胰蛋白酶抑制剂对人肝癌细胞SK－HEP-1迁移和侵袭的影响

目的 观察尿胰蛋白酶抑制剂(UTI)对人肝癌细胞株SK-HEP-1迁移和侵袭等肿瘤生物学特性的影响.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测UTI对SK-HEP-1细胞增殖的影响;Transwell法检测不同浓度UTI对细胞迁移和侵袭能力的作用;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测不同浓度UTI作用后,尿激酶型纤溶酶原激活物(UPA)的mRNA和蛋白表达.结果 UTI组对SK-HEP-1细胞的增殖无影响(P＞0.05);与对照组比较,不同浓度的UTI组均能抑制人肝癌细胞SK-HEP-1的体外迁移和侵袭能力,且呈剂量效应关系,差异有统计学意义(P＜0.05);不同浓度的UTI组中SK-HEP-1细胞UPA的mRNA和蛋白表达均明显下降,且呈剂量依赖性,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 UTI能抑制人肝癌细胞SK-HEP-1迁移与侵袭,其机制可能与UTI抑制SK-HEP-1细胞UPA表达有关.     

不同浓度丁酸钠诱导未成熟树突状细胞分化的免疫学功能比较

 目的 探讨不同浓度丁酸钠诱导对于体外培养的树突状细胞（dendritic cells, DC）免疫刺激活性的影响。方法 通过重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人重组白细胞介素4（IL-4）体外诱导的人单个核细胞来源的DC,按照0.5、0.75、1、1.25、1.5 mmol·L-15种浓度丁酸钠体外诱导分化,并分别以流式细胞仪,FITC-dxtran内吞检测、MLR、ELISA法检测DC的凋亡率、表面标志、内吞能力、刺激淋巴细胞增殖能力和IL-10、IL-12、INF-γ分泌的变化。结果 1.25、1.5 mmol·L-1丁酸钠有较高的细胞毒性。0.5、0.75、1 mmol·L-1丁酸钠均可抑制DC表面成熟表型的表达。其中以1.0 mmol·L-1丁酸钠诱导下DC不成熟表型表达效果最稳定。虽然不同浓度丁酸钠诱导下的DC内吞能力无显著差异（P>0.05）,但1.0 mmol·L-1丁酸钠与0.5、0.75 mmol·L-1丁酸钠相比较其IL-10分泌量（3.29±0.21）最大,抑制淋巴细胞增殖能力（1.53±1.04）最强（P<0.05）。结论 1.0 mmol·L-1丁酸钠是诱导DC稳定不成熟状态的最佳浓度。     

多种黏附因子基因mRNA在原发性肝癌的表达

目的　探讨多种黏附因子基因在原发性肝癌种的表达及它们之间的关系。方法　取64例患者标本 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测肝癌黏附因子的基因表达情况。结果　(1)CD44与其他黏附分子表达率的差异比较有统计学意义 (P <0 .0 5 )。 (2 )CD44与E Cadherin、β1的表达量比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。(3 )各黏附分子间基因表达的相关性显示 :E Cadherin与CD44的表达正相关 ,与ICAM 1,α5的表达负相关 ;ICAM 1与α5,β1的表达正相关 ,与E Cad herin与CD44的表达负相关 ;CD44与E Cadherin的表达正相关 ,与ICAM 1,α5的表达负相关 ;α5与ICAM 1、β1的表达量正相关 ,与E Cadherin、CD44的表达负相关 ;β1与ICAM 1、α5表达正相关。结论　在肝癌黏附分子的基因mRNA的表达存在明显的差异 ,CD44表达缺失率高 ,且各黏附分子的表达相关。     

