一种直接高效克隆PCR产物的载体制备

Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ经ＥｃｏＲ Ｖ酶切后，在Ｔａｑ酶作用下加入ｄＴＴＰ使其３’端加上碱基“Ｔ”而成为３’端突出的粘性末端载体。用此载体直接与ＰＣＲ产物连接进行克隆。克隆效率比采用平端载体克隆的效率提高约５０倍。     

MBL基因不同单倍体型启动活性的差异研究

甘露糖结合凝集素（mannose-binding lectin，MBL）是Ca^2＋依赖型（C型）凝集素家族一员，是固有免疫系统的重要成员。血清MBL水平低下导致调理吞噬缺损，使机体易患感染性疾病，还可明显加重疾病的症状，影响病程和转归。     

我国北方蜱中人粒细胞埃立克体16S rRNA基因的检测

本文应用人粒细胞埃立克体病 ( HGE)的病原体的 1 6S r RNA基因序列的特异引物对采自我国北方地区的一些蜱标本进行扩增 ,首次从内蒙古大兴安岭采集的全沟硬蜱、森林革蜱和嗜群血蜱 ,以及从新疆精河采集的全沟硬蜱和草原革蜱中扩增出该病原体的 1 6S r RNA基因片段。所测出的 967bp序列与美国 HGE株 ( Gen Bank U0 2 52 1 )的同源性为 1 0 0 %     

我国部分地区人群中HDV感染的流行病学调查

对山西、新疆、安徽、上海、天津及北京等地的自然人群和某些特殊人群进行了ＨＤＶ感染的调查．结果表明，上述地区自然人群感染率为０．４％～１．１％；某些特殊人群中ＨＢｓＡｇ携带者ＨＤＶ感染率为７．１％～１１．４％，临床肝炎病人中ＨＤＶ感染率为９．５％～１０．４％．慢性肝炎患者ＨＤＶ感染率明显高于急性乙型肝炎患者。血液制品及院内感染是其传播的主要来源．     

驻京某部肾综合征出血热血清流行病学调查

20 0 2年 6月 ,驻京某部报告发生 1例肾综合征出血热 (HFRS)病人。为做好防制工作 ,我们对该部队官兵进行了血清抗体检测 ,结果报告如下。1　材料与方法　 (1)调查点及对象概况 :该部位于城乡结合部 ,属平原及丘陵地貌 ,植被丰富 ,营区被农田环绕。本次共调查了 15 8人 ,调查率 87%。所有对象均未接种肾综合征出血热疫苗 ,既往无出血热病史 ,近期无发热及其他类似出血热症状。 (2 )方法 :我们对一般情况、接触史、接种疫苗情况、既往病史及家庭情况等进行问卷调查 ,并采血检测。羊抗人IgG荧光抗体由本所细菌学实验室提供 ,工作稀释度为 1…     

吉林省长白山区斑点热立克次体自然疫源地调查

目的　了解吉林省长白山区蜱传斑点热的自然疫源地情况。方法　利用立氏立克次体[相对分子质量 (Mr) 190× 10 3 ]外膜蛋白A(R .rOmpA)基因序列设计引物 ,对 6 83只蜱类标本进行聚合酶链反应 (PCR)检测 ,并随机抽取一株森林革蜱阳性扩增产物进行克隆与序列测定。结果　从森林革蜱和嗜群血蜱标本中检测出了斑点热立克次体DNA片段 ,阳性率分别为 5 3.81%和 7.4 1% ;所测序列与前苏联的DnS 14株的同源性为 10 0 .0 0 % ,与DnS 2 8和RpA 4的同源性均为99.0 0 % ;而与国内所检测的BJ 90、HLJ 0 5 4的同源性分别为 88.0 0 %和 86 .0 0 %。结论　长白山区存在斑点热的自然疫源地 ,存在与DnS 14株型别一致的斑点热立克次体 ,在中国系首次发现。     

