关节镜下复位固定治疗陈旧性胫骨髁间隆突撕脱性骨折

目的 探讨关节镜下复位固定治疗陈旧性胫骨髁间隆突撕脱性骨折的疗效及影响疗效的因素.方法 2000年1月至2006年12月,对23例有明显临床症状的陈旧性胫骨髁间隆突撕脱性骨折患者行关节镜下骨折端新鲜化、复位、内固定治疗.骨折至手术时间:3个月～8年,平均5.8个月.骨折按Meyers和McKeever分类:Ⅱ型9例,Ⅲ型14例.膝关节功能采用Lysholm评分标准评定:术前为(65.7±3.2)分.术后3周后在支具保护下被动伸屈膝关节,术后4周主动锻炼,并下地部分负重行走.术后6周拆除支具.结果 23例患者术后获平均14个月(6～36个月)随访,X线片示骨折复位满意,愈合良好.膝关节稳定,前抽屉试验和Lachman试验阴性,未发生骨折不愈合和关节僵硬等并发症.术后Lysholm膝关节功能评分为(94.6±2.6)分,手术前、后比较差异有统计学意义(t=2.764,P:0.0082):其中优17例,良5例,可1例,优良率为95.7%.术前9例膝关节有不同程度伸直受限者,随访时除1例仍有50°申膝受限外,其余8例患者均恢复正常.结论 关节镜下复位固定治疗陈旧性胫骨髁间隆突撕脱性骨折,具有骨折对位良好、内固定日J靠等优点,可有效重建膝关节的稳定,改善膝关节功能.     

膝关节骨关节炎患者与正常人群的血清差异表达蛋白

【目的】用蛋白组学方法,通过对膝关节骨关节炎患者及正常人群血清蛋白的比较,寻找差异表达蛋白并探讨其与骨关节炎致病机理的关系。【方法】选取2007年10月到12月10例在中山大学附属第三医院骨科住院治疗的膝关节骨关节炎患者为实验组;10名性别相同,年龄、身体质量指数值相约的健康志愿者为对照组,分析2组双向电泳结果,并对差异表达蛋白进行质谱鉴定。【结果】通过双向电泳图普比较发现7个差异表达蛋白,其中6个在关节炎组中呈低表达,1个呈高表达。经质谱鉴定为分别为：6个低表达蛋白分别为对氧磷酶1、对氧磷酶3、d-1-微球蛋白／bikunin前体蛋白、载脂蛋白M、免疫球蛋白轻链、四连接素,高表达蛋白为载脂蛋白LI。【结论】膝关节骨关节炎血清表达差异蛋白：对氧磷酶1、对氧磷酶3、d-1-微球蛋白／bikunin前体蛋白、载脂蛋白M、免疫球蛋白轻链、四连接素、载脂蛋白u可能与骨关节炎的发病或病情进展具有-定的相关性。     

富血小板血浆对人骨髓间充质干细胞成骨诱导的影响*

背景：富血小板血浆是经过特殊方法提取的血小板含量丰富的血浆,相较普通血清含有更丰富的细胞因子,如血小板衍生因子、转化生长因子β、血管内皮生长因子等。 目的：观察富血小板血浆对成骨诱导人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响,拟探讨促进人骨髓间充质干细胞的增殖与诱导成骨细胞的培养方法。 设计、时间及地点：配对样本对比观察,于2007-03/2008-03在中山大学组织工程实验室完成。 对象：18名健康志愿者,男12名,女6名,平均年龄27.5岁。随机分为3组：富血小板血浆组、胎牛血清组、无血清对照组,每组6人。 方法：抽取18名健康志愿者自体外周静脉血获取富血小板血浆。采用密度梯度离心法获取健康志愿者骨髓间充质干细胞,常规原代培养,传代诱导培养时根据分组情况,分别采用10%AB型血清、10%自体富血小板血浆与无血清,配比高糖DMEM培养基、50 mg/L抗坏血酸、10-8 mol/L地塞米松、10-3 mol/L β-甘油磷酸钠。 主要观察指标：倒置相差显微镜、扫描电镜观察各组细胞形态,MTT法检测细胞增殖情况,细胞碱性磷酸酶活性、骨钙素水平。 结果：3组细胞均在接种后12~24 h开始贴壁,并由圆形逐步变化为梭型、多角形、有多个突起的不规则形状等。细胞传代诱导培养后,富血小板血浆组与胎牛血清组细胞生长迅速,明显快于无血清对照组（P < 0.05）。从传代培养第2、4、6代的细胞生长看,随着培养时间的延长富血小板血浆组细胞增殖明显快于胎牛血清组。３组细胞碱性磷酸酶活性与骨钙素随诱导时间的延长而增高,培养第3,6,9,12天胎牛血清组碱性磷酸酶活性较富血小板血浆组低,培养第15天两组无明显差异。培养第3,6,9天富血小板血浆组细胞内骨钙素含量与胎牛血清组无明显差别,12 d后明显高于胎牛血清组。无血清对照组碱性磷酸酶活性及骨钙素含量较富血小板血浆组变化程度明显减小,并且各时间点碱性磷酸酶活性与骨钙素含量均低于富血小板血浆组（P < 0.01）。 结论：自体富血小板血浆能够有效加快人骨髓间充质干细胞的增殖,并能有效促进诱导培养的人骨髓间充质干细胞成骨特性表达。     

