下调Homer—1 b／c基因对机械性损伤神经元存活率的影响

目的既往研究表明,Homer-1b／c在神经元损伤后恒定表达,但下调Homer—1b／c能否对损伤的神经元具有保护作用尚不清楚,这也是本实验中待研究的问题。方法采用RNA干涉（RNAi）技术,抑制神经元Homer-1b／c基因及蛋白表达。通过Westernblot法分析神经元转染小干扰RNA（siRNA）后Homer—1b／c基因抑制效果。建立神经元机械性损伤模型,通过细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）活性测定,研究下调Homer-1b／c基因对神经元损伤的保护作用。结果siRNA转染神经元后36h,Homer-1b／cmRNA和蛋白质表达明显被抑制。siRNA转染组神经元损伤后细胞存活率明显比阴性对照组、空载体组高（P〈0．05）。阴性对照组、空载体组和siRNA转染组神经元损伤前培养液LDH性无统计学差异（P〉0．05）,机械性损伤后24h,与阴性对照组及空载体组比较,siRNA转染组LDH活性明显降低（P〈0．05）。结论Homer—1b／csiRNA转染神经元效率较高,基因抑制效果显著。降低Homer-1b／c蛋白表达能够减少机械性损伤后继发性神经元损害,对神经元具有一定的保护作用。     

ATRA诱导胶质瘤C6细胞凋亡过程中Bcl-2和Caspase-3表达的研究

目的研究全反式维甲酸（ATRA）诱导胶质瘤C6细胞凋亡过程中Caspase-3和Bcl-2表达情况,探讨ATRA诱导胶质瘤C6细胞凋亡的机制。方法用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法绘制ATRA不同浓度不同时间（6、12、24、48、72h）对胶质瘤C6细胞作用后细胞生长曲线,逆转录酶-多聚酶链反应（RT—PCR）检测凋亡相关基因Bcl-2和Caspase-3 mRNA水平的表达变化影响,Western blot分析Caspased和Bcl-2在胶质瘤C6细胞中的表达情况。结果胶质瘤C6细胞经ATRA诱导后,细胞的增殖明显受到抑制,通过RT-PCR结果证实Bcl-2 mRNA在ATRA作用下明显呈低表达而Caspase-3 mRNA的表达随时间延长逐渐增高,Western blot检测结果显示ATRA作用后,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达并激活了凋亡蛋白Caspase-3的表达。结论ATRA对胶质瘤C6细胞的增殖具有抑制作用。     

脑移植与移植脑

一头头脑脑意义大 从古至今在许多文学作品中都有对头颅或头脑的捕述。古人作“头颅”亦作“头卢”,《战同策·秦策四》中写道：“刳腹折颐,首身分离,暴骨草泽．头颅僵仆,相望于境。”《汉书·武五子传赞》中：“暴骨长城之下,头卢相属于道。”这是以头颅和肢体布满战场和道路的情景来揭示战争的残酷性。清阎尔梅《题剑阁》涛：“遍地头颅生鬼火,     

Notch信号通路在培养神经元细胞中的表达

目的 观察在体外培养的神经元细胞内Notch基因的分布和表达.方法 原代神经元培养,免疫组织化学的方法定位.对按不同时间点进行划伤处理的神经元细胞进行Westernblot分析,测定其Notch表达的变化趋势.结果 在培养的神经元细胞内有大量细胞(＞99％)均为Notch基因表达信号阳性;按时间点损伤的培养细胞其Notch 1受体胞内段(N1CD)表达呈动态变化.结论 成熟神经元中存在Notch基因的表达,Notch基因可能参与神经元损伤的病理过程.     

2012年中国神经科学学会神经创伤与修复大会纪要

由中国神经科学学会神经损伤与修复分会主办、第四军医大学西京医院神经外科承办的"中国神经科学学会神经创伤与修复大会"于2012年9月14日至16日在西安建国饭店召开.来自全国近500名临床医师及研究人员参加了本次大会.会议回顾了近年来国内外神经创伤与修复领域的新成果,现将会议主要内容总结如下.     

