食管癌MAL基因变化的RNA原位杂交研究

目的 观察食管癌组织及癌旁粘膜ＭＡＬ基因ｍＲＮＡ的表达情况。方法 非放射性ＲＮＡ原位杂交。结果 ３３例配对标本中食管粘膜全部表达ＭＡＬ基因,而只有８例食管癌组织表达,表达与否与临床参数无关。结论 ＭＡＬ基因的表达下调可能是食管癌发生中的重要事件。     

冷冻对重组(CHO细胞)乙型肝炎疫苗免疫效果的影响

重组(CHO细胞)乙型肝炎(乙肝)疫苗的大规模应用已10年.长期实践证明,在2℃～8℃保存条件下,疫苗使用效果良好.但实际使用中也有意外情况,我们接到用户咨询较多的问题是贮存温度失常,发生低温冷冻,使用者常常处理不当或不知所措.为此,我们做了如下的实验,验证冷冻对疫苗免疫效果有直接的不良影响.     

宁德地区人口生命素质指数（PQLI）分析

人口问题是社会医学研究的重要内容.实行计划生育，控制人口数量，提高人口素质是我国人口政策的重要内容。现阶段我国降低人口的数量是当务之急，但长远的方向和根本的目的是致力于提高人口的素质。为此，随着生育率的不断下降，人口素质的研究，已日益受到人们的关注，我区人口生命素质究竟如何？笔者就有关资料利用人口生命素质的三个指标（识字率、婴儿死亡率、l岁期望寿命）通过指数计算进行分析。现报告如下。l资料来源宁德地区人口普查第3、4次资料。2计算方法按照王俊改等’‘’报道的生命素质指数（PQLI，ThePhysicalQualityof…     

NEDD4在食管鳞癌中的表达及作用研究

目的：检测神经前体细胞表达发育下调蛋白4（neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4,NEDD4）在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义,并探讨其过表达对食管鳞癌细胞恶性表型的影响。方法：应用组织芯片-免疫组织化学染色技术,检测131例食管鳞癌及配对癌旁正常食管上皮组织中NEDD4蛋白的表达情况,并分析其表达水平与临床病理指标的相关性;同时,使用TCGA和GTEx数据库中的mRNA表达数据,分析食管鳞癌组织中NEDD4 mRNA的表达变化。然后,在NEDD4表达水平较高的食管鳞癌细胞系中用特异性siRNA敲降NEDD4的表达,采用CCK8法检测细胞增殖活力的变化。结果：免疫组化染色结果显示,NEDD4在40%（53/131）的食管鳞癌组织中高水平表达,而在癌旁正常食管上皮组织中不表达或低水平表达。NEDD4蛋白的表达水平与食管鳞癌的浸润深度、病理学分期呈正相关（均为P < 0.05）。同时,TCGA及GTEx数据库分析结果显示,NEDD4 mRNA表达水平在食管鳞癌组织中明显升高（P < 0.01）。细胞增殖活力检测结果显示,在KYSE30和KYSE150细胞中,转染NEDD4 siRNA的实验组细胞的增殖活力均显著低于对照组细胞（均为P < 0.01）。结论：NEDD4在食管鳞癌组织中表达上调,其高表达可增强食管鳞癌细胞的增殖活力,提示NEDD4过表达可能在食管鳞癌的发生发展过程中发挥促癌作用。     

食管癌染色体畸变及其与临床病理参数相关性研究

目的应用荧光原位杂交技术检测食管鳞状细胞癌染色体畸变情况,并分析其与临床病理参数相关性,探讨应用探针组合辅助诊断食管鳞状细胞癌的可行性。方法用染色体3、4、8、9、10、11、17、20号和Y着丝粒探针,与152例食管鳞状细胞癌细胞间期核进行荧光原位杂交,分析染色体畸变情况及其与临床病理参数的关系,统计染色体畸变组合检测食管鳞状细胞癌的阳性率。结果3、4、8、9、10、11、17、20号和Y染色体畸变率分别为68.4%、46.7%、73.0%、48.6%、55.3%、48.7%、54.6%、61.8%和55.5%。11、20号染色体多体与分期显著相关(P=0.011、0.005),4、9、20号染色体多体与分级显著相关(P=0.007、0.001、0.002),8、11、17、20号染色体多体与淋巴结转移显著相关(P=0.000、0.000、0.010、0.007)。联合应用3、8、10、20号探针检测食管鳞状细胞癌阳性率为57%,3、8、20号和Y探针组合在男性患者的阳性率为69%。结论食管鳞状细胞癌染色体有很高的畸变率,且与临床病理参数存在相关性,染色体着丝粒探针组合为食管癌的辅助检测提供实验依据。     

