中药复方干预肾间质纤维化研究思路和方法

<正>肾小管间质纤维化是终末期肾病的共同特征,也是决定肾脏疾病进展的主要因素。多年来对中医药治疗肾间质纤维化进行了大量的研究,基础实验和初步临床研究均取得较为乐观的研究结果,许多研究已经深入分子水平。进一步深入探讨中药治疗肾间质纤维化的机制,筛选有效药物,将可能为临床治疗肾间质纤维化开辟一条崭新的途径。笔者结合有关文献就中药复方治疗肾间质纤维化的思路和方法总结综述如下。     

人参皂甙Rg1对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞增殖及细胞外基质的影响

目的:观察人参皂甙Rg1对转化生长因子-β1诱导的肾小管上皮细胞增殖及细胞外基质的影响.方法:MTT法测细胞增殖情况.ELISA法测定培养细胞上清液中Col-Ⅰ,Col-Ⅲ和FN的含量.结果:在10～40 ng/mL浓度范围内时间、剂量依赖性的促进肾小管上皮细胞增殖,减少转化生长因子-β1诱导的肾小管上皮细胞对Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、FN的分泌.结论:G-Rg1能够促进TGF-β1诱导下的肾小管上皮细胞的增殖,可能与抑制ECM的分泌有关.     

黄芪对单侧输尿管梗阻大鼠肝细胞生长因子和转化生长因子β1的调控

目的动态观察黄芪(AM)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致肾小管间质纤维化大鼠肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和模型+黄芪治疗组。在造模后第3、7和14天处死动物,观察肾脏病理改变。采用免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1、HGF表达。用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠HGF mRNA和TGF-β1mRNA表达量。用Western blot检测大鼠HGF和TGF-β1蛋白表达量。结果与假手术组相比,各时间点的模型组大鼠肾脏病理损害进行性加重,黄芪治疗后可明显减轻模型组大鼠的肾小管损伤及肾间质纤维化程度(P<0.05)。随着梗阻时间的延长,模型组大鼠肾组织TGF-β1表达逐渐增加;HGF表达呈现先升高后下降的表达规律,在UUO术后第7天达高峰,此后大幅回落;与模型组各对应时间点比较,黄芪治疗后可使肾组织中的HGF表达显著增高,TGF-β1表达明显降低(P<0.05)。结论黄芪可能通过诱导HGF表达上调及抑制TGF-β1表达,减轻肾间质纤维化。     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠肾脏足细胞保护作用的研究

目的探讨厄贝沙坦对糖尿病大鼠尿蛋白以及足细胞、足突顶膜区主要的带负电荷跨膜蛋白Podocalyxin的影响。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin STZ,65mg/kg)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。将30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常组、糖尿病模型组和厄贝沙坦(ARB)治疗组。连续监测血糖8周,8周后处死各组大鼠的前一天行24小时尿蛋白定量和肾功检查了肾组织;处死大鼠后取行苏木素伊红染色(hematoxylin and eosin stain,HE)观察其病理变化;透射电镜观察足细胞、裂孔隔膜等变化。采用Western蛋白印迹从蛋白水平观察nephrin蛋白水平的表达。结果模型组大鼠镜下见肾小球体积增大,基底膜增厚(P<0.05)及系膜物质增多,足细胞与正常对照组比较明显减少(P<0.01),肾小球内可见散在炎细胞浸润。部分毛细血管腔受压变窄,部分肾小管上皮细胞胞浆疏松,轻度水肿。治疗组与模型组分别比较,肾小球基底膜未见明显增宽,足细胞数明显增加(P<0.05)。模型组大鼠血糖、24h尿蛋白、血肌酐水平明显升高,与对照组相比差异显著(P<0.05)。治疗组与模型组相比,上述生化指标均有所改善(P<0.05)。West-ern蛋白印迹结果表明,与正常组相比,模型组nephrin蛋白水平明显下降,经过厄贝沙坦干预后nephrin表达明显上调。结论厄贝沙坦能改善糖尿病肾病大鼠足细胞及肾脏的病理损害,显著减少糖尿病大鼠24h尿蛋白,上调nephrin的表达,具有一定的肾保护作用。     

络病理论在治疗糖尿病周围神经病变中的应用

糖尿病周围神经病变病程长,病理改变复杂,虚实互见,以痰瘀阻络为病机特点.治疗中应遵循络病理论,以指导对病机、立法的认识,须注意其治疗的特殊性,并灵活应用虫类药、藤类药、引经药等.     

冯志荣治疗慢性肾衰竭学术思想

总结了冯志荣主任医师治疗慢性肾衰竭学术思想。冯志荣主任医师认为慢性肾衰竭中医病机主要是脾肾虚损,湿热、瘀毒内结。治疗上注重顾护正气尤其是脾胃功能,重视湿热在疾病进展中的地位及活血化瘀对防治本病进程的作用。     

肾缺血再灌注损伤大鼠模型足细胞损伤及机制研究

目的探讨肾缺血再灌注损伤(renal ischemia reperfusion injury,IRI)大鼠模型足细胞的损伤,并对其损伤机制进行初步研究。方法雄性SD大鼠42只,随机分为正常组(n=5)、假手术组(n=5)和模型组(n=32),模型组下设IRI后1h、6h、12h、24h4个时间点,每个时间点8只大鼠。通过阻断大鼠双侧肾脏血流构建肾IRI模型。采用全自动生化分析仪检测各组大鼠的肾功能,流式细胞仪检测血活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化,糖原染色(periodic Acid Schiff,PAS)了解肾脏病理损害,通过透射电镜观察足细胞损伤情况。结果在IRI大鼠模型中,我们发现了明显的足细胞损伤现象,即足细胞减少,足突消失,基底膜增厚。同时观察到,随着缺血再灌注后时间的延长,大鼠肌酐、尿素氮水平逐渐升高,红细胞中ROS荧光强度阳性率逐渐升高,肾小管出现不同程度的管腔扩张、变性与坏死,间质炎性细胞浸润、充血水肿等。相关性分析发现,红细胞ROS荧光强度阳性率与肾小管损伤评分、肌酐、尿素氮水平成正相关,与足细胞计数呈负相关。结论肾IRI早期足细胞就可出现明显的损伤,同时伴有血ROS荧光强度阳性率明显上升;血ROS的变化可能参与了肾IRI足细胞损伤及病理损害的过程。     

血管紧张素转换酶抑制剂在糖尿病肾病治疗中的应用

糖尿病肾病(DN)是糖尿病主要微血管并发症之一,表现为微量白蛋白尿、持续蛋白尿、高血压以及肾小球滤过率 (GFR)下降.如缺乏有效治疗,GFR将进行性下降最终进展为终末期肾病(ESRD).