下瘀血汤调控ACE2介导的RAS自稳抑制肝纤维化实验研究

目的探讨下瘀血汤是否通过恢复或重建肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)的自稳平衡抑制肝纤维化进展。方法将27只Wistar雄性大鼠随机分为5组,即正常组、模型组、去除病因组、下瘀血汤组和氯沙坦钾组。除正常组外,各实验组大鼠背部皮下注射2.5 mL/kg 40%四氯化碳橄榄油混悬液造模,并以下瘀血汤及氯沙坦钾干预肝纤维化进展,应用HE染色、Masson三色胶原染色和超微病理学方法观察肝脏组织结构的改变,采用免疫组织化学染色法检测各组AT1R、TGF-β1表达,采用RT-PCR及Western-blot法检测RAS相关因子的基因和蛋白表达。结果①HE染色、Masson三色胶原染色和超微病理学结果均显示去除病因组、下瘀血汤组、氯沙坦钾组和模型组肝纤维化程度依次加重。②RT-PCR及Western-blot结果显示,与正常组相比,其他组RAS相关分子ACE2、ACE、AngⅡ、AT1R及TGF-β1的mRNA及蛋白表达均升高;除去除病因组TGF-β1基因表达差异无统计学意义(P>0.05)之外,其他组间比较均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,去除病因组、下瘀血汤组、氯沙坦钾组RAS相关分子ACE2、ACE、AngⅡ、AT1R及TGF-β1的mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.05)。③与氯沙坦钾组比较,下瘀血汤组ACE2的mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05),而AngⅡ及TGF-β1的mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论下瘀血汤可能通过增加ACE2的表达,抑制ACE、AngⅡ和TGF-β1的表达,使RAS中促进肝纤维化的经典通路ACE-AngⅡ-AT1R转变为抑制肝纤维化的ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴为主导,从而抑制肝纤维化。     

方证相关论肝纤维化

肝纤维化不是一个独立的疾病，而是发生在大多数慢性肝病过程中，由于细胞外基质以及胶原的过度积累造成的，是大多数慢性肝脏疾病发展至肝硬化的必经阶段。晚期肝纤维化导致肝硬化、肝衰竭和门脉高压，最后往往需要肝移植。据世界卫生组织不完整统计，全世界大约有1．7亿慢性肝纤维化患者，大约占全世界人口的3％。