白芍总苷对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞焦亡机制的研究

目的 观察白芍总苷(total glueosides of paeony,TGP)对缺血后再灌注乳鼠心肌细胞细胞焦亡的影响。方法 乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组、模型组及低、中、高剂量TGP组(TGP终浓度分别为25,50,100mg/L）,测定收集细胞上清液中LDH 含量;以MTT法检测每组活细胞数目;流式细胞仪检测各组心肌细胞焦亡率;Western Blotting检测心肌细胞焦亡相关斑点样蛋白（ASC）、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶1(caspase-1)以及白细胞介素1β（IL-1β）表达。结果 与缺血再灌注组相比,随白芍总苷浓度提升,心肌细胞缺血再灌注后的细胞活力升高,而LDH分泌量,焦亡率,NLRP3、ASC、caspase-1 、IL-1β的表达均下降,结论 白芍总苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用明显,可通过caspase-1途径来抑制缺血再灌注心肌细胞的焦亡。     

腺病毒siRNA沉默 Raf-1基因抑制异丙肾上腺素 诱导大鼠心肌肥厚

摘要:目的　研究Raf-1 siRNA重组腺病毒载体对大鼠心肌肥厚的作用并探讨其机制。方法　构建Raf-1腺病毒siRNA 载体,大鼠随机分为正常对照组、心肌肥厚组、无关siRNA 组、Raf-1 siRNA 干预组,皮下注射异丙肾上腺素（ISO）制备大鼠心肌肥厚模型,无关siRNA 组及Raf-1 siRNA 干预组注射ISO后,分别经心包腔注射重组腺病毒pAd-siCon及pAd-siRaf-1,4周后染色测定全心重指数（HWI）、心肌细胞横截面积（CSA）、心肌间质胶原容积分数（CVF）及血管周围胶原面积（PVCA）,western blot检测心肌Raf-1、NF-κB及ERK1/2蛋白表达,RT- PCR检测TNF-α、MCP-1、TGF-β1 mRNA表达。结果　与心肌肥厚组相比,Raf-1 siRNA 干预组可降低大鼠HWI、CSA、CVF及PVCA,下调Raf-1、NF-κB、ERK1/2蛋白及TNF-α、MCP-1、TGF-β1 mRNA表达;无关siRNA 组与心肌肥厚组相比无明显差异。结论　Raf-1 siRNA重组腺病毒载体能减轻大鼠心肌肥厚,其作用可能与抑制Raf-1/ NF-κB、Raf-1/ ERK1/2信号转导及下调肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、转化生长因子-β（TGF-β）表达相关。     

利拉鲁肽对高糖诱导大鼠近端小管上皮细胞Toll 样受体4表达和钠钾ATP酶活性影响

目的：探讨利拉鲁肽( Li)对高糖诱导近端小管上皮细胞( PTEC)的保护作用。方法体外原代培养大鼠PTEC。将细胞分为正常对照组、模型对照组、Li小剂量组、Li中剂量组、Li大剂量组,每组设6个复孔,作用72 h后液闪法测定PTEC钠钾ATP酶活性;Western blot测定Toll样受体4(TLR4)蛋白表达;酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞培养上清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)。结果与正常对照组比较,高糖培养72 h PTEC钠钾ATP酶活性[(2737.88±317.22)μmol·g-1·h-1]升高,细胞和培养液中TLR4蛋白表达、IL-6、TNF-α和PAI-1增加,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,Li中、大剂量组作用72 h 后PTEC钠钾ATP酶活性[(2487.76±215.54),(2301.55±207.63)μmol·g-1·h-1]明显降低,细胞和培养液中TLR4蛋白表达、IL-6、TNF-α和PAI-1降低,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 Li在一定程度上抑制高糖环境炎症细胞因子表达并能稳定钠钾ATP酶活性,可能对肾脏有一定的保护作用。     

骨肉瘤照顾者压力测定及影响因素分析

目的 评估骨肉瘤患者照顾者(CG)压力程度,探讨照顾者压力反应的影响因素.方法 使用照顾者反应评估量表,调查骨肉瘤患者主要照顾者压力状态,将入口学特征、患者状态、客观照顾内容数量与量表各维度得分进行多元回归分析.结果 来自城市的照顾者所承受的压力相对较轻.家庭年收入>5万元,有人帮忙可以有效缓减照顾者压力.而照顾者来自农村,家庭年收入<2万元,照顾者是患者父母亲,目前有工作,无人帮忙的照顾者是高压力人群.需要重点干预.结论 处于高压力状态的骨肉瘤患者的照顾者需要重点干预,应对此类人群提供帮助与支持.     

肺结核合并糖尿病病人的临床观察及护理

结核病是由结核杆菌引起的慢性传染病,可累及全身多个脏器,以肺结核为多见,其病理特点是结核结节、干酪样坏死和空洞形成。临床上呈慢性过程,少数可急性发病,常低热、盗汗、乏力、咳嗽、咯血等表现。主要临床观察及护理包括:药物治疗的护理、心理护理、症状护理、病情观察、健康教育与出院指导。认为对肺结核合并糖尿病患者,在做好肺结核常规护理的基础上,做好患者的心理护理和健康教育,是取得良好治疗效果的重要条件。     

缓激肽B2受体在缬沙坦抑制心肌细胞肥大中的作用研究

目的探讨缓激肽(BK)B2受体在缬沙坦(valsartan)抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌细胞肥大中的作用及可能机制.方法经差速贴壁法获得新生大鼠心肌细胞,随机分为对照组、AngⅡ组、缬沙坦组、AngⅡ+缬沙坦组、Hoe-140组和AngⅡ+缬沙坦+Hoe-140组.采用流式细胞仪技术检测细胞大小和蛋白含量,硝酸还原酶法测定上清液中NO含量,放射免疫法测定细胞内cGMP水平.结果与对照组相比,10-7 mol·L-1 AngⅡ显著增加心肌细胞大小和蛋白含量,降低心肌细胞NO生成(P＜0.01),10-5 mol·L-1缬沙坦显著降低AngⅡ诱导的心肌细胞肥大和蛋白合成增加(P＜0.01),促进心肌细胞NO(P<0.05)和cGMP生成(P＜0.01),BK B2受体阻断剂Hoe-140可部分阻断缬沙坦的上述作用.结论BK B2受体部分介导了缬沙坦抑制心肌细胞肥大的效应,该作用与NO、cGMP生成有关.     

