LP对小鼠荷结肠癌实体瘤的抑瘤率为62.1%,显著高于普通脂质体组(46.6%,P<0.05)。结论:HA-LP与细胞膜上的受体CD44作用,显著增加了其细胞摄取,并抑制了结肠癌细胞的转移,体内抑瘤结果同样显示,具有肿瘤靶向功能的HA-LP具有更强的抑制肿瘤生长的能力。     

从心胆论治纤维肌痛症一例

由于临床对纤维肌痛症认识程度不够、误诊率高、临床诊断率低的限制,纤维肌痛症患者很难得到充分的临床治疗。本文详述1例西药治疗效果不佳的纤维肌痛患者从心胆论治的病案,发现纤维肌痛病因病机特点。从中医心身医学的角度观察,纤维肌痛疼痛性质、痛势和疼痛位置均与“筋痹”所类似,“筋痹”其病位在筋骨肌肉之间,为肝所主,肝藏血,痰浊瘀血内阻,辨证为痰热瘀阻、心神不宁证,方选黄连温胆汤加减。纤维肌痛症病位在“筋”,属痰浊瘀血阻滞筋肉,发为“筋痹”,不能简单从“痹”论治,注重心胆的关系,温胆调神方为关键;同时需要注意疾病的转归,初起理气化痰、宁心祛瘀为要,防复则健脾理气以绝生痰之源。中医治疗纤维肌痛症需心身同治方可治疗妥当、减少复发,着眼“心”与“胆”的关系,方能取得满意疗效。     

《伤寒杂病论》痛证病因与证治思想初探

《伤寒杂病论》中对疼痛的论述颇多,病因包括寒邪、热邪、寒热错杂、气机不利、水邪、风湿、痰饮、正虚为病,分别散在不同篇目中。不同病因所致的疼痛各自具有一定的特点,仲景亦采用不同的治法。寒邪所致的疼痛,究其表里,祛寒止痛;因热所致的疼痛,结合六经特点,泄热止痛;寒热错杂的痛证,仲景擅用和法;气机不利的痛证,《伤寒杂病论》中运用柴胡剂运转枢机止痛;风湿所致痛证结合湿邪特征并类比表证论治;因虚所致疼痛,仲景重视固护中焦,补虚则痛止。仲景对于痛证的辨证论治,首辨虚实,有虚者必顾其虚;再辨表里,使邪去不伤正。本文根据病因分类,归纳整理《伤寒杂病论》中有关痛证辨证与治法的条文,并加以总结,以期寻找仲景的痛证辨治规律。     

不同电针频率对慢性应激抑郁刺激模型大鼠行为学和下丘脑5-羟色胺水平的影响

目的探讨不同电针频率对慢性应激抑郁刺激(CUS)模型大鼠行为学及下丘脑5-羟色胺(5-HT)含量的影响,寻求电针治疗抑郁症的最佳频率。方法选取50只健康雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、2 Hz电针组、50 Hz电针组和100 Hz电针组,每组10只;除空白组外,模型组和电针组接受CUS结合孤养的方式造模,共21 d;造模成功后电针组分别接受2、50、100 Hz电针治疗,连续7 d;分别于0、21、28 d记录各组大鼠体质量、开野实验中水平运动和垂直运动评分、糖水消耗量;采用酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠下丘脑5-HT含量。结果与空白组比较,模型组和电针组造模21 d后体质量、水平运动和垂直运动评分、糖水消耗量、下丘脑5-HT含量均显著下降(P0.01)。电针治疗后,与模型组比较,2 Hz组、50 Hz组和100 Hz组水平运动和垂直运动评分、糖水消耗量、下丘脑5-HT含量均升高(P0.05,P0.01)。与50 Hz组和100 Hz组比较,2 Hz组水平运动和垂直运动评分、糖水消耗量、下丘脑5-HT含量均增加(P0.05,P0.01)。结论电针能够改善大鼠抑郁状态,2 Hz电针抗抑郁疗效优于50 Hz和100 Hz。     

