多色荧光原位杂交技术检测结直肠癌早期染色体改变的研究

目的 分析我国结直肠癌(CRC)及结直肠腺瘤染色体畸变情况,探讨通过多色荧光原位杂交(M-FISH)技术检测染色体变化,用于CRC早期诊断及评估腺瘤恶性变倾向的可行性和有效性.方法 选择7、8、12和20号染色体探针应用M-FISH技术检测161例患者的183份结直肠病变组织,包括65份腺瘤组织、19份癌旁腺瘤组织和99份腺癌组织.分析结直肠腺癌和腺瘤与临床病理参数之间的关系.结果 7、8、12和20号染色体在腺癌组织中有较高的增益畸变率,分别为82.1%(55/67)、70.1%(47/67)、60.9%(56/92)和72.8%(67/92);在癌旁腺瘤组织亦有较高的增益畸变率,分别为76.5%(13/17)、41.2%(7/17)、50%(9/18)和72.2%(13/18);7号和20号染色体增益畸变同时出现在同一个患者的腺癌与腺瘤标本中的频率较高.结论 7、8、12和20号染色体在腺癌及腺瘤组织中均存在较高的染色体数目畸变率;其中7号与20号染色体增益畸变有可能成为CRC早期预警标志.M-FISH技术检测可能有助于CRC的早期诊断.     

玻璃体内注射载HIF-1α shRNA质粒的PLGA纳米粒眼部转染效率

目的观察携带载缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）短发卡式小干扰RNA（shRNA）质粒（pshHIF-1α）的纳米粒转染眼部组织的可行性。方法应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物（PLGA）包载绿色荧光蛋白（GFP）表达的pshHIF-1α,制备纳米粒,检测其粒径、包封率、载药量及体外释放情况;将48只大鼠分为4组,每组12只（12只眼）,分别向玻璃体内注入10μL磷酸盐缓冲液（PBS）、空白纳米粒（1.89mg/mL）、裸质粒pshHIF-1α（0.02mg/mL）和pshHIF-1α纳米粒（1.89mg/mL）。分别在注药后3、7、14、28d观察纳米粒的眼内穿透性和基因转染情况。通过组织病理学检查,观察注射后第3天眼内组织结构的改变。结果纳米粒的载药率和包封率分别为1.06%和60.2%,平均粒径为284nm,体外释药达4周。体内实验显示,载pshHIF-1α纳米粒定向聚集于视网膜色素上皮（RPE）层,GFP表达时间持续达28d。组织病理学检查眼内未见明显炎性细胞浸润。结论纳米粒可向眼底递送质粒形式的DNA,是眼部基因治疗安全、有效的载体之一。     

FHIT基因在食管鳞癌中表达的变化及机制

目的探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）基因在食管鳞癌中表达的变化及可能机制。方法用微卫星分析方法观察了80例食管鳞癌中FHIT基因的缺失情况，并用RT—PCR方法分析了其中20例食管鳞癌FHITmRNA表达的变化。用免疫组化SABC法分析了另外65例食管鳞癌及对应癌旁组织FHIT蛋白表达。结果FHIT基因旁，侧微卫星杂合性丢失（LOH）在食管鳞癌频发；750o的病例FHIT mRNA表达下调且多发生于LOH的病例，但LOH发生与mRNA表达下调并不完全一致。FHIT蛋白在食管鳞癌和癌旁组织的表达并无显著差异。结论食管鳞癌中FHIT基因等位丢失是食管鳞癌FHIT基因表达失调的主要机制，FHIT基因在基因组水平和蛋白水平的改变并非完全一致。     

超声引导经皮微波治疗原发性肝癌的临床护理及近期疗效分析

目的 总结超声引导经皮微波治疗原发性肝癌的临床护理,评估临床护理对疗效的重要作用.方法 术前指导患者屏气训练,并对患者进行心理护理;术中积极配合医生,提高穿刺成功率,防止并发症发生;术后严密监测,做好发热、疼痛等不良反应的护理及营养护理.结果 随访20例患者,16例存活,4例死亡,术后患者AFP明显下降或正常,Child分级改善,瘤体减少、凝固.结论 超声引导经皮微波治疗原发性肝癌是一种有效的治疗方法,做好治疗前后的护理,对提高临床疗效有重要意义.     