扭曲肉芝甲酯对人结肠癌LoVo细胞生长的抑制作用及其机制

目的 探讨扭曲肉芝甲酷抗结肠癌LoVo细胞增殖活性及其机制.方法 将LoVo细胞随机分为对照组和处理组(10、30、50μmol/L 3个亚组).对扭曲肉芝甲酯处理后LoVo细胞凋亡率、细胞周期、凋亡蛋白表达的改变进行定量分析.结果 经10、30、50 μmol/L扭曲肉芝甲酯处理24h后,LoVo细胞凋亡率分别为(2.32±0.93)％、(11.03±0.14)％和(16.29±1.98)％,对照组凋亡率为(2.09±0.97)％,而50 μmol/L扭曲肉芝甲酯处理0、6、12、24h后凋亡率分别为(2.67±0.97)％、(5.08±1.03)％、(5.04±0.83)％和(13.50±1.16)％(P＜0.05).荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡性改变;扭曲肉芝甲酯在0、10、50及100 μmol/L时将LoVo细胞抑制在G2/M期(9.53±3.97)％、(10.26±1.89)％、(11.36±2.56)％、(15.39±1.56)％ (P ＜0.05),该期的比例逐渐增高;Western blot法结果显示扭曲肉芝甲酯处理后结肠癌LoVo细胞的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶( Caspase)-8、Caspase-3表达升高.结论 扭曲肉芝甲酯以浓度依赖性和时间依赖性的方式抑制结肠癌LoVo细胞增殖,抑制细胞周期G2/M期,通过Caspase-8/Caspase-3来诱导细胞凋亡.     

蛋白酪氨酸磷酸酶-3对结肠癌细胞表皮生长因子相关信号通路的调节

【摘要】〓目的〓观察蛋白酪氨酸磷酸酶-3(PRL-3)在结肠癌LoVo细胞中对表皮生长因子(EGFR)相关信号通路的调节作用。方法〓转染PRL-3的LoVo细胞(以下简称LoVo-P)及对照组LoVo细胞(以下简称LoVo-C)48 h后,通过Western blot检测LoVo细胞PRL-3蛋白表达,并检测EGFR及相关信号MEK-ERK通路蛋白p-MEK1/2,p-Erk1/2,p-Msk1/2的表达。结果〓Western-Blot检测发现高表达PRL-3的LoVo细胞能够激活EGFR磷酸化水平,蛋白灰度分析显示其表达增多72.3%(P<0.01)。并且转染PRL-3后LoVo细胞的MEK-ERK通道被激活。结论〓PRL-3通过激活细胞表皮生长因子磷酸化参与表皮生长因子相关信号通路的调节。     

雌激素受体α上调前列腺癌细胞株LNCaP中L-Plastin启动子转录活性研究

目的鉴定雌激素受体在L-Plastin启动子上的结合位点，进一步阐明雌激素受体在激素依赖型前列腺癌中的作用机制。方法利用TFSEARCH软件分析L-Plastin启动子的序列，寻找可能调控L-Plastin表达的雌激素受体结合位点，利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子，检测切除该片段序列后荧光素酶活性，并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实雌激素受体是否结合于该位点，研究雌激素受体在激素依赖型前列腺癌中调控L-Plastin表达的作用。结果TF SEARCH软件分析表明，在L-Plastin启动子上距转录起始点-85～-70bp处，含有雌激素受体结合位点ATTTCACTGTGACCT，删除该结合位点后L-Plastin启动子荧光素酶活性明显下降。凝胶滞后实验和超滞后实验表明雌激素受体α是结合于该位点的转录因子。结论雌激素受体α具有促进L-plastin在激素依赖型前列腺癌中表达的作用。     

突变型β-连环蛋白基因对肝细胞增殖的影响

目的:探讨突变型β-连环蛋白基因对肝细胞增殖的影响。方法:用阳离子脂质体lipofectamine将突变型β-连环蛋白基因导入小鼠肝细胞系AML12, 建立AML12S33Y细胞系。用流式细胞仪和细胞计数比较这两种细胞的生长情况;比较这两种细胞在软琼脂中形成的克隆以及在免疫缺陷小鼠体内的成瘤情况。结果:AML12细胞增殖明显快于AML12S33Y细胞(P<0.01), 提示突变型β-连环蛋白能促进肝细胞的增殖。4周后AML12S33Y细胞在软琼脂中可形成小克隆, 但不能在免疫缺陷小鼠皮下形成肿瘤。结论:突变型β-连环蛋白可以促进肝细胞增殖, 但无致瘤性。     

