人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究

目的克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽,检测其生物活性。方法人工合成人内皮抑素1~30位氨基酸(30肽,序列25~31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,几丁质亲和层析树脂一步纯化30肽。通过MTT法、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验、小鼠体内抑瘤实验比较30肽和内皮抑素抗肿瘤活性。结果MTT证实30肽体外对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、胃癌7901细胞(SGC-7901)半数抑制浓度IC50为36μg/ml、47μg/ml,显著低于内皮抑素IC50179μg/ml、202μg/ml。CAM实验中30肽对血管的抑制作用更强。30肽在小鼠体内抑瘤率47.8%,效果优于内皮抑素28.7%。结论30肽具有更强抗肿瘤活性,有可能成为治疗肿瘤的一种新药物。     

中国北方鼻咽癌病人癌组织中EBV基因组的检测

目的从分子生物学角度为低发区鼻咽癌(NPC)寻找一种鉴别诊断方法.方法用PCR方法检测了37例NPC组织中Epstein-Barr病毒(EBV)基因组存在情况.结果A型EBV的检出率(28/37)明显高于B型EBV(3/37),10%的未分化癌检出A型EBV.结论PCR分析显示北方NPC病人EBV感染的优势型是A型,低分化及未分化癌与A型EBV关系密切,因此,PCR检测A型EBV用于原发隐匿而有颈部淋巴结转移灶的NPC与非NPC的鉴别上具有实用价值.     

几丁质亲和层析纯化蛋白的方法改良

目的探索亲和层析的方法，采用有效的方法提高几丁质树脂的使用效力和使用次数，降低成产成本使之更有利于提高产量。方法考察几丁质纯化的过程，探索出如何提高几丁质珠的重复使用次数，寻找出适合工业生产的纯化步骤。结果用高浓度的碱液进行洗柱，并延长浸泡时间到1h，可以使几丁质珠使用次数由原来的4～5次增加到7～8次。结论实验结果证实采用提高碱液浓度并延长浸泡时间可以增加几丁质树脂的使用次数，有利于指导实验室实验和药物开发。     

探讨哮喘和SARS-CoV-2的相互作用关系的生物信息学分析

目的 采用生物信息学方法探讨哮喘和SARS-CoV-2感染的相互作用关系及发生的潜在机制,为哮喘和新冠肺炎(COVID-19)进一步治疗提供新线索。方法 本文使用的研究数据来源于GEO数据库。利用R语言和Perl语言对数据进行预处理,筛选差异表达基因(DEGs),并获得GO功能富集分析、KEGG、Reactome、WikiPathways和BioCarta通路富集分析。通过Cytoscape软件获得蛋白质相互作用(PPI)网络分析可视化结果。使用RegNetwork数据库筛选与DEGs相互作用的转录因子(TF),再利用NetworkAnalyst构建miRNA-TF-mRNA共调控网络。最后,从DSigDB数据库筛选治疗药物。结果获得哮喘和SARS-CoV-2感染的数据集并且筛选得到25个受两者影响的重叠DEGs。GO功能富集分析和通路富集分析显示,DEGs参与病毒蛋白与细胞因子和细胞因子受体、补体和凝血级联反应通路。miRNA-TF-mRNA共调控网络表明关键基因与相关miRNA和TF之间复杂的调控关系。筛选到作用于DEGs的可能药物分子,包括雷洛昔芬、他莫昔芬和孕酮等。结论 在数据...     

TLR2对胶质母细胞瘤的预后价值和体外作用

目的 探究TCGA数据库中TLR2基因在胶质母细胞瘤(GBM)中的预后价值,并明确该基因对胶质母细胞瘤细胞LN229的体外作用。方法 从TCGA数据库中获取169例胶质母细胞瘤患者的临床信息和肿瘤样本的转录组数据,通过Kaplan-Meier生存曲线分析评估TLR2基因在GBM患者中的预后作用。构建TLR2敲减的人胶质母细胞瘤LN229细胞系,通过RT-qPCR和Western Blot验证。通过CCK8、克隆形成、细胞划痕、Transwell小室法,检测敲减TLR2对LN229细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力的影响。结果 与正常样本相比,TLR2在GBM患者样本中表达增高。生存分析结果显示,TLR2高表达组患者总生存期显著低于低表达组患者(总生存期中位值333 d vs.402 d,P<0.05)。RT-qPCR和Western Blot结果显示,TLR2敲减的人胶质母细胞瘤LN229细胞系成功构建。与转染si-control的LN229胶质瘤细胞相比,转染si-TLR2的LN229胶质瘤细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。与转染si-control的LN229胶质...     