在体生物发光成像术观察骨髓来源细胞参与脉络膜新生血管的形成

目的 评价在体生物发光成像术(bioluminescence imaging,BLI)监测小鼠体内骨髓来源细胞(bone marrow-derived cells,BMCs)参与脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成过程的可行性,为BLI研究CNV发生机制奠定基础.方法 将荧光素酶-绿色荧光蛋白(Fluc-GFP)双转基因小鼠的骨髓移植到野生型C57小鼠,将嵌合度＞85％的嵌合体小鼠分为两组:实验组利用532 nm激光建立小鼠CNV模型,对照组不行CNV建模.于CNV建模后1d、3d、7d、14 d、21d和28 d,利用小动物成像系统对两组小鼠进行BLI观察,高灵敏度CCD采集图像,活体成像软件系统对选取的眼部光学统计区域进行分析.结果 建模后第1天,实验组小鼠即有大量BMCs趋化至CNV部位,前3d趋化至CNV部位的BMCs数量增长最快,第7天病变部位BMCs数量达峰值,第14天病变部位BMCs数量降至最低,随后稍有增加,第28天以后保持稳定.对照组小鼠在相应时间点眼内BMCs数量较为稳定,明显低于实验组小鼠(P＜0.05).结论 利用BLI可以实时动态示踪体内BMCs向CNV部位的趋化及其在CNV内转归,无创、便捷,为研究CNV发生机制提供了一种新的客观的辅助方法.     

绷带镜在翼状胬肉切除联合结膜瓣移植术后的应用

目的:探讨绷带镜在翼状胬肉切除联合结膜瓣移植术后应用的临床效果.方法:前瞻、随机、对照性病例研究.收集2015-01/2016-01在我院诊断为原发性翼状胬肉拟接受翼状胬肉切除联合结膜瓣移植术患者共110例110眼,奇数者为绷带镜组(在翼状胬肉切除联合结膜瓣移植术后给予配戴绷带镜),偶数组为对照组(仅行翼状胬肉切除联合结膜瓣移植术).术后1、3、7d时采用VAS视觉模拟量表法评估术后疼痛程度,并观察术后患者角膜刺激症状;术后3d采用角膜荧光染色法检测角膜上皮修复情况;随访患者至术后1a,统计翼状胬肉复发情况.结果:术后1d绷带镜组疼痛评分(4.13±2.06分)较对照组(5.80±1.93分)明显减轻(t=4.391,P<0.001);术后3d绷带镜组疼痛评分(2.09±1.36分)较对照组(3.65±1.65分)明显减轻(t=5.422,P<0.001);术后7d绷带镜组和对照组疼痛评分无统计学差异(t=1.295,P=0.198).术后1d和3d时,绷带镜组刺激症状均较对照组减轻(P<0.05),而术后7d时绷带镜组与对照组比较无统计学差异(P=0.052).术后3d时角膜荧光染色面积,绷带镜组(0.33±0.37mm2)较对照组(2.73±2.21mm2)明显减小(t=7.921,P<0.001).术后1a翼状胬肉复发率,绷带镜组与对照组比较无统计学差异(P=1.000).结论:翼状胬肉切除联合结膜瓣移植术后配戴角膜绷带镜可以有效减轻患者术后疼痛和刺激症状,加速角膜上皮愈合,明显提高患者术后舒适度.     