儿童先天性寰枢关节脱位后路复位及内固定技术

目的 探讨儿童先天性寰枢关节脱位后路直接复位及螺钉-钛棒(板)内固定技术的临床效果. 方法 选择第四军医大学西京医院神经外科自2008年4月至2011年3月收治的7例先天性颅颈交界区不稳定患儿,其中3例伴有扁桃体下疝,4例伴有脊髓空洞,3例寰枕融合.采用枕骨钉-枢椎椎弓根螺钉内固定术,并通过螺钉间撑开技术使寰枢关节复位.根据手术后JOA评分和影像学资料,评价手术疗效. 结果 7例患儿手术后临床症状明显改善.手术后1个月螺钉位置良好,3个月三维CT检查显示3例颅椎体间融合良好.随访1～15个月,患儿JOA评分平均为(12.03±3.58)分,与手术前(7.56±3.16)分比较差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论 对适宜儿童寰枢关节脱位病例,后路直接复位及内固定是一种有效治疗手段.     

MSP58基因RNA干涉后对人脑胶质瘤细胞裸鼠移植瘤的影响

目的观察RNA干涉法（RNA interference,RNAi）抑制人脑胶质瘤U251细胞的MSP58基因表达后,对其在裸鼠体内成瘤性及增殖、侵袭性的影响。方法将特异性的MSP58干涉表达载体pSilencer3．1．MSP58转染人脑胶质瘤细胞系U251（U251．S）,同时构建相应的阴性对照组U251-NC,以及空载体组U251-H1neo。运用逆转录酶-多聚酶链反应（RT—PCR）及蛋白质印迹法（Westernblot）检测各组细胞的MSP58mRNA和蛋白表达水平。用各组U251细胞建立人脑胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型。结果成功建立了具有稳定下调MSP58基因表达的U251-S细胞。U251-S细胞MSP58的表达无论在mRNA水平还是在蛋白质水平均较U251组、U251-H1neo组及U251-NC组细胞显著降低（P〈0．01）。与接种U251、U251-H1neo和U251-NC细胞的裸鼠相比,接种U251-S细胞的裸鼠肿瘤形成时间延迟,肿瘤生长缓慢,肿瘤体积及瘤重均明显减小（P〈0．01）。结论MSP58基因RNAi后抑制了移植瘤细胞MSP58mRNA及蛋白的表达,进而明显抑制移植瘤的增殖和侵袭能力。     

内窥镜辅助显微直视手术切除颅内胆脂瘤

目的总结颅内胆脂瘤显微直视手术中辅以内窥镜处理显微镜死角部位肿瘤的经验,以期提高颅内胆脂瘤的全切率。方法回顾性分析2000年8月至2008年8月手术治疗的颅内胆脂瘤患者251例,所有病人术前均经CT、MRI检查并经手术及病理证实。其中肿瘤位于小脑桥脑角151例,鞍区61例,松果体区16例,脑实质内10例,纵裂内5例,枕大池区4例,颅中窝底硬膜外4例。依肿瘤所在部位选择恰当骨瓣开颅,先在显微镜直视下分离切除所见肿瘤及其包膜,然后用内窥镜观察显微镜死角区域是否有残余肿瘤,并在内窥镜下切除之。同时以1992年8月至2000年7月收治的未用内窥镜辅助手术的颅内胆脂瘤248例作为病例对照。结果内窥镜辅助手术组术后经影像学检查,全切223例（88．84％）,大部切除28例（11．16％）;术后近期出现神经功能损害症状者6例（2．4％）;无手术死亡。获随访196例,随访期0．5—8年,均恢复正常工作和学习。对照组全切162例（65．32％）,大部切除86例（34．68％）,出现神经功能损害者7例（2．82％）,死亡1例。结论在颅内胆脂瘤显微直视手术中,辅以内窥镜可以观察并切除显微镜死角内的残余肿瘤,从而明显提高手术全切率,有效防止肿瘤复发。     

九节龙皂苷诱导胶质瘤SHG-44细胞凋亡及其机制研究

目的研究九节龙皂苷对胶质瘤SHG-44细胞潜在的治疗作用及其机制。方法用四甲基偶氨唑蓝（MTT）法检测不同剂量九节龙皂苷于不同时间（6、12、24、72h）对人胶质瘤SHG-d4细胞活性的影响和细胞流式术检测SGH-44细胞调亡情况;Western—blot检测caspase-3和Bcl-2在SHG-44细胞中的表达情况。结果流式细胞仪检测显示,随着九节龙皂苷浓度的增大和时间延长,SHG-44细胞的凋亡率明显上升,Western—blot结果提示九节龙皂苷下调了凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达并激活了凋亡蛋白caspase-3,九节龙皂苷明显抑制SHG-44细胞的生长与增殖。结论九节龙皂苷引起胶质瘤细胞大量凋亡,具有显著的抗肿瘤作用,通过调控caspase-3和Bcl-2诱导胶质瘤SHG-44细胞凋亡。