中国27省(市、自治区)2009－2013年门诊腹泻病例诺如病毒流行特征分析

目的 了解我国门诊腹泻患者中诺如病毒的流行特征。方法 在国内27个省(市、自治区)173家医院的门/急诊中开展腹泻监测,收集腹泻病例临床和流行病学资料,同时采集病例粪便标本,送58家网络实验室采用RT-PCR检测诺如病毒,并分析2009－2013年不同地区、人群以及时间的诺如病毒检出率。结果 在34 031名腹泻监测病例中,有11.6%的病例检出诺如病毒。其中6～23月龄儿童和>45岁人群的检出率最高,分别为13.7%和12.4%。一年中以秋、冬季检出率较高;中温带和暖温带地区,诺如病毒在冬季检出率最高,分别为10.7%和11.6%;而亚热带地区,以秋季检出率最高(14.3%)。诺如病毒检出的主要型别为GⅡ组(89.9%)。结论 诺如病毒对我国各年龄组人群均有不同程度的影响,尤其在儿童和中老年门诊腹泻病例中较为常见,并呈现明显的季节性流行特征,且不同气候带地区的流行高峰存在差异。     

我国五十余年来传染病发病情况与防治的文献复习

传染性疾病是由各种病原体感染引起的,可在人与人、或人与动物之间通过接触相互传播的疾病[1].大部分传染病的病原体为微生物,小部分为寄生虫.很多传染病已被发现了几十年甚或几百年.     

庚型肝炎病毒在血液透析患者中感染情况及基因同源性分析

目的 探讨庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在维持性血液透析（ＨＤ）患者中的流行情况及感染相关因素。方法 应用套式逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测５０例ＨＤ患者血清ＨＧＶ ＲＮＡ，并分析其与透析时间、输血、肝功能损害及丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染的关系。结果 ＨＤ患者ＨＧＶ感染率达１４％，远高于正常对照人群。ＨＧＶ感染相关因素分析提示：随着透析时间的延长，输血次数的增加，ＨＧ     

乙型肝炎病毒DNA转染细胞的一种内参标准:真核细胞报告基因SEAP

目的 建立用真核细胞报告基因ＳＥＡＰ转染人肝癌细胞系及鸡肝癌细胞系（ＬＭＨ）的表达系统,供研究ＨＢＶ基因功能应用。方法 分别将带有分泌性碱性磷酸酶（ＳＥＡＰ）报告基因的ｐＢＣ１２／ＰＬ／ＳＥＡＰ及ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ转染Ｈｕｈ７、ＨｅｐＧ２及ＬＭＨ细胞,并用ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ与Ｓ基因区变异体的克隆ＨＢＶ ＤＮＡ共转染ＨｅｐＧ２细胞。培养后收取细胞培养液,用ＥＬ     

新型甲型H1N1流感68例临床分析

目的:探讨上海地区甲型H1N1流感确诊病例的临床特点.方法:分析2009年5月24日至7月1日上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心收治的甲型H1N1流感68例确诊病例的流行病学及临床资料.结果:68例甲型H1N1流感确诊病例的临床特点:(1)不同性别和各年龄段均可感染和发病,但主要见于青少年,女性患者偏多.(2)首发症状多为发热.大多数为中低热,发热持续时间为1～4 d;主要症状包括发热(98.5%)、咳嗽(83.8%)、咽痛(52.9%);主要体征为咽部充血(95.6%)、扁桃体肿大(54.4%);少数患者可出现病毒性肺炎.(3)血清C反应蛋白升高和前白蛋白下降比较常见.(4)在奥司他韦治疗的前提下,患者病毒转阴时间1～7 d,中位时间4 d.结论:此次甲型H1N1流感病毒具有很强的传染性,能在人与人之间传播,并在不同国家扩散.该次流行期间的感染者大多表现出轻微的症状,患者很快痊愈.     

中国人丙型肝炎病毒基因组3′端非编码区的研究

目的分析中国丙型肝炎病人ＨＣＶ基因组３′端非编码区（３′ＮＣＲ）,以促进对ＨＣＶ基因组复制机制的研究。方法采用两种方法,从上海地区感染ＨＣＶ的病人血清中,扩增获得ＨＣＶ基因组３′端非编码区：一是用套式ＰＣＲ直接扩增,二是先分别获得ＨＣＶ３′ＮＣＲ的前半部分和后半部分,再将两片段进行融合ＰＣＲ。ＰＣＲ产物进行测序后作同源性分析。在此基础上,建立了针对３′端非编码区的ＲＴＰＣＲ方法,并与基于５′端非编码区的ＲＴＰＣＲ方法检测ＨＣＶＲＮＡ的特异性和灵敏度比较。结果序列分析表明,中国丙型肝炎病人ＨＣＶ基因组３′非编码区由４部分组成：高度变异区、Ｐｏｌｙ（Ｕ）区、Ｐｏｌｙ（Ｕ／Ｃ）区和９８碱基区。同源性分析显示,９８碱基区在不同分离株间高度保守并与国外报道株一致,而Ｐｏｌｙ（ＵＵＣ）区存在较大差异。３′端非编码区和５′非编码区ＲＴＰＣＲ检测血清ＨＣＶＲＮＡ有较高符合率（９５％）。结论ＨＣＶ基因组３′端非编码区的３′末端（９８碱基）,在不同分离株间的高度保守性提示,该区在ＨＣＶ基因复制中起重要作用。基于３′非编码区的ＲＴＰＣＲ方法,将有助于ＨＣＶ感染的诊断。     

丙型肝炎病毒全长cDNA模板的构建及鉴定

目的 构建具有功能的丙型肝炎病毒(HCV)全长cDNA克隆。方法 应用长模板RTPCR法扩增1份上海地区HCV感染者血清的RNA(基因型为1b)，分段扩增、融合拼接成9．2kb的基因片段，克隆人含有HCV基因两端非编码区序列的载体作为模板。为检测此过程是否发生对特定变异株的选择，分析4个独立克隆的HVRl序列。对原核细胞中表达的HCV核心蛋白、NS3蛋白酶及解旋酶，以蛋白印迹实验确证其免疫反应性。并构建NS3／4A-SEAP表达系统检验NS3的蛋白酶活性。结果 获得丙型肝炎病毒全长cDNA模板。不同克隆间HVR1序列存在较大差异，提示长模板RT-PCR所制备HCVcDNA具有HCV基因准种(quasispecies)的特性。该模板编码基因在原核细胞内得到高效表达，并具有良好的免疫反应性。在NS3／4A-SEAP表达系统内，NS3可切割、释放其下游的SEAP，具有蛋白酶活性。结论 本工作为构建全长功能性HCV cDNA模板及感染性克隆奠定了基础。     

嗜肝DNA病毒核衣壳装配的研究进展

嗜肝 DNA 病毒核衣壳装配是病毒复制周期的一个中心环节,需要3种病毒成分(前基因组 RNA、核心蛋白、多聚酶蛋白)特异和有次序地相互作用。研究表明:核心蛋白的氨基端具有自我组装核壳的能力,而羧基端具有结合核酸、稳定核壳的作用;多聚酶蛋白的4个区域均为介导前基因组 RNA 包装所需:前基因组 RNA 上存在的包装信号决定其选择性包装。本文最后讨论了嗜肝 DNA 病毒核衣壳装配研究的潜在应用价值。