多色荧光原位杂交技术检测结直肠癌早期染色体改变的研究

目的分析我国结直肠癌（CRC）及结直肠腺瘤染色体畸变情况,探讨通过多色荧光原位杂交（M—FISH）技术检测染色体变化,用于CRC早期诊断及评估腺瘤恶性变倾向的可行性和有效性。方法选择7、8、12和20号染色体探针应用M—FISH技术检测161例患者的183份结直肠病变组织,包括65份腺瘤组织、19份癌旁腺瘤组织和99份腺癌组织。分析结直肠腺癌和腺瘤与临床病理参数之间的关系。结果7、8、12和20号染色体在腺癌组织中有较高的增益畸变率,分别为82．1％（55／67）、70．1％（47／67）、60．9％（56／92）和72．8％（67／92）;在癌旁腺瘤组织亦有较高的增益畸变率,分别为76．5％（13／17）、41．2％（7／17）、50％（9／18）和72．2％（13／18）;7号和20号染色体增益畸变同时出现在同一个患者的腺癌与腺瘤标本中的频率较高。结论7、8、12和20号染色体在腺癌及腺瘤组织中均存在较高的染色体数目畸变率;其中7号与20号染色体增益畸变有可能成为CRC早期预警标志。M—FISH技术检测可能有助于CRC的早期诊断。     

飞秒激光微小切口角膜基质透镜切除术和飞秒激光LASIK近视治疗的双通道系统视觉质量评价

目的:评价飞秒激光微小切口角膜基质透镜切除术(small incision lenticule extraction,SMILE)和飞秒激光制瓣的准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)治疗近视术后的视觉质量。方法:选取11例22眼近视和近视散光患者为全飞秒组(SMILE组),同期23例43眼飞秒激光制瓣LASIK的近视和近视散光患者为飞秒激光制瓣的LASIK组(LASIK组)。使用双通道系统(OQAS)检查、记录两组患者术前及术后1mo内的结果,对比二者的调制传递函数截止空间频率(modulation transfer function cutoff frequency,MTF cutoff)、斯特列尔比(strehl ratio,SR)和眼内客观散射指数(objective scattering index,OSI),分析并评价两种手术方式术后早期的视觉质量。结果:SMILE组和LASIK组术后1mo时的MTF cutoff分别为34.835±10.113c/deg和38.362±10.623c/deg(t=0.925,P=0.362);SR分别为0.204±0.077和0.218±0.072(t=0.557,P=0.582);OSI分别为0.608±0.291和0.545±0.405(t=-0.473,P=0.640)。结论:双通道客观视觉质量分析显示SMILE和飞秒激光LASIK两种术式对视觉质量的影响无明显差异。     

p-mTOR蛋白在结直肠癌组织中的表达及患者预后判断中的价值

目的：检测p-mTOR（Ser2448，活化形式的mTOR）蛋白在结直肠癌中的表达变化并评价其用于判断患者预后的价值。方法：采用组织芯片-免疫组织化学染色技术，检测441例结直肠癌及其配对癌旁正常组织中p-mTOR的表达，收集患者至少5年的随访信息，并分析其表达水平与临床病理指标及患者预后的相关性。结果：免疫组织化学染色结果显示p-mTOR在癌旁正常结直肠上皮细胞中阳性表达率为4%（17/441），而在结直肠癌组织中阳性表达率为58%（254/441），两者间差异显著（P < 0.01）。统计分析结果显示，在结直肠癌组织中，p-mTOR的表达水平与肿瘤分级、淋巴结转移、远处转移及病理分期显著正相关（P均 < 0.05）。同时，p-mTOR的表达水平与结直肠癌患者的预后显著相关（P均 < 0.05），p-mTOR高表达患者的无病生存期和总生存期分别为52和60个月，明显短于p-mTOR低表达患者的71和70个月。Cox多因素分析结果显示p-mTOR表达水平为结直肠癌患者的独立预后因素。结论：p-mTOR在结直肠癌组织中表达上调，其高表达与结直肠癌患者预后不良相关，有可能作为预测结直肠癌患者术后死亡及复发转移风险的候选分子标志物。     

重症急性胰腺炎的术后双套管持续负压引流间断冲洗的护理

目的：探讨急性重症胰腺炎的双套管持续负压引流间断冲洗的应用及护理方法。方法：回顾分析47例重症急性胰腺炎患者,其中36例进行胰腺切开减压术,并放置双套管持续负压引流间断冲洗。结果：术后恢复良好,无一例发生腹腔脓肿、胰腺假性囊肿或继发性糖尿病,随访患者生活情况良好。结论：双套管持续负压引流、间断冲洗是重症胰腺炎患者综合治疗的重要措施。