神经细胞中乙酰化对NOS1基因启动子活性的调节

 目的 探讨乙酰化对人神经母细胞瘤SK-N-SH 细胞中NOS1基因启动子活性的调节作用。方法 构建系列截短的NOS1 5′侧翼序列萤光素酶报告基因载体,应用萤光素酶报告基因检测系统分析SK-N-SH 细胞中NOS1启动子活性,并比较组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A (TSA)刺激前后启动子活性的变化。结果 构建并鉴定了系列截短的NOS1 启动子萤光素酶报告基因载体;在NOS1基因启动子区鉴定了两个正调控区域和两个负调控区域,同时TSA可上调不同长度启动子的转录活性。结论 乙酰化参与调节神经细胞中NOS1基因启动子活性。     

血管紧张素原基因表达调控在高血压发病学中的意义

血管紧张素原基因是高血压的的一个主要候选基因，该基因表达受激素。细胞因子、ＡｇⅡ等调节，直接影响血压稳定，在高血压发病学中有重要意义。本就血管紧张素原基因分子遗传学的研究加以概述。     

microRNA在心血管系统及其疾病中的作用

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类新的内源性非编码小RNA,它通过转录后调节基因表达来参与许多重要的生物学过程,如细胞的增殖、分化、凋亡、应激反应等.某些miRNA在心脏或血管细胞中特异性表达,提示这些miRNA在心血管系统中发挥重要的调节作用,尤其是miRNA表达改变将有助于我们更好的了解心血管系统的病理生理过程,为心血管疾病治疗提供新的思路.     

神经型一氧化氮合酶在缺血预适应中的作用及其机制研究

目的 建立化学模拟缺血预适应的细胞模型,研究缺血预适应过程中神经型一氧化氮合酶(nNOS)的作用及其机制.方法 用300 μmol/L CoCl2预处理SK-N-SH细胞3 h.24 h后以无血清培养基培养细胞,建立缺血预适应的细胞模型,同时应用nNOS特异性抑制剂7-NI,研究nNOS在缺血预适应中的作用.在缺血预适应后不同时段以MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞技术测定细胞凋亡情况,并与无血清刺激组进行比较;同时以RT-PCR技术检测nNOS和凋亡相关基因在缺血预适应后的表达情况.结果 300 μmol/L CoCol2预处理可以使细胞在无血清培养条件下的增殖能力较无血清刺激组增加2.5倍,同时使细胞凋亡减少70%,与无血清刺激组比较差异均有统计学意义(P<0.05).缺血预适应可在3 h和24 h上调nNOS的表达,同时上调凋亡抑制基因Bcl-2的表达,下调凋亡促进基因Apaf-1的表达.而这些调节作用可被nNOS抑制剂7-NI抑制.结论 300 μmol/LCoCl2预处理SK-N-SH细胞3 h可以模拟缺血预适应的保护作用.nNOS在缺血预适应中可调节Bel-2和Apaf-1基因的表达从而起到重要的作用.     

预适应诱发胶质瘤耐药作用机制探讨

目的：明确低氧预适应诱发胶质瘤细胞系SK—N—SH对BCNU的耐药，研究在低氧预适应的过程中一氧化氮含酶的作用及其机制、方法：用300μmol／L CoCl2预处理SK—N—SH细胞3小时，24小时后以BCNU刺激细胞，MTT法测定细胞增殖，流式细胞技术测定细胞的凋亡RT—PCR技术检测神经型一氧化氮合酶和凋亡相关基因的表达情况结果：300μmol／L CoCl2预处理可以明显增加细胞在BCNU条件下的增殖能力，减少凋亡预适应可以上调神经型一氧化氯合酶的表达，同时可以上调凋亡抑制基因Bcl-2的表达，下调凋亡促进基因Apaf-1的表达．这些调节作用可被神经型一氧化氯合酶的抑制剂7-NI抑制结论：300μmol／L CoCl2预处理SK—N—SH细胞3小时可以增加肿瘤细胞对BCNU的耐药作用神经型一氧化氮含酶在预适应中可调节Bcl-2和Apaf-1基因的表达从而起到重要的作用。     

重组人骨形态发生蛋白-7对大鼠心肌缺血再灌注时NF-κB活性的影响

目的 探讨重组人骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)对大鼠心肌缺血再灌注时NF-κB活性的影响.方法 健康Wistar大鼠40只,体重250～300 g,雌雄不拘,随机分为3组:假手术组(S组,n=8)、缺血再灌注组(IR组,n=16)和rhBMP-7组(B组,n=16).采用结扎左冠状动脉前降支后30 min再灌注的方法 建立大鼠心肌缺血再灌注模型.S组左冠状动脉穿线后不结扎;B组于再灌注前即刻经股静脉注射rhBMP-7 250μg/kg,IR组和S组注射等容量生理盐水.B组和IR组分别于再灌注4 h(T1)和24 h(T2)时随机取8只大鼠测定血清乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CPK)活性、心肌组织MDA含量、SOD活性;TUNEL法检测心肌凋亡细胞,并计算心肌细胞凋亡率;Western blot法测定心肌细胞核NF-κB的表达,以表示心肌细胞NF-κB的活性;S组仅于T1时测定以上指标.结果 与S组比较,IR组和B组再灌注时血清LDH、CPK活性和心肌MDA含量升高,心肌SOD活性降低,心肌细胞凋亡率和NF-κB活性升高(P<0.05或0.01);与IR组比较.B组再灌注时血清LDH、CPK活性和心肌MDA含量降低,心肌SOD活性升高,心肌细胞凋亡率和NF-κB活性降低(P<0.05或0.01).结论 rhBMP-7可能通过抑制大鼠心肌细胞NF-κB的活性,从而减轻心肌缺血再灌注损伤.     

