超高压脱细胞方法制备组织工程血管支架

背景:构建组织工程血管支架的研究多集中于生物可降解支架和脱细胞同种或异种血管支架方面,但存在急需解决的若干问题:如生物可降解支架生物降解速度的控制以及植入脱细胞天然血管支架可能带来供体来源病毒细菌感染受体问题等.目的:采用超高压结合核酸酶洗涤方法(超高压脱细胞技术)处理同种异体血管,观察该方法的脱细胞效果以及猪内源性反转录病毒的去除情况.设计:对比观察实验.单位:日本国立心血管病中心研究所.材料:实验于2004-04/2005-04在日本国立心血管病中心研究所完成.选用健康雄性迷你猪幼猪,由日本九州鹿儿岛Japan Farm食用猪养殖场提供,体质量3～5 kg,猪龄1～3个月.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.实验涉及的主要试剂和仪器:Hoechst 33258为日本同仁化学研究所产品;超高压设备KOBELCO为神户制钢所产品:PCR为GENEAMP PCR SYSTEM 9700产品.方法:实验于2004-04/2005-04在日本国立心血管病中心研究所完成.无菌条件下取出猪降主动脉血管,用超高压设备以981 Mpa超高静水压(4 ℃)将供体来源细胞压碎,结合核酸酶的消化作用,PBS的搅拌洗涤,脱去细胞残片形成血管生物支架.主要观察指标: ①利用Hcechst 33258荧光探针,定量检测超高压脱细胞血管中DNA含量;用JEM100cx型透射电镜观察血管组织细胞成分去除和支架纤维保留情况;用JBM5200型扫描电镜观察支架的超微结构;100倍光镜下观察血管壁形态结构.即从组织学、分子生物学、免疫组组织化学水平评估超高压脱细胞方法的抗原去除效果. ②用PCR方法检测幼猪脱细胞血管中的猪内源性反转录病毒(PERV)前病毒DNA,评估超高压脱细胞方法对以猪内源性反转录病毒为代表的病原微生物的杀灭效果.结果: ①血管壁形态结构:血管壁纤维波浪状结构保存完好,组织? 内的细胞均被除去. ②细胞去除效果:透射电镜见细胞成分均已消失.但保留有胶原纤维和弹性纤维.扫描电镜可见细胞已被完全脱去,只剩脱细胞支架. ③病原微生物的杀灭效果:经过超高压处理,猪内源性反转录病毒被成功灭活,无法测出.而采用表面活性剂脱细胞组无法将猪内源性反转录病毒灭活. ④DNA含量:超高压脱细胞处理前,血管中DNA含量为(31.7±3.5) mg/L;超高压脱细胞处理后,DNA含量为(1.16±0.23)mg/L,DNA含量显著降低(P＜0.01).提示超高压脱细胞方法已将细胞核及内容物大部分除去.结论:实验证明采用超高压脱细胞方法可基本除去支架内细胞成分,可以将病源微生物杀灭(将猪内源性反转录病毒成功灭活).     

降钙素原在20例输入性疟疾诊治中的应用

目的评价血清降钙素原(PCT)在20例输入性疟疾诊治中的价值。方法回顾性分析该院2013年1月至2015年12月3年间输入性疟疾患者PCT检测结果与疟原虫分型、临床表现及预后的关系。结果本研究共有20例患者进行了PCT检测,其结果100%(20/20)有升高,范围在0.38~100.00ng/mL。间日疟PCT为(0.85±0.58)ng/mL,最高达正常值30倍;恶性疟PCT为(28.20±34.50)ng/mL,最高达2 000倍。白细胞总数升高者占20%(4/20),降低者占25%(5/20)。中性粒细胞比例升高者占95%(19/20),中性粒细胞(NEU)/淋巴细胞(LYM)4倍者占75%(15/20),PLT降低者占80%(16/20)。结论恶性疟患者PCT升高程度明显高于间日疟患者,PCT高低及NEU/LYM值的大小可能预示输入性疟疾患者疾病严重程度及预后。     

分泌型PTD4-Apoptin融合蛋白诱导HepG2细胞凋亡

目的研究分泌型的含蛋白质转导结构域的凋亡素(PTD4-Apoptin)融合基因经人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)表达和分泌后,对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响,探讨其用于肝癌治疗的可能性。方法构建PTD4-Apop-tin融合基因的pSecTag2分泌型真核表达载体,并采用脂质体介导将其转染入HUVEC细胞,Western blot检测PTD4-Apoptin融合蛋白的表达及分泌,转染48h后收集培养上清作为条件培养液,用于HepG2、L02细胞培养,共培养24h后,采用Western blot检测细胞内和核内Apoptin的含量,流式细胞术检测细胞凋亡。结果瞬时转染pSecTag2-PTD4-Apoptin的HUVEC细胞可表达及分泌PTD4-Apoptin融合蛋白,其培养上清中的PTD4-Apoptin融合蛋白可有效进入HepG2和L02细胞,并可在HepG2细胞核内聚积,显著诱导HepG2细胞凋亡达47.4%(P<0.001),而对L02细胞无此效应。结论 HUVEC细胞表达分泌的PTD4-Apoptin融合蛋白可显著诱导邻近HepG2细胞凋亡,而对L02正常肝细胞无损伤。     

缺血性肠病并门静脉积气二例

例1,病人,女,75 岁,2021 年3 月9日无明显诱因突发下腹痛半天入院,伴腹胀,肛门有排气,无其他不适,症状加重致全腹痛,伴腹胀明显,恶心、呕吐,呕吐白色黏液样物质,大便稀,无畏寒发热.既往有高血压、冠心病(未行特殊治疗)、2型糖尿病、右髋关节置换术等病史,平时血压、血糖控制可.体格检查:T 36.6 ℃,BP ...     

