半胱氨酸蛋白酶抑制剂与免疫调节

cystatin是一类广泛分布于生物体内的天然的半胱氨酸蛋白酶抑制剂,参与各种生理和病理过程。本文就cystatin的分类、结构及其独特的酶抑制活性和免疫调节活性,包括抗原的呈递、细胞因子的分泌以及一氧化氮的合成等方面的研究进展作一综述。     

康美肤烧伤膏对大鼠烫伤创面EGF、TNF-α和TGF-β_1表达的影响

目的:大鼠烫伤创面给予康美肤烧伤膏治疗后,观察表皮生长因子(EGF)、肿瘤坏死因子(TNF)α、转化生长因子(TGF)β1在愈合过程中表达水平的变化。方法:用免疫组织化学方法结合图像数据分析,分别在烫伤后第3、5、7、9、14d检测EGF、TNF-α、TGF-β1表达水平的变化。结果:①EGF的表达:治疗组伤后第1d在基底细胞中有少量表达;伤后第5d表达明显,伤后第7-14d表达水平逐渐下降。对照组伤后第7d出现表达高峰。②TNF-α的表达:对照组TNF-α的表达在伤后3、9d出现2个高峰。治疗组TNF-α的表达第二个高峰较对照组提前,分别在伤后3、7d出现2个高峰。③TGF-β1的表达:治疗组伤后第1d在创面浅层细胞中有少量表达;伤后第5d表达明显;伤后第9d之后表达水平逐渐下降。对照组伤后第1d基本无表达,第3d开始有所表达,第7天表达出现高峰。结论:康美肤烧伤膏能够促进EGF、TGF-β1在创面修复的早期表达,并抑制TNF-α在创面修复后期的过度表达,有利于创面愈合。     

前列宁胶囊毒理学研究

[目的]对院内制剂前列宁胶囊进行急性毒性及长期毒性试验研究,为临床用药提供参考。[方法]应用最大耐受量(MTD)试验测定法对前列宁胶囊进行小鼠急性毒性实验;大鼠长期毒性试验连续12周灌胃给药,处死半数动物,其余动物停药进行恢复期观察2周。观察大鼠饮食、活动、体重、大小便、进食量、外观体征等情况,并进行血液、生化、病理学等检查。[结果]急性毒性实验未见明显毒性反应,MTD为133g/kg,相当于推荐临床用药量折合0.75g/kg的178倍。长毒试验结果提示,前列宁胶囊高、中、低各剂量组动物均未出现严重中毒表现,各脏器无病理性变化。[结论]前列宁胶囊急性毒性和长期毒性试验未见明显毒副作用,表明在推荐临床剂量下使用,具有较高的安全系数。     

正交试验法优选前列宁颗粒剂的提取工艺

[目的]筛选和优化前列宁颗粒剂提取工艺。[方法]采用正交设计法,以水醇两组提取物中浸膏得率、有效成分分别为大黄酸和黄芪甲苷提取率为指标,确定提取参数。[结果]确定黄芪等药组水提工艺为10倍量水,煎煮3次,每次1.5h;大黄等药醇提组工艺为6倍量60％乙醇,提取2次,分别为2.0、1.5h。[结论]前列宁颗粒剂提取工艺稳定,可行。     

粗叶悬钩子总生物碱的大鼠在体肠吸收研究

[目的]研究粗叶悬钩子(rubus alceaefolius poir,RAP)中生物碱类化合物在大鼠各肠段的吸收动力学特征。[方法]采用大鼠在体肠吸收模型,通过紫外分光光度法测定粗叶悬钩子总生物碱的含量及高效液相色谱法比较灌流前后化学成分差异,研究大鼠各肠段的吸收特性。[结果]粗叶悬钩子总生物碱在十二指肠、空肠、回肠和结肠中药物的吸收百分率(%)分别为(3.02±0.25)、(3.42±0.62)、(3.22±0.91)和(2.91±0.92)。[结论]粗叶悬钩子在小肠上段吸收良好,总生物碱中多种成分在肠段可能发生代谢转化。     

