突变体富集聚合酶链反应检测胰腺癌K-ras基因突变的研究

胰腺癌是一种恶性程度极高，早期难以诊断，预后极差的恶性肿瘤，临床确诊者大多属于晚期癌，5年生存率总体低于5％。我们采用突变体富集聚合酶链反应（PCR）检测胰腺癌细胞系K—ras基因点突变，以期为早期诊断胰腺癌提供一种简便、灵敏而有效的检验方法。     

DC联合CIK免疫治疗术后晚期恶性肿瘤84例疗效观察

目的观察树突状细胞（DC）联合细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）免疫治疗84例术后晚期恶性肿瘤患者的疗效。方法对84例恶性肿瘤术后患者,分别采用手术切除的肿瘤组织作为致敏DC的肿瘤抗原,分离患者外周血单核细胞培养成DC和CIK,分别回输患者体内,行免疫治疗。1～3个疗程评价疗效及疾病控制率（DCR）、卡氏行为状态评分（KPS）,观察血清肿瘤标志物（AFP、CEA、CA125、CA199）水平。结果84例中,CR1例、PR27例、sD43例、PD13例,DCR为84．5％,KPS较治疗前评分超过20分者占59．5％（50／84）。84例血清AFP、CEA、CA125、CA199水平均较治疗前明显下降（P均〉0．05）。结论DC联合CIK能有效增强术后晚期恶性肿瘤患者的免疫能力,对恶性肿瘤有明显的治疗作用。     

细胞周期相关蛋白在大肠癌中的表达及其意义

目的 探讨细胞周期相关蛋白在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系.方法 应用免疫组化S-P法对70例大肠癌组织及距癌灶3 cm以外的癌旁组织、10 cm以外的正常组织中CyclinDl、CDK4、p16和Pb进行检测.结果 CyclinD1和CDK4在大肠癌中过度表达,分别为36/70(51.4%)和28/70(40.0%),并与肿瘤的分化程度呈反比,有淋巴结转移的大肠癌,其CyclinD1和CDK4的阳性率分别为70.0%和60.0%,无淋巴结转移的大肠癌阳性率分别为44.0%和32.0%,两者相比差异有显著性(P＜0.05),p16在大肠癌中为低表达33/70(47.1%),癌旁组织和正常组织中p16的表达分别为57.1%和71.4%,Rb在大肠癌、癌旁及正常组织中的表达分别为65.7%、78.6%和85.7%.CyclinD1与CDK4呈正相关关系(P＜0.05).CyclinD1与p16、p16与Rb是负相关关系(P＜0.05、P＜0.05).结论 CyclinD1、CDK4的过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关;p16的表达可能受Rb蛋白的负调控;CyclinD1的过度表达和p16的低表达在大肠癌发生中起协同作用;     

CyclinD1基因扩增及其蛋白表达在大肠癌中的意义

目的 探讨大肠癌中CyclinD1基因扩增和其蛋白表达的相关性及其临床意义.方法 应用差异聚合酶链反应(DPCR)和免疫组化技术检测分析70例大肠癌、距癌灶3cm以外的癌旁组织及距癌灶10cm以外的正常组织中CyclinD1基因扩增和CyclinD1蛋白的表达情况.结果 70例大肠癌中CyclinD1基因扩增占31.4%(22/70),CyclinD1蛋白过度表达占51.4%(36/70),二者成正相关(P＜0.01,r=0.473),而癌旁及正常组织中CyclinD1基因扩增及其蛋白表达分别为2.9%(2/70)、4.3%(3/70)和0.0%(0/70)、0.0%(0/70).与大肠癌相比差异有显著性(P＜0.01).CyclinD1基因扩增及其蛋白表达在大肠癌中不同组织学类型、淋巴结有无转移及Dukes不同分期差异有显著性(P＜0.05).结论 大肠癌中CyclinD1基因扩增及其蛋白表达虽有一定相关性,但并不完全一致,说明还存在着其它导致CyclinD1蛋白过度表达的机理,CyclinD1基因扩增及其蛋白过度表达在大肠癌的恶性进展中起重要作用,可作为判定大肠癌恶性度的重要参数之一.     

米托蒽醌通过诱导钙网蛋白的表达抑制黑素瘤的生长

目的：观察米托蒽醌（mitoxantrone,MIT）对黑素瘤B16细胞钙网蛋白（calreticulin, CRT）表达的影响,探讨高表达CRT的B16细胞膜抗原疫苗的免疫效果及其机制。方法：不同剂量MIT处理B16细胞,免疫荧光法检测B16细胞CRT的表达。以B16细胞建立小鼠荷瘤模型,用不同剂量的MIT治疗荷瘤小鼠,观察MIT对黑素瘤生长及肿瘤组织中CRT表达的影响。制备B16细胞膜蛋白和MIT处理后B16细胞膜蛋白作为疫苗分别免疫小鼠,免疫组化检测小鼠移植瘤组织内免疫细胞的浸润情况,流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏中CD4+、CD8+T细胞比例的变化。结果：MIT可剂量依赖性地上调B16细胞表面CRT的表达,对照组B16细胞表面CRT为（29.40±3.57）%,高剂量MIT处理组为（72.20±2.94）%（P<0.05）;MIT促进移植瘤组织中CRT的表达,对照组为（3.21±1.37）,高剂量MIT组为（9.17±106）（P<0.05）。MIT有效抑制小鼠黑素瘤的生长（P<0.05,P<0.01）。与B16细胞膜蛋白疫苗相比,高表达CRT的MITB16细胞膜蛋白疫苗可明显上调小鼠黑素移植瘤组织中的DCs和T细胞的数量,以及脾脏细胞中CD4+、CD8+T细胞的比例（P<0.05）。结论：MIT能够上调CRT在B16细胞表面的表达,高表达CRT的B16细胞膜蛋白疫苗能够提高肿瘤组织中浸润DCs和T细胞的数量,抑制黑素瘤的生长。