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目的 通过观察辐射对小鼠皮肤成纤维细胞系L929生长及CCNI基因表达的影响,探讨CCNI基因与辐射损伤的关系. 方法 体外培养L929细胞系,以4 Gy60Coy射线照射为辐射组,并设对照组,MTT法测细胞增殖变化,平板克降形成实验检测克隆形成能力,流式细胞术测细胞周期,RT-PCR及免疫细胞化学法检测L929细胞中CCN1基因的表达情况.结果辐射组细胞辐照2 d增殖抑制明显(P<0.01),克隆形成也明显受到抑制(P<0.05);辐射后24 h,细胞出现G2,期停滞;辐射后6 Hl929细胞CCN1的Mrna表达水平明显降低(P<0.01),至24 h开始回调(P<0.05);辐照后24~48 h,细胞CCN1蛋白的表达水平明显下降(P<0.01). 结论 因辐照生长受到抑制的小鼠成纤维细胞L929,其CCN1基因的表达水平下调,提示CCN1基因的表达水平低下是辐射导致细胞生长抑制的因素之一. 相似文献
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目的 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因启动子驱动eGFP报告基因的慢病毒载体,观察eGFP在肿瘤细胞中的表达情况.方法 用hTERT基因启动子取代慢病毒载体eGFP上游的CMV启动子;将重组慢病毒载体pLenti-phTERT-eGFP用脂质体介导法转入端粒酶阳性的293FT、HepGⅡ、SGC7901细胞及端粒酶阴性的U2OS细胞中进行功能鉴定,以慢病毒载体pLenti-pCMV-eGFP作为对照,倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况.结果 在端粒酶阳性的3株细胞中均可以观测到绿色荧光蛋白表达;在端粒酶阴性的U2OS细胞中无绿色荧光蛋白表达.结论 hTERT基因启动子在端粒酶表达阳性的细胞中具有较强转录活性;所构建的慢病毒载体为进一步研究、利用hTERT基因启动子提供了较好的实验工具. 相似文献
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目的 Wnt信号异常激活与肿瘤发生有关,观察Wnt信号的天然拮抗剂FrzB对Wnt信号转导的影响和对肿瘤细胞增殖抑制。方法采用AdEasy系统构建重组腺病毒AdFrzB;卡那霉素抗性筛选、酶切鉴定及荧光显微镜和Western blot检测标记基因GFP和His表达等方法鉴定AdFrzB。AdFrzB与AdWnt3A共感染人骨肉瘤细胞株143B,AdGFP与AdWnt3A共感染为对照,β-catenin/Tcf荧光素酶反应系统检测FrzB对Wnt信号转导的影响;MTT实验检测FrzB对细胞增殖的抑制。结果卡那霉素抗性筛选及酶切鉴定获得pAdFrzB-His;检测到报告基因GFP和His表达,确证AdFrzB构建成功。FrzB抑制了Wnt信号转导并抑制了143B细胞增殖。结论 AdEasy系统有效构建了AdFrzB;外源性FrzB拮抗Wnt信号转导并抑制143B细胞增殖,FrzB可能是一种天然抗肿瘤因子。 相似文献
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目的探讨彻底清除上颌窦黏膜下囊肿并防止复发的治疗方法。方法对28例上颌窦黏膜下囊肿行鼻内镜下双径路手术,术中彻底清除病变。结果随访1年,无并发症,治愈率达100%,无复发。结论该方法对清除上颌窦黏膜下囊肿,避免复发具有优越性。 相似文献
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目的探讨慢性肾脏病(CKD) 5期未透析患者的血清25羟维生素D_3[25(OH)D_3]水平及其相关因素。方法选取在肾内科住院诊断为CKD 5期未透析的72例患者,回顾性的收集患者人口统计学数据及临床资料,根据血清25(OH)D_3水平将患者分为25(OH)D_3缺乏组及非缺乏组,比较两组间临床资料的差异。采用spearman相关分析及逐步多元线性回归分析探讨血清25(OH)D_3水平的相关因素。采用单因素logistic回归分析探讨血清25(OH)D_3缺乏的相关因素,并计算各个相关因素的比值比(OR)及其95%的可信区间(CI)。结果 72例CKD 5期未透析患者血清25(OH)D_3水平3.0~38.3μg/L[平均(8.8±7.0)μg/L],25(OH)D_3缺乏组61例,非缺乏组11例,25(OH)D_3缺乏率达到84.7%。25(OH)D_3缺乏组与非缺乏组在血清钙、磷、碱性磷酸酶、全段甲状旁腺激素、氨基末端B型钠尿肽前体、左心室舒张末期内径、左心室后壁厚度、室间隔厚度、左室射血分数的差异无统计学意义(P均>0.05)。Spearman线性相关分析提示:血清25(OH)D_3与血清白蛋白(ρ=0.439)呈正相关(P<0.05),与氨基末端B型钠尿肽前体(ρ=-0.383)、左心室舒张末期内径(ρ=-0.256)呈负相关(P均<0.05);与血清钙、磷、碱性磷酸酶、全段甲状旁腺激素无相关性(P均>0.05)。逐步多元线性回归分析显示血清25(OH)D_3与血清白蛋白呈独立正相关(P<0.05)。单因素logistic回归分析显示仅血清白蛋白<36 g/L (OR=6.058,95%CI:1.206~30.428,P=0.029)可能是血清25(OH)D_3缺乏的危险因素。结论 CKD 5期未透析患者的血清25(OH)D_3缺乏可能对CKD 5期未透析患者的心血管疾病有重要影响,而对钙磷代谢的影响比较弱。 相似文献
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目的探讨雷米普利对糖尿病肾病(DN)大鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)表达及肾系膜基质聚集的影响。方法 SD大鼠分为健康对照组(NC组,n=12)、DN组(n=11)、DN雷米普利干预组(DN+RAM组,n=12),腹腔注射链脲佐菌素构建DN模型,DN+RAM组予雷米普利3 mg·kg-1·d-1灌胃8周,检测肾重/体质量、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐;HE染色和电镜观察肾脏病理改变;免疫组织化学检测肾组织IGF-1表达;Western blot检测IGF-1、纤维连接蛋白(FN)、IV型胶原(Col-IV)和基质金属蛋白酶(MMP)-2表达。结果与NC组比较,DN组大鼠肾重/体质量、FBG、Hb A1c、24h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐明显升高,肾小球肥大和系膜基质聚集明显,IGF-1、FN和Col-IV蛋白表达明显增加,MMP-2表达明显降低(P0.05)。与DN组比较,DN+RAM组上述指标除FBG和Hb A1c外均明显改善(P0.05)。IGF-1蛋白表达与24 h尿蛋白定量(r=0.937)、FN(r=0.896)和Col-IV(r=0.871)表达呈显著正相关,与MMP-2(r=-0.826)呈显著负相关(P0.05)。结论雷米普利可通过抑制IGF-1的表达,减轻肾系膜基质聚集,发挥肾脏保护作用。 相似文献