槲皮素对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠氧自由基和一氧化氮的影响

目的:观察槲皮素对糖尿病大鼠超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),一氧化氮(N0)及一氧化氮合酶(NOS)的影响,分析槲皮素对糖尿病大鼠的肾脏保护机制.方法:采用一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型.将大鼠随机分为3大组,每组再设2个小组(n=8):正常组(A1,A2),糖尿病模型组(B1,B2),槲皮素治疗组(C1,C2),分别于槲皮素(50 mg·kg-1·d-1)ig治疗6周和12周后处死取双肾,计算各组大鼠肾脏肥大指数;一肾用苏木精-伊红染色,光镜下观察肾小球病理形态学变化;另一肾测定其内SOD活性、MDA、NO含量及NOS活力的变化.结果:槲皮素治疗12周肾脏肥大指数(6.99±0.58) ×10-3,与模型组(8.92±0.66) ×10-3相比明显降低(P＜0.05).槲皮素治疗6周和12周肾组织SOD活性(165.31±14.89),(148.33±13.22) U· mL-1,与模型组(149.02±17.21),(121.32±15.33)U· mL-1相比明显升高(P＜0.05);MDA含量(17.89 ±2.88),(19.46 ±3.02)μmo1· L-1,NOS活性(15.13 ±2.89),(17.65±2.46) ng· L-1,NO含量(0.42 0.12),(1.41±0.48) μmol· L-1,与模型组MDA含量(19.68±3.01),(21.12 ±2.99)μmol· L-1,NOS活性(18.23 ±2.42),(21.22±3.01) ng· L-1,NO含量(0.73 ±0.25),(1.91±0.35) μmol· L-1相比明显下降(P＜0.01);且明显改善肾小球病理变化.结论:槲皮素可通过增加氧自由基的清除,抑制NOS的活性及NO的含量保护糖尿病肾脏.     

Wnt/β-catenin信号通路在白芍总苷干预大鼠心肌肥厚中的作用

目的观察Wnt/β连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路在白芍总苷干预大鼠心肌肥厚中的作用。方法皮下注射异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)制备大鼠心肌肥厚模型,随机分为正常对照组、心肌肥厚组,低、中、高剂量白芍总苷组[50、100、200 mg/(kg·d)]。8周后动脉插管,观察各组动物心脏功能的变化,Masson染色观察心肌结构变化,测量心肌肥厚指标(心脏质量指数、心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积),Western blot检测心肌组织Wnt3a、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和β-catenin的表达水平。结果与心肌肥厚组相比,白芍总苷呈剂量依赖性降低心脏质量指数、心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积,减少心肌Wnt3a、p-GSK-3β和β-catenin蛋白表达。结论白芍总苷能改善心肌肥厚,且其作用与Wnt/β-catenin信号通路相关。     

自制光固化型可塑性纤维桩材料生物安全性的初步评价

目的:初步评价自制光固化型可塑性纤维桩材料的生物安全性.方法:分别通过溶血试验、口腔黏膜刺激试验和短期全身毒性试验(经口途径),评价自制材料的生物安全性.结果:材料溶血率为1.76%,小于中华人民共和国医药行业标准(YY)规定的5%,认为该材料未引发溶血现象,对凝血功能无影响;与材料接触的黏膜未见异常反应,其组织切片观察总评分≤4,根据标准(YY)认为该材料无黏膜刺激性;短期全身毒性实验的受试小鼠无一死亡,其体质量相对增长率和食物利用率与对照组无统计学差异(P＞0.05),心、肾、肝等重要器官肉眼观察无异常改变,其组织切片未见病理改变.结论:自制光固化型可塑性纤维桩材料具有较好的生物安全性.     

阿司匹林抑制内皮素-1诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖

目的 探讨阿司匹林（Aspirin）对内皮素-1(ET-1)诱导的大鼠心脏成纤维细胞（CFs）增殖的干预作用及可能机制。方法 经差速贴壁法培养的新生大鼠CFs,随机分为7组：对照组、ET-1组、阿司匹林组、ET-1+ 阿司匹林1、2、5和10 mmol·L-1组。用四氮唑盐（MTT）法测定CFs数目,流式细胞仪检测CFs细胞周期,液体闪烁计数仪测定CFs 3H-脯氨酸掺入率,硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中NO含量。结果 与对照组相比,10-7 mol·L-1 ET-1能显著促CFs增值及[3H]-Proline掺入率,降低CFs生成NO2-/NO3-的量（均P < 0.01）,1～10 mmol·L-1 阿司匹林呈浓度依赖性的缓解上述变化（均P < 0.05）; ET-1能显著提高S期细胞百分率（P < 0.01）,10 mmol·L-1 阿司匹林抑制ET-1诱导S期细胞百分率上升（P < 0.01）。结论 阿司匹林抑制ET-1诱导的CFs增殖及胶原合成可能和NO生成有关。