siRNA干扰ADAR1表达对小鼠混合淋巴细胞培养的影响

目的:研究靶向ADAR1基因的siRNA在小鼠双向混合淋巴细胞培养中所扮演的角色. 方法:将化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA在Lipofectamine 2000介导下转染处于双向混合淋巴细胞培养试验中的小鼠淋巴细胞,观察转染组与未转染组细胞表型的变化;通过RT-PCR检测两组细胞中ADAR1 mRNA的变化;细胞计数和台盼蓝拒染法检测靶向ADAR1基因的siRNA对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价转染化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA后对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用. 结果: 在经典淋巴细胞混合培养试验中,转染靶向ADAR1基因的siRNA可以明显降低小鼠淋巴细胞内ADAR1的表达,同时ADAR1-siRNA对小鼠淋巴细胞的增殖有抑制作用. 结论:在经典淋巴细胞混合培养试验中,化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA能有效抑制ADAR1基因在小鼠淋巴细胞中的表达,并对小鼠淋巴细胞增殖有抑制作用.     

不同术式活体肝移植长期生存随访2例

1 临床资料 我科于1997-06-30/2000-06-26成功施行了国内首例活体肝部分移植和血型不符成人间辅助性原位活体肝部分移植,随访至今患者已健康生存9年和6年,报告如下.     

wortmannin对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用

目的:观察磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂wortmannin对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用并探讨其机制.方法:将健康成年SD大鼠54只随机分为对照组、SAP组和SAP wortmannin组,每组18只,逆行胆胰管注射50 g/L牛磺胆酸钠制备SAP模型.检测血清TNF-α水平、肺组织湿/干质量比值、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量;观察肺组织及胰腺组织的病理变化.结果:SAP组较对照组血清TNF-α水平、肺组织湿/干质量比值、BALF蛋白含量及肺组织MPO活性均显著升高(P《0.01),胰腺、肺组织病理损伤随病情进展而逐渐加重;SAP wortmannin组较对照组各项指标均升高,但较SAP组均明显降低(P《0.01), 胰腺、肺组织病理损伤较SAP组减轻.结论:wortmannin对SAP大鼠肺损伤有一定的保护作用, 其机制可能与其抑制了中性粒细胞内PI3K信号转导通路的活化, 使多种炎症细胞的活化和TNF-α等炎症因子的释放受到抑制有关.     

医源性肝外胆管损伤的治疗

本文总结了１９５６年６月～１９９３年２月５６例医源性肝外胆管损伤的病例，其中男２４例，女３２例，重点介绍了治疗体会：即术中即刻发现胆管损伤，术后梗阻性黄疸、胆瘘，反复胆道感染，胆管狭窄，胆汁性肝硬化门脉高压症等不同时期及病理类型损伤的处理方法。５６例除２例未手术死亡外，均一次手术治愈，其治愈的关键是：吻合口要大，血运要好，吻合口无张力，粘膜对粘膜一层吻合。随访半年至１２年效果均满意。     

同基因造血干细胞移植延长同种异体小鼠皮肤移植物存活时间的实验研究

为了研究同基因造血干细胞移植诱导器官移植免疫耐受的可行性。建立小鼠异基因皮肤移植模型,术后2周给予FK506腹腔注射,3周起行全身照射及同基因骨髓移植,观察记录小鼠和移植物存活情况,以流式细胞检测受体GFP嵌合表达,混合淋巴细胞反应、迟发型超敏反应检测诱导耐受的特异性和效能。实验组小鼠移植物存活时间达(29.14±4.92)d,显著长于对照组(P<0.05);GFP在BMT后4周、6周嵌合程度达到82%、91%;实验组MLR、DTH结果与对照组差异显著,提示诱导耐受具有高度特异性和高效性。同基因造血干细胞移植联合免疫抑制剂治疗可以有效诱导小鼠皮肤移植的免疫耐受。     