结直肠癌伴肝转移综合治疗83例临床分析

探讨结直肠癌肝转移的诊断与治疗并分析相关的预后因素。方法 我院2005年9月-2010年9月共收治113例结直肠癌肝转移患者,其中83例获得随访,并对其诊断和治疗的临床资料进行回顾性分析。结果 经肠镜、B超、CT、MRI可明确诊断结直肠癌肝转移;CEA、CA199、CA125同时检查是肿瘤转移与复发的重要标志物;治疗包括手术治疗、辅助化疗、超声介入治疗,肝动脉插管或门脉插管化疗。其中原发灶+肝转移灶切除术患者共38例,1、2、3、5 年生存率分别为71.1%、26.3%、21.1%、13.2%。平均生存时间30.9个月。单纯行原发灶切除患者共19例,1、2、3、5年生存率分别为36.8%、15.8%、0%、0%。平均生存时间13.3个月。非手术治疗患者共26例,1、2、3、5年生存率为7.69%、3.8%、0%、0% 结论 对结直肠癌肝转移患者,采取积极的以原发结、直肠癌切除+肝转移灶手术为主导,辅助化疗,介入治疗等相结合的个体化综合治疗、更有利于提高患者的生活质量,延长患者的生存时间。     

腹腔镜胃癌根治手术的护理配合

目的 总结腹腔镜胃癌根治手术的护理配合。方法 回顾性总结我院2010年11月至2011年11月124例腹腔镜胃癌根治手术术中护理配合的临床资料。结果 124例患者手术过程顺利,其中中转开腹5例,平均手术时间3.5小时;平均出血量170ml;术毕安返病房。本组患者术后无出血,无吻合口瘘,全部治愈出院。结论 对腹腔镜胃癌根治手术的术中护理配合,应充分做好术前准备,掌握手术步骤及配合要点,掌握腔镜器械的名称、性能、拆卸、安装和使用方法,严格遵守无瘤原则,密切关注手术进展是手术成功的关键。     

胰腺癌中磷酸酶和张力蛋白同源物基因及B7-H1蛋白的表达及其临床意义

目的 观察胰腺癌磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)蛋白和B7-H1蛋白的表达,探讨两者与胰腺癌肿瘤生物学特征的关系.方法 采用免疫组织化学ELPS法检测43例胰腺癌患者的组织标本和作为对照的5例非癌胰腺标本中PTEN和B7-H1蛋白的表达水平,分析其与临床和病理学特征的关系.结果 比较非癌胰腺组织,胰腺癌组织中PTEN蛋白表达显著降低,而B7-H1蛋白表达显著升高(P＜0.01),两者的表达还呈现显著负相关(r=-0.414,P＜0.01);两者的表达水平与肿瘤的分化程度、TNM分期、浆膜侵犯及淋巴结转移有关(P＜0.05),B7-H1表达水平还与年龄显著相关(P＜0.01);两者分别的表达水平与患者的预后均显著相关(P＜0.01),两者的联合表达水平与患者的预后相关(P＜0.05).结论 mN和B7-H1蛋白的表达水平与胰腺癌的发生、发展和预后密切相关.

Abstract：

Objective To investigate the probable correlation between the expressions of phosphatase and tensin homologue deleted on chromosometen (PTEN) and B7-H1 protein in pancreatic carcinoma and the biological behavior characteristics of tumors. Methods Forty-three patients were recruited who had undergone surgical resection for pancreatic carcinoma between 2002 and 2009. The PTEN and B7-H1 protein expressions in the tissue specimens of these 43 patients and 5 non-pancreatic carcinoma people' s pancreatic tissue specimens were evaluated by immunohistochemistry ELPS technique, and the clinical and pathological features of these specimens and the follow-up information were analyzed. Results PTEN expressions were significantly lower in pancreatic carcinoma tissues than in non-pancreatic carcinoma people' s pancreatic tissues but B7-H1 expressions were significantly higher ( P ＜ 0. 01 ). The expression of PTEN was negatively correlated to that of B7-H1 (r = -0.414 ,P ＜0. 01). PTEN and B7-H1 expressions correlated with the pathological grade and tumor-node-metastasis ( TNM ) stage, peripancreatic invasion, regional lymph node involvement,respectively (P＜0. 05). B7-H1 expressions also significantly correlated with the ages (P＜0. 01). Furthermore, PTEN and B7-H1 expressions showed significant prognostic effects (P＜0.01) and there are correlations existed between combined PTEN/B7-H1 expression and prognostic effects (P ＜0. 05). Conclusion The expression of PTEN and B7-H1 may be significantly correlated to the carcinogenesis,development and prognosis of pancreatic carcinoma.