复方熊胆茵陈颗粒的利尿作用

目的 研究复方熊胆茵陈颗粒的利尿作用.方法 通过给予正常大鼠及水负荷模型大鼠不同剂量复方熊胆茵陈颗粒,1.8、3.6、7.2 g/(kg·d),观察排尿量及其中Na+、K+、C1-的浓度,以证明该复方的利尿作用.结果 与阴性对照组尿量(7.8±1.2)mL比较,中、高剂量复方熊胆茵陈颗粒可以明显增加正常大鼠24h尿量(P ＜0.05,P＜0.01),分别达到(10.8±4.4)、(11.8±3.9) mL;与阴性对照组(5.7±1.5) mL比较,中、高剂量复方熊胆茵陈颗粒可以提高水负荷大鼠6h尿量(7.5±1.3)、(7.6±2.1) mL,P＜0.05;高剂量可提高正常大鼠尿液中Na+含量,正常组为(0.04±0.02) mmoI/L,高剂量组为(0.16±0.13) mmoI/L,P＜0.01,各剂量均能明显通过水负荷大鼠尿液中Na+含量,正常组为(0.81±0.28) mmoI/L,低剂量组为(2.10±0.59) mmol/L,中剂量组为(2.26±0.50) mmol/L,高剂量组为(2.86±0.98) mmol/L,P＜0.05.结论 复方熊胆茵陈颗粒具有利尿作用,且呈现剂量依赖关系.     

大孔吸附树脂分离纯化龙须藤总黄酮的工艺研究

目的研究AB-8大孔树脂分离纯化龙须藤黄酮的工艺条件。方法通过静态吸附-解吸附实验筛选最佳大孔树脂,并以总黄酮含量为考核指标,采用L9（3^4）正交试验法对影响AB-8大孔树脂分离纯化龙须藤黄酮的因素进行考察,确定最佳工艺条件。结果最佳工艺条件为：采用AB-8型大孔树脂,取龙须藤黄酮提取液（含生药0．5g／mL）上样,树脂用量为4倍生药量,洗脱剂采用体积分数50％乙醇,用量为16倍生药量。结论该工艺条件科学合理,可有效地用于龙须藤黄酮的分离富集。     

蛇毒cystatin基因真核表达质粒的构建与表达

目的 构建蛇毒cystatin真核表达载体pcDNA3.1/His-cystatin,对其在COS7细胞中的表达进行初步研究.方法 采用PCR法扩增蛇毒cystatin基因片段,插入pcDNA3.1/His C载体中,测定DNA序列后,转染COS7细胞,利用Western-blot检测COS7细胞中cystatin基因的表达.结果 经酶切、测序鉴定证实插入片断已正确,Western-blot检测表明融合蛋白能够在COS7细胞中表达.结论 构建的真核表达载体peDNA3.1/His-cystatin能够在COS7细胞中表达蛇毒cystatin融合蛋白.     

超高液相色谱法测定盐肤木中8种成分含量

目的建立超高效液相色谱法同时测定盐肤木中8种成分含量方法,为盐肤木药材的质量控制提供依据。方法采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温35℃,检测波长275 nm。结果没食子酸、苔黑酚葡萄糖苷、没食子酸甲酯、3,5-二羟基甲苯、鞣花酸、漆黄素、五没食子酰葡萄糖和根皮苷的线性范围分别为23.31~1165.5 ng(r=0.9992)、27.02~1351.5 ng(r=0.9991)、6.30~315.0 ng(r=0.9992)、12.36~618.0 ng(r=0.9992)、17.14~857.5 ng(r=0.9996)、9.24~461.5 ng(r=0.9998)、25.29~1264.5 ng(r=0.9996)和6.18~309.0 ng(r=0.9993),平均加样回收率为96.77%~99.41%(RSD为2.23%~3.24%)。盐肤木样品经聚类分析和主成分分析可分为两类,且没食子酸、五没食子酰葡萄糖、没食子酸甲酯和漆黄素等成分在两类中的分布存在差异。结论本研究建立的方法可为完善盐肤木药材的质量标准和加强质量控制提供依据。