肝细胞癌组织中端粒酶逆转录酶基因hTERT的表达不依赖PCNA和P53

目的 :研究肝细胞癌 (HCC)中端粒酶逆转录酶基因hTERT的表达及其与增殖细胞核抗原 (PCNA)和P5 3基因的关系 ,探讨其在HCC发生、发展及预后复发中的意义。方法 :采用免疫组化染色法检测 4 2例HCC组织中hTERT、增殖细胞核抗原(PCNA)和P5 3蛋白的表达 ,并对hTERT与HCC的临床病理特征以及PCNA、P5 3蛋白表达的关系进行分析。结果 :HCC中hTERT、PCNA和P5 3蛋白的阳性率 ,分别为 71.4 % (30 / 4 2 )、76 .2 % (32 / 4 2 )、73.8% (31/ 4 2 ) ;而hTERT在正常肝脏组织中不表达。hTERT在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级HCC组织中的表达率 ,分别为 4 0 .0 % (4 / 10 )、70 .0 % (14 / 2 0 )及 10 0 % (12 / 12 )。HTERT的表达率与疾病复发有显著相关性 (P <0 .0 5 )。结论 :hTERT表达的异常可能与肝癌的发生、发展有关。hTERT与PCNA和P5 3无明显的相关性。检测hTERT的表达可作为预测肝癌预后复发的潜在指标 ,并提示HCC为由多基因参与的疾病     

胃手术中微创外科的现状与未来

胃癌的治疗是以根治性手术切除为主的综合治疗方法。传统胃癌根治术无论从手术指征、手术方式及淋巴结清扫范围等都已建立规范。近年来，随着电子信息技术、生物工程技术以及机械工程技术等的发展和融合，外科治疗模式向微创化不断发展。微创外科目前并没有停留在“匙孔外科”这一解剖概念为主的微创技术上，而是逐渐向减轻应急反应的功能学微创转变。     

应用RNA保护分析法观察原发性肝内胆管结石患者肝细胞内葡萄糖醛酸转移酶基因的表达

本实验旨在观察肝细胞内影响胆红素代谢的酶———葡萄糖醛酸转移酶(ＵＤＰ ＧＴ1)活性和基因表达的变化在原发性肝内胆管结石 (ＰＩＳ)中的作用 ,现将结果报道如下。一、对象与方法1.病例选择和标本收集 :以术中肝内胆管有褐色易碎结石定为ＰＩＳ ,收集我院 1995年 1月～ 1997年 12月此类病人 3 6例为患者组 ,其中男 2 0例 ,女 16例。术中取病变肝叶肝组织液氮保存。收集其他手术患者肝活检标本 7例作为正常对照组 ,其中胆囊息肉患者 4例 ,胃癌 3例 ,肝功能化验均正常 ,术中取肝活检组织液氮保存 ,胆汁送细菌培养。2 .肝组织ＵＤＰ ＧＴ1活…     

小儿先天性胆管囊的诊断与外科治疗

目的　探讨小儿先天性胆管囊肿的诊断和选择合理的手术术式。方法　回顾分析我院1980年1月至1999年6月收治的42例小儿先天性胆管囊肿的临床表现、辅助检查、手术术式和疗效。结果　具有三联征者占38.1%；B超确诊率为95.2%；囊肿内引流术优良率显著低于囊肿切除术(χ     

Apr-1基因对胆管癌细胞QBC939细胞周期基因表达的影响

目的探讨Apr-1基因调控QBC939胆管癌细胞周期的机制。方法运用脂质体介导法将Apr-1基因转染胆管癌细胞系QBC939,建立稳定表达Apr-1基因的细胞模型(QBC939-Apr-1)。采用细胞周期基因芯片,观察转染Apr-1基因前后胆管癌细胞细胞周期相关基因表达的变化。结果转染Apr-1基因的QBC939-Apr-1细胞出现Apr-1 mRNA的表达,成功建立了稳定表达Apr-1基因的细胞模型。基因芯片检测结果发现:Skp2及UBE基因的表达水平明显上调,而CDC6,Cyclin H等25种基因的表达下降,其中MRE11A,CKS2,CDK8及CDC45等下调在3倍以上。结论过表达的Apr-1基因可诱导QBC939细胞多种细胞周期相关基因表达发生变化,为深入认识Apr-1基因参与调节细胞周期的机制提供了新的思路。