联合应用细胞学检查与P53蛋白检测提高甲状腺癌术前诊断率

目的 研究细针穿刺细胞学与P53蛋白检测联合应用,以提高甲状腺癌术前诊断的准确率.方法 收集术前进行细针穿刺作细胞学检查和免疫组织化学法(S-P)作P53蛋白表达检测的甲状腺肿瘤患者40例,联合二者的结果对甲状腺癌的术前诊断率进行研究.结果 40例中经术后病理诊断为甲状腺癌的为28例;术前经细胞学检查诊断为甲状腺癌的为23例,P53蛋白检测阳性的为16例,二者的灵敏度分别为82.14%和57.14%,细胞学与P53蛋白联合检测的灵敏度为92.86%.结论 术前经细针穿刺作细胞学检查联合P53蛋白检测可以提高甲状腺癌的术前诊断率.     

红细胞膜带3蛋白及膜流动性在病理状态下的变化

目的 研究带３蛋白与红细胞膜流动性的关系及其在病理状态下的改变。方法 对血液病及高血压患者红细胞膜带３蛋白相对含量、红细胞膜流动性及血浆ＭＤＡ分别进行了测定。结果 血液病患者红细胞膜带３蛋白相对含量和膜流动性较对照组显著降低,而血浆ＭＤＡ含量较对照组显著升高。结论 病理状态下,膜流动性的降低与带３蛋白的相对含量减少有关。     

新型多金属氧酸盐化合物{BiW8O30}对胶质母细胞瘤细胞体内、体外抑制作用的研究

目的:明确新型多金属氧酸盐化合物{BiW₈O₃₀}对胶质母细胞瘤细胞体内、体外抑制作用的影响,并探讨可能的作用机制。方法:采用不同浓度{BiW₈O₃₀}处理LN229、U251细胞。CCK-8法检测细胞增殖能力;细胞划痕和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞实验检测细胞凋亡情况;DAPI染色观察细胞核形态变化;裸鼠皮下移植瘤模型实验检测肿瘤体内增殖能力;Western blot实验检测细胞中凋亡相关蛋白的表达水平;蛋白质组测序技术分析{BiW₈O₃₀}发挥对胶质母细胞瘤细胞抑制作用的可能机制。结果:与对照组相比,{BiW₈O₃₀}处理组的细胞存活率、划痕愈合率、侵袭细胞数均显著降低(P<0.001)。流式细胞实验显示,{BiW₈O₃₀}处理提高肿瘤细胞凋亡率(P<0.05)。DAPI染色结果显示,{BiW₈O₃₀     

槲皮素抗阿霉素诱导的培养心肌细胞的凋亡

目的观察槲皮素对阿霉素(adriamycin,ADR)致大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法原代培养乳鼠心肌细胞,随机分为正常对照组、阿霉素损伤组、槲皮素对照组、阿霉素+槲皮素(低、中、高浓度)组。比色法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,MTT法测定心肌细胞存活率,电镜观察细胞超微结构,免疫细胞化学法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达,用RT-PCR和Western blot检测caspase-3 mRNA和蛋白的表达。结果与正常对照组相比,槲皮素对照组各指标无明显改变,阿霉素组LDH活性增强,细胞存活率降低,Bcl-2表达减少,Bax表达增加,心肌细胞超微结构损伤明显,caspase-3 mRNA和蛋白的表达均升高;高中低剂量槲皮素均可减轻阿霉素所致的损伤。结论槲皮素对ADR致培养心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制与调节细胞内凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的表达有关。