siRNA干扰ADAR1表达对小鼠混合淋巴细胞培养的影响

目的:研究靶向ADAR1基因的siRNA在小鼠双向混合淋巴细胞培养中所扮演的角色. 方法:将化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA在Lipofectamine 2000介导下转染处于双向混合淋巴细胞培养试验中的小鼠淋巴细胞,观察转染组与未转染组细胞表型的变化;通过RT-PCR检测两组细胞中ADAR1 mRNA的变化;细胞计数和台盼蓝拒染法检测靶向ADAR1基因的siRNA对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价转染化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA后对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用. 结果: 在经典淋巴细胞混合培养试验中,转染靶向ADAR1基因的siRNA可以明显降低小鼠淋巴细胞内ADAR1的表达,同时ADAR1-siRNA对小鼠淋巴细胞的增殖有抑制作用. 结论:在经典淋巴细胞混合培养试验中,化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA能有效抑制ADAR1基因在小鼠淋巴细胞中的表达,并对小鼠淋巴细胞增殖有抑制作用.     

肝癌外周血微转移检测意义及其问题

目的明确外周血微转移检测在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）转移复发中的诊断价值。方法通过回顾文献分析HCC外周血微转移检测的方法及意义。结果HCC的外周血微转移检测目前主要有播散细胞检测与HCC特异mRNA标记检测两类，从理论上来说都被认为是早期检测转移复发的理想方法，但不同实验研究间普遍存在着相互矛盾的结论，调整改进检测手段与时间亦未能够彻底解决检测结论的冲突。结论外周血微转移检测对于深入理解HCC转移复发机理和完善临床治疗有很大意义，但理论与应用中均存在着有待改进的地方，该技术的不断完善将促进对转移复发的机理研究与检测应用。     

铁死亡在结直肠癌中的作用与研究进展

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一, 在中国的发病率和死亡率呈上升趋势, 给国人健康带来极大威胁。铁死亡是一种以铁依赖的过氧化脂质聚集的新型细胞死亡模式, 广泛存在于各种类型的肿瘤细胞中。铁死亡相关基因在预测结直肠癌患者预后中展现出了极大的潜力。同时, 结直肠癌对一线化疗药耐药性逐渐增加, 而越来越多证据表明铁死亡参与其中。因此, 本文将对近年铁死亡在结直肠癌领域的研究进展进行综述, 为改善结直肠癌化疗药耐药性以及相关的药物研发提供新思路。     

免疫抑制剂FK506预处理对内毒素休克的干预作用

目的 探讨FK506预处理对内毒素休克的干预作用。方法 以脂多糖(LPS)诱导内毒素休克小鼠155只为研究对象,将实验小鼠随机分为LPS组(n=80)、LPS FK组(n=75)。随机抽取LPS组小鼠20只,LPS FK组小鼠15只进行生存率观察,两组剩余小鼠给予LPS注射后,分时间段采血,剖胸、腹取肺脏及肝脏组织,测定肺干重／湿重比值(W／D),血清TNF-a、IL-1β和ALT、AST值。HE染色光镜观察肝脏病理改变。结果 与LPS组相比,LPS FK组小鼠平均存活时间明显延长,72h存活率达46．6％;各时间点肺干重／湿重比值及血清ALT、AST含量均显著降低;血清TNF-a、IL-1β含量明显降低,肝、肺组织病理学改变明显改善。结论 FK506预处理可减轻内毒素休克所致的多器官损害,具有下调炎症反应的作用。     

肝硬化患者的胆囊切除术85例

0 引言 肝硬化常见而且肝硬化患者胆囊结石的发病率增加[1],而肝硬化患者胆囊切除术的手术危险性大为增加,故肝硬化-胆囊切除术被认为是一对高危因素的结合,值得临床上的高度重视. 1998-06/2004-06我院对85例伴发肝硬化患者行胆囊切除术.     

斑点杂交及RNA酶保护分析法检测反义HSP90基因转染细胞 …

目的：检测ＨＳＰ９０反义核酸转染细胞后反义ＲＮＡ的表达,方法：采用打点杂交及ＲＮＡ酶保护分析法,结果：ＨＳＰ９０反义核酸转染细胞ＡＨ－ＳＧＣ７９０１,ＡＨ－ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ,ＡＨ－ＨＣＣ７４０２及ＡＨ－Ｅｃ１０９有ＨＳＰ９０反义ＲＮＡ的表达。结论：ＥＳＰ９０反义ＲＮＡ在ＡＨ－ＳＧＣ７９０１,ＡＨ－ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ,ＡＨ－ＨＣＣ７４０２及ＡＨ－Ｅｃ１０９细胞的表达,为进一步研究ＨＳＯ９０     

活体转染肝细胞生长因子基因对小鼠急性肝功能衰竭的治疗作用

目的 研究肝细胞生长因子（HGF）基因治疗对小鼠急性肝衰模型的治疗作用。方法 构建人肝细胞生长因子（hHGF）表达载体，利用脂质体介导法在活体内转染肝细胞生长因子基因，利用荧光显微镜检测肝组织内绿色荧光蛋白（GFP）表达了解目的基因的表达，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中人肝细胞生长因子的含量，通过观察小鼠急性肝衰模型的生存率、肝功能变化、肝组织病理改变来检测肝细胞生长因子基因对急性肝衰的治疗作用，通过检测肝组织中PC—NA指数的变化了解肝脏的增殖能力的变化。结果 荧光显微镜下可见肝组织内有绿色荧光蛋白的表达，转染人肝细胞生长因子基因后在血清中可检测到hHGF的表达，而且可持续1周以上，与对照组相比。转染hHGF基因组的生存率明显提高（40．0％vs11．5％，P〈0．05），血清ALT、TBi明显降低，肝组织中PCNA指数也明显升高。结论 活体转染肝细胞生长因子基因可获得表达，而且肝细胞生长因子基因对急性肝衰小鼠有治疗作用。     

共聚焦显微镜观察凋亡相关基因 Fas 和 FasL 在肝外胆管癌组织中的表达

目的：研究肝外胆管癌组织中细胞凋亡相关基因Fas和FasL的表达及意义。方法：采用免疫荧光组织化学方法结合激光扫描共聚焦显微镜对30例肝外胆管癌及10例胆总管囊肿组织进行观察。结果：30例肝外胆管癌中,Fas和FasL阳性21例,阳性率70％,对照组10例胆总管囊肿Fas和FasL阳性1例,阳性率10％,Fas和FasL在朋胆管癌中的表达强于对照组（P＜0．05）;同一肿瘤细胞中Fas定量大于FasL(P＜0．05）;Fas和FasL主要位于胞浆和胞核。结论：Fas和FasL参与了大部分肝外胆管癌的凋亡调控,但肝外胆管癌在发生分化过程中可能部分获得了逃逸Fas介导凋亡的功能。