rAAV2-hTGF-β1转染犬MSCs诱导分化为软骨细胞的研究

目的 探讨rAAV2-hTGF-β1体外转染犬MSCs定向分化为软骨细胞的可行性.方法 应用密度梯度离心法及贴壁筛选法分离培养犬MSCs,倒置显微镜及Giemsa染色观察细胞形态,流式细胞技术鉴定其表面标记物.取第三代MSCs,分别以感染复数(MOI)为1×105病毒基因数/细胞v.g./cell)、5×105v.g./cell的rAAV2-hTGF-β1进行转染.培养后定期取各组细胞进行相关检测.Western blot检测hTGF-β1的表达,ELISA法测定hTGF-β1的含量,RT-PCR检测Ⅱ型胶原、Aggrecan mRNA的表达,免疫细胞化学法检测Ⅱ型胶原的表达.结果 原代及传代培养的MSCs呈梭形外观,具有较强的增殖能力.细胞表面抗原CD29、CD44、CD105表达阳性,CD34、CD45表达阴性.rAAV2-hTGF-β1转染MSCs后,Western blot法检测到目的 蛋白hTGF-β1稳定表达:ELISA法检测转染组MSCs培养上清液中的hTGF-β1表达,且随时间的延长,各组hTGF-β1浓度逐渐增加,MOI 5×105组表达量明显高于MOI 1×105组(P<0.01);RT-PCR检测到各转染组Ⅱ型胶原、Aggrecan mRNA表达,免疫细胞化学法检测转染组细胞Ⅱ型胶原呈阳性表达,且高MOI值组表达强度明显高于低MOI值组.结论 rAAV2-hTGF-β1转染犬MSCs后可定向分化为软骨细胞,作为软骨组织工程的种子细胞是可行的.     

Ⅰ期双侧全髋关节置换治疗系统性红斑狼疮合并股骨头坏死的早中期疗效

目的分析Ⅰ期双侧全髋关节置换（THA）治疗系统性红斑狼疮（SLE）合并中晚期股骨头缺血性坏死（ANFH）的早中期疗效。方法中山大学附属第三医院骨科对17例SLE合并中晚期ANFH患者均行Ⅰ期双侧THA，按照ARCO分期分为ⅢB期7髋、ⅢC期12髋，Ⅳ期15髋，结合患者年龄与骨质条件选择股骨假体不同的固定方式。采用Harris评分结合SF-36评分方法进行疗效比较与随访，平均随访时间28个月。结果术后2例切口延迟愈合，1例假体脱位，1例大腿痛10月，1例急性肾衰，均经治疗后好转。6例经彩超发现无症状下肢深静脉血栓，无肺栓塞、假体深部感染发生，无肾上腺皮质危象表现，随访期间髋关节疼痛及活动度明显改善，无假体松动。Harris髋关节功能评分（平均91．6分）与术前（平均42．6分）相比差异有统计学意义（P〈0．01），SF-36评分（平均84．5分）与术前（平均51．4分）相比差异有统计学意义（P〈0．01）；不同ARCO分期病例术后Harris评分差异无统计学意义（P〉0．05）；不同假体固定方式术后Harris髋关节功能评分、SF-36评分均差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Ⅰ期双侧人工髋关节置换术对SLE合并中晚期ANFH的早中期疗效良好，应严格掌握手术适应证和手术时机，加强围手术期处理，选择合适的假体固定方式。     

膝关节软骨退行性变的声像学表现

目的 探讨膝关节软骨不同时期退行性变（退变）的声像学表现，并设立相应的超声诊断标准。 方法 对行关节镜手术的9个膝关节用超声术中经皮实时观察，对关节置换术的2个膝关节标本（置生理盐水中）进行离体观察。 总结 正常膝关节软骨及软骨Ⅰ～Ⅳ期退变的超声表现。 结果 正常膝关节软骨表现为高-低-高“夹心饼断面”样回声带。膝关节软骨Ⅰ期退变通常改变很不明显。Ⅰ期退变软骨表面毛糙，轻度变薄或局部隆起。Ⅲ期退变软骨局部明显变薄。Ⅳ期退变软骨完全缺失。 结论 膝关节软骨除Ⅰ期退变外，其余各期关节软骨退变在超声上均有特定表现。     

