通心络对自发性高血压大鼠阻力血管结构的影响

目的观察通心络对自发性高血压大鼠(SHR)的血压、阻力血管结构的影响。方法30只12周龄雄性SHR大鼠,随机分成3组:(1)大剂量通心络组(n=10,通心络1·5g/kg·d);(2)小剂量通心络组(n=10,通心络0·5g/kg·d);(3)SHR空白对照组(n=10);(4)同龄雄性正常血压WKY大鼠对照组(n=10)。用无创法测定尾动脉收缩压及心率,至给药12周处死。测定肠系膜动脉分支第3级血管壁(中膜)/腔面积比(W/L)。结果与SHR对照组相比大小剂量通心络组,均能在一定程度上抑制SHR血压升高[184·3±15·1,163·2±9·8vs226·9±14·9)mm Hg,P<0·05]。通心络组治疗后能使SHR大鼠的肠系膜3级血管的血管腔/壁比(L/W)减少。结论通心络可以抑制SHR阻力血管肥厚。     

胰岛素对血管平滑肌细胞4E结合蛋白1和核糖体蛋白S6激酶磷酸化的刺激作用

目的研究胰岛素对血管平滑肌细胞(VSMC)蛋白质合成翻译过程的两个调节子,4E-结合蛋白1(4E-BP1)和核糖体蛋白S6激酶,磷酸化的调节作用及其生物学意义。方法培养大鼠胸主动脉VSMC。用3H-亮氨酸和3H-TdR掺入法分别测定蛋白质合成和DNA合成;免疫印迹法检测4E-BP1和核糖体蛋白S6激酶的磷酸化。结果与对照相比,100nmol/L胰岛素显著增加了VSMC的3H-亮氨酸和3H-TdR掺入。同样浓度的胰岛素作用于VSMC,可以诱导4E-BP1和核糖体蛋白S6激酶发生磷酸化。二者的磷酸化分别于胰岛素刺激后,30min和10min达高峰。结论胰岛素可以刺激VSMC的4E-BP1和核糖体蛋白S6激酶发生磷酸化,这可能是胰岛素发挥促进VSMC生长作用的机制。     

雌激素对SD大鼠肾小球硬化的影响

目的探讨雌激素替代治疗对SD大鼠肾小球硬化的影响。方法18只12周龄雌性SD大鼠随机分为3组：(1)去卵巢组(简称Ovx组)；(2)去卵巢 雌激素组(简称Ovx E2组)；(3)假手术组(简称Control组)。自由取食与饮水。检测手术前，3月后再次测量血压后处死，检测血清雌二醇浓度、电镜下观察肾脏皮质超微结构的变化。结果(1)去卵巢组的SD大鼠血清雌二醇水平明显低于假手术组，雌激素替代治疗后血清雌激素浓度明显升高，与假手术组相比没有明显差别；(2)卵巢切除前3组血压之间没有明显的差别。3月后，SD大鼠去卵巢组血压明显高于手术前及假手术组，雌激素替代治疗后血压降低，与假手术组没有明显的差别；(3)电镜下肾脏超微结构的变化：假手术组大鼠肾脏皮质电镜检查未见异常；去卵巢组大鼠出现肾小球硬化的表现；雌激素替代治疗后与去卵巢组比较超微结构没有明显的改善。结论SD大鼠去卵巢后血压升高，给予雌激素替代治疗后可抑制血压升高；SD大鼠去卵巢后，肾脏出现纤维化的病理改变，雌激素替代治疗后不能抑制肾小球纤维化的进程。     

不同抗高血压药物对自发性高血压大鼠左心室肥厚及心钠素mRNA表达的影响

探讨抗高血压药物对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）左心室肥厚与心钠素（ＡＮＰ）ｍＲＮＡ表达的影响。方法成年（１６周龄）雄性ＳＨＲ测定收缩压后随机分为３组，分别给予卡托普利（１００ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１），双氢克尿塞（１００ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１），普萘洛尔（４０ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１）治疗，共１２周，年龄、性别及数量配对的正常血压的ＷＫＹ及未治疗ＳＨＲ作为对照组。治疗结束时测体重、收缩压。动物断头处死，取左心室称重后，采用异硫氰酸胍一步法提取组织总ＲＮＡ，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交法检测ＡＮＰｍＲＮＡ相对表达量。结果治疗组动物收缩压及左心室重／体重比均明显低于未治疗ＳＨＲ组。卡托普利与普萘洛尔明显抑制心钠素基因的表达，双氢克尿塞对心钠素基因的表达影响较小。结论不同抗高血压治疗在降低血压和逆转左心室肥厚的同时也不同程度地抑制左心室心钠素基因的表达，利尿剂对心钠素表达的影响较小。     