人工股骨头假体置换与高龄股骨转子间粉碎性骨折

目的：对人工股骨头假体的分类、性质及其在骨科高龄股骨转子间骨折的应用进行归纳总结。方法：第一作者应用计算机检索PubMed数据库及CNKI数据库,在标题和摘要中以“人工股骨头假体,置换,高龄,股骨转子间粉碎性骨折”或“artificial femoral head prosthetic,replace,elderly patients,femur intertrochanteric comminuted fracture”为检索词进行检索。选择文章与检索关键词相关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。共纳入29篇文献。结果：人工股骨头假体在治疗各种股骨转子间骨折中均得到了广泛的临床应用,已有多种材料类型的人工股骨头假体如金属材料、高分子聚乙烯、陶瓷材料以及碳质材料等应用于临床,并取得了显著的疗效。人工股骨头假体的功能日趋完善,在临床应用中愈加广泛,是目前治疗高龄股骨转子间粉碎性骨折的最有效方法,但此方法仍存在着手术风险大、并发症多等需要解决的问题。结论：人工股骨头假体选择的材料有很多种,各有其优缺点,目前临床上多采用复合型人工股骨头假体材料;人工股骨头假体是治疗高龄股骨转子间粉碎性骨折较为理想的方法。     

抑制核转录因子κB活性对SGC7901/VCR细胞mdr1表达及凋亡的影响

目的 观察突变型IκBα抑制核转录因子κB(NF-κB)活性对耐药胃癌细胞株SGC7901/VCR中多药耐药基因1(mdr1)的表达及细胞凋亡的影响.方法 突变型IκBα真核表达重组体(pCMV4-mIκBα)经脂质体介导转染至SGC7901/VCR细胞中,凝胶迁移率实验(EMSA)检测SGC7901/VCR细胞核内NF-κB活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测细胞内mdr1的表达,荧光分光光度法检测罗丹明123(Rh123)的胞内聚集,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 pCMV4-mIκBα瞬时转染人SGC7901/VCR细胞24 h后,可显著抑制NF-κB活性达64%,抑制mdr1的表达达75%,使Rh123在细胞内的聚集增加2.3倍.转染24 h后SGC7901/VCR细胞凋亡率为(14.15±1.52),与对照组(4.37±1.31)比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 突变型IκBα抑制NF-κB活性对耐药胃癌细胞株mdr1的表达有直接抑制作用,并促使耐药胃癌细胞凋亡.     

外伤性小肠破裂的诊治

目的探讨外伤性小肠破裂的早期诊断及治疗方法。方法对288例外伤性小肠破裂病人的临床资料进行回顾性分析。结果典型腹膜炎表现者209例（72．6％）;腹腔穿刺198例,阳性175例（88．4％）;腹腔灌洗28例,阳性22例（78．6％）;B型超声检查214例,阳性177例（82．7％）;288例KUB平片,发现膈下游离气体143例（49．7％）;CT检查65例,阳性43例（66．2％）。治愈280例（97．2％）,死亡8例。结论重视外伤性小肠破裂常见症状和体征,积极应用各种腹腔穿刺技术,并结合血常规、X线、B型超声、CT等辅助检查,早期诊断,避免漏诊误诊,尽早手术探查,选择合理术式可明显提高治愈率及病人生活质量。     

PPARγ参与调节胃癌MKN45细胞株VEGF mRNA的表达及临床意义

目的研究过氧化物酶体增殖激活受体(PPARγ)是否体外参与调节胃癌MKN45细胞VEGF mRNA的表达及临床意义。方法体外培养人胃癌细胞系MKN45,不同浓度的PPARγ激动剂(曲格列酮),PPARγ特异性抑制物体外作用细胞,EMSA测定细胞PPARγ的活性,RT-PCR检测细胞VEGF mRNA的表达。结果相对于对照组,随曲格列酮浓度的增加,胃癌MKN45细胞株PPARγ活性显著性升高(P<0.01),VEGF mRNA的表达显著性降低(P<0.01),且呈剂量依赖关系;PPARγ特异性抑制物能显著性抑制曲格列酮诱导的胃癌MKN45细胞株PPARγ的活化和VEGF mRNA的表达的下调(P<0.01)。结论PPARγ可能参与调节胃癌MKN45细胞株VEGF mRNA的表达,曲格列酮通过激活PPARγ,抑制胃癌MKN45细胞株VEGF mRNA的表达,可能为胃癌的治疗提供新的靶点。     

宣毒发表汤治疗小儿麻疹60例

目的:观察宣毒发表汤治疗小儿麻疹的临床疗效。方法:治疗组60例患儿口服宣毒发表汤治疗,对照组20例单用西药治疗,观察两组在发热、皮疹临床疗效的差别。结果:治疗组在退热时间、皮疹出齐时间、皮疹消退时间均明显优于对照组。结论:宣毒发表汤对治疗本病明显疗效。     

下颌舌向低位水平阻生第三磨牙拔除1例报告

下颌第三磨牙常不能萌至正常功能位置,造成食物嵌塞,使口腔微生物容易大量繁殖生长,引发冠周炎、邻牙龋坏、蜂窝组织炎症等多种并发症。临床上常用局部冲洗上药、切龈助萌或拔除阻生第三磨牙等方法治疗和预防其并发症。下颌阻生第三磨牙拔除术是口腔门诊常见、较复杂的手术。下