女性更年期抑郁障碍临床特征及中医证候分析

目的:分析探讨女性更年期抑郁障碍的临床特征及中医证候。方法:将108例首次发病的单相抑郁症患者分为3组,其中≥45且65岁女性更年期抑郁障碍患者(随机选取)36例为女性更年期抑郁障碍组(以下简称为更年期组),45岁非更年期抑郁障碍女性患者(随机选取)36例为女性非更年期抑郁障碍组(以下简称对照Ⅰ组),≥45且65岁男性抑郁障碍患者(随机选取)36例为男性抑郁障碍组(以下简称为对照Ⅱ组)。均于初次就诊时检测症状自评量表(SCL-90)、艾森克人格测验(EPQ)、抑郁自评量表(SDS)评分、焦虑自评量表(SAS)评分,脑讯息搜索(SET)系统分析抑制性神经递质(INH)、五羟色胺(5-HT)、乙酰胆碱(ACH)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、兴奋性神经递质(EXC)。结果:⑴SCL-90中更年期组的焦虑分为(36.06±8.36)分,对照Ⅰ组为(42.03±15.44)分,2组相比差异有显著性(P0.05)。对照Ⅱ组为(48.08±9.85)分,2组相比差异有非常显著性(P0.01);更年期组精神病性评分为(26.13±13.94)分,对照Ⅰ组为(35.48±14.89)分,2组相比差异有非常显著性(P0.01)。⑵更年期组的敌对评分为(36.12±8.37)分、恐惧评分为(34.01±17.08)分,对照Ⅱ组分别为(31.86±8.95)分、(42.92±20.12)分,2组相比差异有显著性(P0.05)。⑶更年期组SAS评分为(54.32±4.82)分,对照Ⅰ组为(56.81±3.78)分, 2组SAS相比差异有显著性(P0.05);对照Ⅱ组SAS评分为(58.45±7.18)分,与更年期组相比差异有非常显著性(P0.01)。⑷更年期组说谎评分为(50.08±10.11)分,对照Ⅰ组为(45.87±7.52)分,2组差异有显著性(P0.05);更年期组神经质评分为(52.89±6.52)分,对照Ⅱ组为(56.43±7.84)分,2组差异有显著性(P0.05)。⑸更年期组DA(31.65±9.36),对照Ⅰ组(27.24±7.04),2组DA相比,差异有显著性(P0.05);更年期组ACH(25.97±8.05)、DA(31.65±9.36),对照Ⅱ组分别为(31.24±10.36)、(37.07±10.22),2组ACH、DA相比差异有显著性(P0.05)。结论:女性更年期抑郁障碍患者在SCL-90、EPQ、SAS、SET等方面有独特之处,多为肝肾阴虚型、心脾两虚型。     

3种药物传递体的制备及其包封率、体外释放的比较研究

目的:通过对不同药物所制得传递体的包封率和体外释放差异的探讨,找出药物性质对传递体包封率和体外释放影响的规律。方法:采用相同的原料和方法制备了秋水仙碱(CLC)、硫酸长春新碱(VCR)和盐酸米托蒽醌(DHAD)的传递体(CLC-T,VCR-T,DHAD-T)并测定包封率,探讨了药物的溶解性、分子质量和电性等与包封率的关系;进行传递体体外释放实验,比较不同药物传递体体外释放的差异。结果:VCR和DHAD属于亲脂性或亲水性强、分子质量大和带正电荷的药物,所得传递体的包封率高,而CLC属于两亲性的、分子质量小和不带电荷的药物,所得传递体的包封率很低;由于DHAD有插膜作用,DHAD-T的体外释放明显较VCR-T缓慢。结论:在制备传递体时,应选择亲脂性或亲水性强、分子质量大和与膜带相反电荷的药物,否则不容易制备成传递体。药物与传递体之间的相互作用是影响传递体体外释药速率的因素之一。