HMG-CoA还原酶抑制剂对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

探讨羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及其机制。培养自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞,应用不同浓度HMG－CoA还原酶抑制剂洛伐他汀,辛伐他汀和氟伐他汀及血管紧张素Ⅱ,甲羟戊酸等干预后,进行细胞计数和^3H-TdR掺入率测定。结果发现,洛伐他汀,辛伐他汀和氟伐他汀均呈浓度依赖性抑制小牛血清和血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞数和^3H-TdR掺入率增加;但以氟伐他汀的抑制作用最大,辛伐他汀次之,洛伐他汀最小,10^-3mol/L甲羟戊酸几乎完全逆转洛伐他汀,辛伐他汀和氟伐他汀对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。提示此3种HMG－CoA还原酶抑制剂均能高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖,但作用并不完全相同;甲羟戊酸代谢途径可能参与血管平滑肌细胞增殖过程。     

大鼠核因子-KB反义RNA腺病毒载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达

目的:构建表达大鼠核因子κB(NF- κB ,p6 5 )反义RNA的重组腺病毒,并测定受染血管平滑肌细胞(VSMCs)中NF -κB基因的表达变化。方法:从自发性高血压大鼠(spontaneouslyhypertensiverat,SHR)的VSMCs中提取总RNA ,经RT PCR方法获得含全部编码序列的NF κB (p6 5 )cDNA片段(16 5 3bp) ,用TA克隆技术插入pMD18 T载体,构建pMD18 T/16 5 3重组质粒,并经酶切和DNA测序鉴定。以该质粒为模板,经PCR获得NF κB(p6 5 ) 3’端2 6 9bp片段,逆向插入pcDNA3.1( )真核表达载体并置于CMV启动子下。由此构建的pcDNA3.1( ) /2 6 9质粒含有NF κB(p6 5 )的2 6 9bp反义RNA完整表达框。随后将该表达框克隆到入门载体pENTR4 ,构建重组质粒pENTR4 /CMV/2 6 9。使用同源重组方式在体外将该表达框重组到腺病毒载体pAd/PL DEST ,最终得到重组腺病毒质粒pAd/CMV/2 6 9。线性化的重组腺病毒质粒转染2 93细胞后产生的重组腺病毒颗粒用于VSMCs的感染。WesternBlot测定感染前后VSMCs中NF- κB(p6 5 )表达的变化情况。结果:构建的pMD18 T/16 5 3重组质粒经过序列测定,证实其包含大鼠NF κB(p6 5 )基因的16 5 3bp片断;pcDNA3.1( ) /2 6 9、pENTR4 /CMV/2 6 9、pAd/CMV/2 6 9等重组质粒经内切酶消化或PCR等方法鉴定无误;线性化的pAd/CMV     

去卵巢SHR大鼠血压、血管结构及血脂的变化

用尾袖法测大鼠尾动脉血压后行卵巢切除手术 ,三个月后断头取血放免法测定血浆中 Ang 含量 ,化学发光法测定血浆中雌二醇的浓度 ,氧化酶法测定总胆固醇、甘油三酯 ,直接测定法测定高密度脂蛋白 ,计算机图像分析仪摄像求积法测定肠系膜动脉壁 /腔面积比 (W/ L)。结果 :去卵巢大鼠血压比对照组明显升高(187.8± 7.8vs174 .3± 7.5 mm Hg,P<0 .0 5 ) ,血清雌二醇含量显著低于正常对照组 (2 2 3.6 6± 2 9.79vs4 75 .37± 31.10 ,P<0 .0 5 ) ,血浆中的 Ang 水平高于正常对照组 (476 .80± 2 6 .4 7vs 133.2 0± 6 4 .5 0 ,P<0 .0 5 ) ,全心…     

新西兰兔髂动脉血管球囊导管损伤后内膜肥厚模型的建立

目的 探讨兔髂动脉急性损伤后，血清中内皮素、血栓素A2和前列环素水平的变化及血管内膜的改变。方法 12只新西兰大耳白兔，行右髂动脉球囊导管内膜剥脱术，术前3h及3d放射免疫法测定血清中内皮素、血栓素A2和前列环素浓度，两个月后取髂动脉测定血管内膜变化。结果 兔髂动脉务后血清内皮素即明显增加，血清中血栓素A2浓度明显升高，前列环素水平则显著下降，血管内膜明显增厚，管腔狭窄，腔壁比（wall/lumen)显著低于对侧髂动脉。结论 髂动脉急性损伤后内皮素和血栓素A2的升高、前列环素的水平降低及血管内膜明显增厚，这可能导致血管损伤后血栓形成和管腔的狭窄。