9V型肺炎链球菌荚膜多糖降解研究

肺炎链球菌荚膜多糖分子质量较大,在制备结合疫苗的过程会有诸多不便,如溶液黏度大、结合过程易过度交联形成凝胶、不易于过滤以及纯化,而荚膜多糖分子片段化是降低其分子质量的有效途径。文章选取了酸水解和超声降解两种方法分别处理9V型肺炎链球菌荚膜多糖。利用不同相对分子质量的葡聚糖在HPLC上的保留时间绘制标准曲线,计算处理后多糖相对分子质量,并通过核磁共振检测结构稳定性,免疫双扩散检测抗原性。实验结果表明,在适宜的条件下,酸水解和超声降解均能有效降低肺炎链球菌荚膜多糖分子质量,减少重复单元,保留重复单元内部结构,保留时间从5.7 min延长到8.25 min,相对分子质量约为580 k。但是酸水解方法破坏了多糖的抗原完整性,而超声降解可以良好保持。     

吉林省珲春地区蜱中伯氏疏螺旋体与斑点热群立克次体复合感染研究

目的了解吉林省珲春地区伯氏疏螺旋体与斑点热群立克次体的复合感染情况.方法运用PCR方法对吉林省珲春地区采集的蜱标本,进行伯氏疏螺旋体5S～23S rRNA间隔区基因与斑点热群立克次体外膜蛋白A（ompA）基因的检测.测序并用PHYLIP软件进行序列分析.结果全沟硬蜱中伯氏疏螺旋体感染率为36.0%,在全沟硬蜱中检测到了斑点热群立克次体的感染,其感染率为2 0%.二者的复合感染率为2.0%;森林革蜱中伯氏疏螺旋体感染率30.9%,斑点热群立克次体感染率29.1%,二者的复合感染率16.8%.伯氏疏螺旋体的序列分析显示吉林地区的伯氏疏螺旋体都属于B.garinii基因型,同源性较高.对斑点热阳性片段序列分析表明新测序列与斯洛伐克新发现的IRS3株和IRS4株核苷酸序列同源性为97%.结论吉林省珲春地区全沟硬蜱及森林革蜱中检测到伯氏疏螺旋体与斑点热群立克次体的感染,并检测到2种病原体的复合感染情况.     

野外采集标本中人埃立克体16S rRNA基因扩增方法及应用

本文应用特异引物,通过多对半巢式PCR从采自内蒙古大兴安岭的蜱标本中扩增出人粒细胞埃立克体和查菲埃立克体的16SrRNA全基因,一方面提供了这2种埃立克体存在于中国的证据,另一方面为今后进行埃立克体病的病原、媒介和宿主的调查研究提供了一个可行的方法.并从一只大林姬鼠的脏器中检测到EC16SrRNA基因片段.     

BALB/c小鼠多疫苗接种的安全性和有效性研究

【目的】研究小鼠多疫苗联合接种的安全性和有效性。【方法】研究要求6种（炭疽、鼠疫、出血热、霍乱、痢疾、钩体疫苗）疫苗进行联合接种，根据6种疫苗的联合接种方式、疫苗接种间隔和接种的先后顺序，设计3种疫苗快速接种方案（2～3W完成接种）。对研究对象连续观测了119d，以体重、免疫反应、生化指标及自发活动等指标对疫苗联合接种的安全性和有效性进行评价。【结果】研究过程中实验动物在疫苗联合接种中副反应发生比较明显.在某些时问点体重、白细胞计数、淋巴细胞百分比、AST、ALT和肌酐有变化。6种疫苗联合接种后，小鼠能够对各疫苗产生免疫反应。但是，不同方案疫苗免疫反应不同。其中以出血热疫苗的免疫反应受方案的影响更加明显。【结论】出血热、霍乱、痢疾、钩体疫苗等疫苗在采用恰当的接种顺序和接种间隔的情况下可以联合使用，但是可能存在一定的风险，尤其在此基础上加入炭疽和鼠疫疫苗。