轴向椎体间融合术微创治疗腰骶椎失稳症

目的 评价轴向椎体间融合术(AxiaLIF)微创手术治疗L5/S1失稳症的临床有效性和安全性. 方法 采用尾骨尖旁2 cm切口,在G臂X线透视下,经骶椎前方建立工作通道,骨性通道入口在S1～2之间,用特殊工具经轴向的工作通道切除椎间盘、植骨,最后拧入长度合适的轴向固定螺栓.治疗12例L5/S1失稳症,观察手术时间、术中出血量、围手术期并发症以及随访观察椎间融合情况,并采用视觉模拟评分(VAS)和Oswestry功能障碍指数(ODI)评价手术前后患者症状改善情况. 结果 手术时间30～70min,术中出血50～90 ml,无并发症发生.所有患者于术后第2天戴腰围活动.随访时间3～9个月,VAS和ODI分别由术前6.66±0.89和61.18±7.93降至术后3个月2.08±0.79和21.51±3.63,差异有统计学意义.术后融合情况:1例于术后6个月完全融合,10例部分融合,1例尚未见融合. 结论 轴向椎体间融合术手术创伤小,并发症少,术后恢复快,为L5/S1节段提供一个安全而微创的椎体间融合方式.     

胶原涂层聚羟基丁酸羟基戊酸酯体外构建组织工程半月板

目的观察Ⅰ型胶原涂层的聚羟基丁酸羟基戊酸酯（PHBV）对半月板纤维软骨细胞的吸附作用及对细胞生物学性状的影响，评价其作为半月板组织工程支架的可行性及价值。方法构建Ⅰ型胶原涂层的PHBV半月板假体，将体外培养的兔半月板纤维软骨细胞吸附于该支架上三维立体培养。通过相差倒置显微镜、组织学、扫描电镜及免疫组织化学检测支架对半月板纤维软骨细胞的表型、增殖及功能的影响。结果PHBV能制成具有一定力学强度的半月板假体。通过Ⅰ型胶原涂层后增强了其细胞吸附能力，半月板纤维软骨细胞在支架孔壁贴附良好。维持表型稳定，分泌胞外基质。结论Ⅰ型胶原涂层的PHBV支架细胞相容性良好，能按半月板的大小、形状制成有一定力学强度的半月板假体，是比较理想的半月板组织工程支架材料。     

踝关节骨折内固定术62例

踝关节骨折常见 ,有单踝 ,双踝 ,三踝骨折 ,或合并下胫腓联合分离 ,也有结构严重破坏的粉碎性骨折。我们于 1996～ 2 0 0 0年对 6 2例踝关节骨折患者作切开复位内固定术 ,取得满意效果 ,现总结报道如下。1　资料与方法1.1　一般资料　本组 6 2例 ,男 4 8例 ,女14例 ;年龄 16～ 72岁。内踝 18例 ,外踝13例 ,双踝 14例 ,三踝 8例 ,粉碎性骨折9例 ,15例合并下胫腓联合分离。1.2　治疗方法　硬膜外麻醉大腿充气止血带下 ,根据骨折部位 ,踝关节内、外或后内侧或踝关节前切口进行手术。复位后内外踝用螺钉或加压螺钉固定 ,后踝用螺钉固定 ,合并下…     

Study on chondrogenic differentiation of canine mesenchymal stem cells induced by Type 2 recombinant adeno-associated viral mediated transfer of hTGF-β1

Objective To investigate the potential application of human transforming growth factor-beta-1 (hTGF-β1) gene mediated by type 2 recombinant adeno-associated virus (rAAV2) vector inducing chondrogenic differentiation of canine mesenchymal stem cells (MSCs) in vitro. Methods Canine MSCs from bone marrow were isolated and cultured in vitro by density gradient centrifngation and adherence screening methods. The morphology of MSCs was observed by inverted phase contrast microscope and Giemsa stain. Flow eytometry was used to detect surface antigens of MSCs, The third generation of MSCs were transfected by rAAV2-hTGF-β1 with or without MOI of 1 ×105 v.g./cell or 5×105 v.g./cell. The expression of hTGF-β1 was detected by Western blot after 10 days, and TGF-β1 synthesis was determined by ELISA at 3, 6 and 9 day, respectively. After 2 weeks of culturing, mRNA expressions of type Ⅱ collagen and aggrecan were determined by RT-PCR and the collagen Ⅱ protein was detected by immunocytochemistry. Results The MSCs appeared to be morphologically spindle-shaped and showed active capability of proliferation both in primary and passage generations. Flow cytometry analysis indicated that MSCs were universally positive for CD29, CD44 and CD105, but negative for CD34 and CD45. TGF-β1 expression can be observed by Western blot after 10 days in two transfection groups, MOI of 5 × 105 group and MOI of 1× 105 group. With the extension of time, the contents of hTGF-β1 increased in the two groups detected by ELISA, while there was a significant difference between them two (P < 0.01). After 2 weeks of transfection of MSCs by rAAV2-hTGF-β1, the expression of collagen Ⅱ and Aggreacan mRNAs were positive. It also showed positive of collagen Ⅱ detected by immunocytochemistry. Conclusion Canine MSCs show chondrogenesis differentiation after induction by Type 2 rAAV mediated transfer of TGF-β1 gene. The process is a potential application for cartilage tissue engineering.