聚乳酸及聚乙二醇改性聚乳酸体外降解研究

目的　研究聚乳酸与聚乙二醇改性聚乳酸的体外降解特性。方法　采用奥氏粘度计或凝胶层析法 (GPC)测定分子量 ,并考察其重量与形态的变化。结果　聚乙二醇改性聚乳酸开始降解的时间早于聚乳酸 ,而在相同时间内 ,前者的重量和分子量下降也较后者明显。结论　聚乙二醇改性聚乳酸亲水性优于聚乳酸 ,是较理想的亲水性药物载体材料。     

肠出血性大肠杆菌O157∶H7紧密黏附素免疫保护性片段的基因克隆与表达

目的　克隆表达肠出血性大肠杆菌 (EHEC)O1 5 7∶H7紧密黏附素 (intimin)免疫保护性片段 (intiminC30 0 )。方法　设计引物采用PCR法自EHECO1 5 7∶H7基因组扩增紧密黏附素及其免疫保护性片段的编码基因eae与eaeC30 0 ,T A克隆后构建原核表达质粒pET 2 8a(+) eae及pET 2 8a(+) eaeC30 0 ,经测序鉴定后转化E .coliBL2 1 (DE3) ,IPTG诱导表达 ,PAGE检测。结果　PCR法自EHECO1 5 7∶H7基因组扩增出了约 2 80 0bp和 90 0bp的目的片段 ;原核表达质粒pET 2 8a(+) eae及pET 2 8a(+) eaeC30 0经酶切及测序鉴定与预期序列一致。转化E .coliBL2 1 (DE3)后IPTG诱导目的蛋白表达率约 2 5 %和 30 %;PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量 (Mr)约 96× 1 0 3和 35× 1 0 3,破菌后电泳证实目的蛋白均以包涵体形式表达。结论　EHECO1 5 7∶H7紧密黏附素免疫保护性片段经基因克隆后获得了较高的表达量 ,为进一步的生物学性质及免疫学特性研究奠定了基础。     

幽门螺杆菌感染非侵入性诊断方法的评价及研究进展

幽门螺杆菌（Hp）感染的非侵入性诊断方法以其无创优势倍受青睐.尿素呼吸实验和粪抗原被称为是Hp感染活动性检测;而血清和尿液抗体是检测Hp的标记物,并不能说明感染是否正在进行,所以被称之为被动检测.非侵入性检测被广泛推荐用于初次感染的诊断,选择合适的检测方法主要依赖于初筛感染的可能性、检测方法的特性及其性价比.作者对现在的非侵入性检测方法进行评价.     

新型免疫调节肽佐剂CEL-1000

CEL-1000是一种新型的免疫调节肽，它在抗疟疾、人类免疫缺陷病毒（HIV）、单纯疱疹病毒（HSV）感染和肿瘤疫苗的研制方面具有潜在的佐剂活性，能促进1型辅助性T淋巴细胞（Th1）型免疫应答。     

非融合型重组人白细胞介素-18的纯化及鉴定

目的　获得高纯度的重组人白细胞介素 18(rhIL 18)。方法　采用溶菌酶加超声破菌的方法抽提包涵体 ,以8mol/L尿素溶解包涵体 ,变性条件下以阴离子柱层析进行首步纯化 ,复性后再进行凝胶过滤层析。对纯化的样品进行了SDS PAGE、HPLC、N端氨基酸序列、免疫印迹及生物学活性分析。结果　rhIL 18在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在 ,所提取的包涵体中重组蛋白纯度可达到 80 %以上 ,包涵体经二步柱层析纯化后 ,HPLC分析纯度达 98%以上 ,SDS PAGE测定其分子质量约 19× 10 3 ,N端 15个氨基酸序列与预期一致 ,生物学活性分析证实纯化的rhIL 18具有诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生IFN γ的能力。结论　所建立的纯化rhIL 18的方法简便有效 ,为开展rhIL 18的结构活性关系研究及其大规模纯化打下了良好的基础。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7的分子生物学检测方法研究进展

肠出血性大肠杆菌O157：H7是一种新型人类病原菌，由它引起的感染严重威胁着人类健康和生命。对其进行分子流行病学调查，可为该病的预防、诊断和治疗提供有力的依据和参考。现就目前常用的几种大肠杆菌O157：H7的分子生物学检测技术作一简介。     

幽门螺杆菌粘附素基因hpaA研究

目的 克隆表达幽门螺杆菌鞭毛粘附素基因hpaA,筛选Hp疫苗有效抗原成分。方法采用PCR技术从幽门螺杆菌基因组中扩增hpaA基因,克隆至表达载体pET-28a(+)中,IPTG诱导表达重组蛋白HpaA(rHpaA),鉴定rHpaA蛋白的表达形式。结果 pPHA重组菌以包涵体形式表达rH-paA,表达量约占全菌的35％。纯化后的rHpaA免疫家兔获得了高效价的兔抗HpaA抗血清,且该抗血清能够与不同Hp菌株中相应分子量条带发生抗原抗体反应,并能在一定程度上抑制由Hp引起的RBC凝集现象。结论 Hp鞭毛粘附素HpaA在重组大肠杆菌中能够高效表达,且具有良好的免疫反应性。     

HSPC016的表达、纯化与生物学活性分析

目的:测定大肠杆菌中造血干细胞(hematopoietic stem/progenitor cells,HSPC)016融合蛋白的表达,纯化及其生物学活性。方法:采用PCR技术从pET-28a( )/HSPC016中扩增出目的基因HSPC016重组到质粒pET-22b( )中,转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,镍离子亲和层析和分子筛法纯化;用胰蛋白酶消化对数期生长的第3代和第9代DPC,细胞记数法记录生长曲线。结果:原核表达载体pET-22b( )/HSPC016在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白表达率约28%,纯化后纯度达95%以上;经重组蛋白处理的DPC增殖活跃;细胞记数结果初步证实HSPC016重组蛋白能促进第9代DPC的增殖及其DNA合成,对第3代DPC无明显作用。结论:HSPC016基因在大肠杆菌中得到了高效表达;HSPC016重组蛋白具有促进高传代DPC增殖的作用。     

高原地区幽门螺杆菌的分离培养方法

目的 建立适合高海拔、低气压、低氧含量等高原环境特点的幽门螺杆菌(Hp)分离培养方法.方法 随机收集186例知情同意的西藏军区总医院胃病患者胃窦、胃体、胃底部黏膜组织各1份,匀浆法研碎混匀后分别用常规法和根据高原环境特点改进的减量法、加氧法、加压加氧法同时进行培养,比较各培养方法的差异,同时分析培养结果与藏汉民族、性别...