中国东北汉族人群WNK4基因多态性与原发性高血压的关联性

目的探讨东北汉族人群WNK4基因多态性与原发性高血压的关系。方法259例原发性高血压患者和235例健康正常对照人群血样应用PCR-RFLP方法检测A589S多态,结果经测序验证,同时检测所有人群的血糖、血脂等生化指标。结果(1)两组研究对象基因型频率间差别无显著性意义(P>0.05),但等位基因频率间差别有显著性意义(P<0.05);(2)GT和TT基因型与收缩压及舒张压升高密切相关(P=0.041,0.032)。结论WNK4基因A589S多态可能与高血压密切相关。     

胎盘四氯二苯二(噁)英表达在胰岛素样生长因子2诱导胎鼠发育异常中的作用

目的 研究四氯二苯二噁英（2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin，TCDD）对胎鼠生长发育的影响及与胰岛素样生长因子2（insulin-like growth factor2，IGF2）的关系。方法 经灌胃给予孕10d大鼠10μg／kg TCDD，20d剖宫取胎，比较实验组和对照组孕鼠妊娠结果，测量两组活胎的身长、体重及胎盘重；用逆转录-实时定量PCR和免疫组化方法检测两组活胎胎盘组织昭F2 mRNA及蛋白的表达水平，用甲基化敏感限制酶HpaⅡ酶切-PCR法检测两组胎盘组织IGF2基因DMR1的甲基化程度。结果 实验组死胎及吸收胎发生率为12．2％。致畸率为11．6％，活胎身长、体重及胎盘重明显低于对照组；实验组活胎胎盘组织IGF2mRNA及蛋白的表达明显高于对照组；两组IGF2基因DMRl的甲基化程度无差异。结论 孕10d给予大鼠10μg／kgTCDD灌胃可导致死胎、吸收胎、畸形胎和胎儿宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation，I-UGR）。TCDD所致胎鼠发育异常可能与胎盘组织IGF2表达增高有关。     

马蹄内翻足胎大鼠胫骨后肌组织的蛋白质组学分析

目的寻找马蹄内翻足畸形相关蛋白。方法提取全反式维A酸诱导的单纯马蹄内翻足畸形胎大鼠及正常对照胎大鼠胫骨后肌群总蛋白,进行双向电泳,考马斯亮蓝染色;经PDQuest软件分析,选择重复出现的差异点,质谱分析鉴定蛋白。结果获得了分辨率及重复性均好的双向电泳图谱。畸形胎大鼠与正常对照比较,有蛋白质点缺失、额外增加及明显上调或下调。质谱鉴定发现畸形胎大鼠肌组织慢骨骼肌肌钙蛋白T(sTnT)缺失,X连锁凋亡蛋白抑制因子(XIAP)下调,羧酸酯酶AY034877额外表达。结论畸形胎大鼠胫骨后肌组织与正常胎大鼠比较存在蛋白质组差异,畸形胎大鼠sTnT,XIAP及羧酸酯酶AY034877表达改变,可能与马蹄内翻足畸形相关。     

IRS2基因G1057D变异与中国汉族人肥胖型2型糖尿病的相关性

目的 研究IRS2基因G1057D突变与中国汉族人2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）的相关性。方法 选取辽宁汉族人T2DM组218例，健康对照组221名，各分为肥胖和非肥胖两个亚组。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法筛查IRS2 G1057D突变并探讨与T2DM的相关性。结果 （1）IRS2 G1057D总突变频率为29％。非肥胖DM组DD型频率显著低于非肥胖对照组，Logistic回归分析显示DD型OR值为0．265；而肥胖DM组DD型频率则显著高于肥胖对照组，Logistic回归分析显示DD型的OR值为3．991。（2）在非肥胖亚组：DM组DD型的WHR高于同组GG型（P〈0．01）；对照组DD型的FPG及2hCP低于同组GG型（P〈0．05，P〈0．01），HOMA-B高于同组GG型（P〈0．01）。在肥胖亚组：DM组DD型的WHR、HOMA-IR及2hPG、2hINS、2hCP均高于同组GG型，HOMA-B低于同组GG型；对照组DD型的WHR、2hINS、HOMA-IR及HOMA-B也分别高于及低于同组GG型（均P〈0．05）。结论 IRS2基因G1057D突变以肥胖为中介与他DM相关联。