幽门螺杆菌相关性疾病的研究现状

自从1983年Marshall首次分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，简称耶）以来，国内外学者对Hp及其致病性进行了大量研究。Hp是一种全球性流行的病原菌。在发达国家，成人感染率为50％左右；在发展中国家，10岁以下儿童的感染率达50％。成人感染率达80％以上，且3／4是在儿童时期获得感染。现有资料表明：局部炎症可造成系统损害，持续感染能诱发慢性炎症和免疫反应，引起感染局部和远位器官的损害。除胃肠疾病与Hp相关外，Hp感染还可引起心脑血管、呼吸系统、肝胆、自身免疫性、皮肤、贫血等疾病。现综述如下。     

面向21世纪 培养高素质检验医学研究生

新时期检验专业研究生教育必须面向21世纪，实行以跟踪和掌握高、新、尖技术能力为代表的全面高素质教育，主要包括：无私的奉献精神教育；高水准英语运用及计算机网络操作能力训练；强烈的创新意识与创新思维培养；广博的知识结构组成。     

PELA-BSA微球体外释药的灰色数学模型与结果预测

目的：运用灰色数学理论预测长效缓释蛋白微球的体外释药过程。方法：以复乳法制备PELA蛋白微球作为实验对象，根据灰色数学模型，借助计算机编程，预测PELA蛋白微球的体外释药过程。结果：预测值与实测值平均绝对误差E在2.3-4.6之间，平均相对误差在9.2％-14％范围内。结论：灰色数学理论可用于预测长效缓释释药体系体外释药过程。     

幽门螺杆菌沙鼠感染模型的定量分析研究

目的　建立幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)蒙古沙鼠感染模型 ,并通过比较定量培养、快速脲酶试验和ELISA三种方法 ,确定Hp动物模型的最佳评判指标。方法　采用临床分离的Hp强毒株对 2 0只蒙古沙鼠进行感染 ,4周后剖杀。取血按常规ELISA法检测抗Hp抗体 ;分别剪取胃窦、胃体和胃底粘膜组织作定量培养 ;其余组织作快速脲酶试验及病理检查。结果　经定量培养结果显示沙鼠的Hp感染率达到 80 % (16/ 2 0 ) ,胃窦、胃体和胃底的Hp定植密度的对数均值分别为 5 2 4± 1 5 0、4 11± 3 2 2、和0 97± 2 3 9;16只Hp阳性沙鼠中脲酶试验有 4只阳性 ,ELISA有 7只阳性 ,阳性鼠的感染均值显著高于阴性鼠。结论　经筛选的Hp强毒株成功感染沙鼠后 4周 ,Hp主要定植于胃窦和胃体部 ;定量培养仍是评价Hp动物模型的最有效方法     

不同诱导因素对PLPR启动子控制下人IL—2基因转录的影响

对重组人白细胞介素－２（ＩＬ－２）工程菌ｐＺＬ２分别进行温度诱导（４２℃）和化学诱导（丝裂霉素Ｃ）培养，提取并测定其总ＲＮＡ含量，然后使用地高辛标记的ＩＬ－２ＤＮＡ探针进行ＲＮＡ点渍杂交，定量分析了特异ｍＲＮＡ转录的动态变化。结果显示丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）对细菌总ＲＮＡ的诱导强度高，但使ＩＬ－２基因转录发生的水平低，持续时间短；而４２℃诱导对细菌总ＲＮＡ的诱导强度较高，使ＩＬ－２基因特异转录的水平也     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌IsdB活性片段的克隆、表达及抗原免疫保护性初步研究

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)抗原IsdB活性片段(IsdB2)免疫保护作用。方法利用生物信息学技术预测分析出IsdB活性片段(IsdB2),PCR扩增编码IsdB2的基因片段,亚克隆至GST标签融合表达的原核表达载体pGEX-6P-2中,将载体转化入大肠杆菌XL-1 blue,通过IPTG诱导表达IsdB2/GST融合蛋白,利用GST亲和层析初步纯化获取IsdB2蛋白。用IsdB2蛋白抗原辅以氢氧化铝佐剂对小鼠进行免疫实验,统计小鼠存活率对IsdB2抗原的免疫性进行初步研究。结果重组质粒经过BamHⅠ和NotⅠ双酶切鉴定、核酸序列测定和IPTG诱导表达IsdB2/GST及酶切获取IsdB2蛋白的SDS-PAGE分析表明,IsdB2蛋白相对分子质量大小约72 000,GST标签相对分子质量大小约26 000,与预期相符合。用IsdB2蛋白对小鼠进行3次疫苗免疫实验,IsdB2对小鼠的保护率分别为84.6%、50%和60%。结论成功构建重组表达载体pGEX-6P-2-IsdB2,利用大肠杆菌表达系统、GST亲和层析和酶切方法获得IsdB2蛋白抗原,通过3次动物疫苗免疫实验结果表明IsdB2具有免疫保护性,为研制新型有效的MRSA疫苗奠定实验基础。     

开展生物技术制药学第二课堂体会

生物技术制药是培养高素质医药创新人才的主干课程之一,第二课堂活动可作为该课程重要补充,以保证良好的教学效果。在此,总结自身准备和开展生物技术制药课程第二课堂的经验,为即将开展第二课堂活动的教师提供参考和借鉴。     

幽门螺杆菌hpaA真核表达质粒的构建及鉴定

目的　克隆幽门螺杆菌hpaA基因,并构建其真核表达质粒。方法　以HpNCTC11637基因组DNA为模板, PCR扩增hpaA基因,亚克隆至pMD18 T载体中,目的基因经酶切纯化后插入pTCAE,转化E.coliDH5α,酶切并测序鉴定正 确的重组质粒命名为pT hpaA。电穿孔法将pT hpaA转染CHO细胞,Westernblot检测HpaA蛋白的表达。结果　克隆重组 得到pT hpaA,将pT hpaA电穿孔法转染CHO后,培养上清经Westernblot检测,在相对分子量为30000条带处出现特异性抗 原抗体反应。结论　成功构建了幽门螺杆菌hpaA真核表达质粒,体外CHO细胞转染和Westernblot实验证实了HpaA蛋 白的表达,为进一步的免疫实验奠定了基础。     

大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位基因工程菌发酵工艺的研究

目的研究建立大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)基因工程菌的发酵工艺.方法先通过摇瓶培养初步确定工程菌的最适生长条件,然后以此为基础在发酵罐中比较、筛选影响菌体生长和目的蛋白表达率的各种条件,并进一步对发酵工艺进行改良优化.结果经试验确定了rLTB基因工程菌发酵罐培养的各项条件的最佳组合,优化后工程菌菌体产量平均可达40.5 g/L,目的蛋白的表达率平均为30.6%.结论建立了稳定、高效的工程菌发酵工艺.     

龋齿主要致病菌变形链球菌的生物免疫防治新进展

世界卫生组织调查显示,在全球超过50亿人患过龋齿.龋齿已成为威胁人类口腔健康的全球性问题,而其主要致病菌变形链球菌的生物免疫防治研究如火如荼.到目前为止,在全球除奥丽汀健齿露外,还没其他任何预防龋齿的生物免疫防治产品上市和进入临床阶段.众所周知,大规模的生物免疫防治是治疗和预防龋齿的一种有效途径.了解近年来国内外在变形链球菌生物免疫防治中的主动防疫、被动免疫研究新进展研究可为后期研发出能进入临床试验,并能成功上市的龋齿生物免疫制剂提供指导意义和借鉴.