DNAJB6b通过激活AKT通路增强结直肠癌细胞的侵袭迁移能力

目的: 探讨DnaJ热休克家族成员B6异构体b(DNAJB6b)过表达对结直肠癌细胞侵袭迁移能力的影响及相关分子机制。方法: 使用GEO数据库中的数据统计并分析结直肠癌组织中DNAJB6a和DNAJB6b mRNA表达水平的改变;体外培养结直肠癌细胞系DLD-1和HCT116,分别使用小干扰RNA(siRNA)和短发卡RNA(shRNA)敲降DNAJB6b的表达,以转染阴性对照siRNA和shRNA的细胞作为对照,使用Western blot检测敲降组与对照组细胞中相关蛋白表达水平的变化;使用PI3K/mTOR双重抑制剂BEZ235处理DLD-1和HCT116细胞,以溶剂处理细胞作为对照,进行Transwell侵袭和迁移实验,统计穿膜细胞数目;在稳定敲降DNAJB6b的DLD-1和HCT116细胞中,瞬时转染组成型活化的AKT(myr-AKT)表达载体,进行挽救实验,以转染相应空载体的细胞作为对照,使用Western blot检测相关蛋白的表达水平,同时进行Transwell实验评估细胞侵袭迁移能力的变化。结果: 与癌旁正常组织相比,结直肠癌组织中DNAJB6b mRNA的表达水平显著上调(P<0.05),而DNAJB6a mRNA的表达水平无显著变化。与对照组相比,在结直肠癌细胞系DLD-1和HCT116中敲降DNAJB6b的表达,可明显降低p-AKT(Ser473)的蛋白水平;BEZ235处理组细胞穿膜数目显著减少,仅为对照组的20%左右(P<0.01)。挽救实验结果显示,在稳定敲降DNAJB6b的DLD-1和HCT116细胞中过表达外源myr-AKT,与对照组相比,p-AKT(Ser473)表达水平升高并可显著逆转由于敲降DNAJB6b表达导致的细胞穿膜数目降低(P<0.01)。结论: DNAJB6b在结直肠癌组织中表达上调,其过表达可通过激活AKT通路增强结直肠癌细胞的侵袭迁移能力,提示其异常表达在结直肠癌发生进展过程中发挥促癌作用。     

胺碘酮治疗室性心律失常的临床治疗体会

目的观察胺碘酮治疗室性心律失常临床疗效。方法选取40例室性心律失常患者,采用口服胺碘酮口服治疗。结果 40例患者中,显效14例,有效21例,无效5例。结论胺碘酮治疗室性心律失常疗效可靠,不良反应较少。     

食管鳞癌TP53基因突变及其瘤内异质性分析

目的 探讨食管鳞癌瘤内多个取材位点中TP53基因突变异质性状态及其与临床病理特征的相关性。 方法 对食管鳞癌原发肿瘤及其配对的手术切端组织,采用聚合酶链式反应(PCR)法和直接测序法检测TP53基因第2～11号外显子突变状态,评估各病例瘤灶内4个不同位点TP53基因突变与临床病理参数的相关性及其在瘤内的异质性。 结果 在30例被测食管鳞癌肿瘤中,发现18例患者存在TP53基因突变,占60%(18/30)。16例为点突变,其中3例为无义突变,13例为错义突变;另2例为导致移码的缺失突变。大部分突变集中于TP53基因5～8号外显子,其中5号外显子的突变率最高,为23.3%(7/18)。在2例肿瘤中检测到第282位密码子突变(R282W),3例检测到第175位密码子突变(R175H)。观察每例肿瘤各位点突变等位基因峰高与正常等位基因峰高之比(relative intensity,RI值),发现在有点突变的16例中,12例的4个肿瘤位点的RI之间存在很大差异,其余4例瘤内各位点RI值也不一致。 结论 食管鳞癌存在较高频率的TP53基因突变,而且每例肿瘤均存在不同程度的瘤内异质性。      

G蛋白信号转导调节子5参与实验性脉络膜新生血管生成的可能机制

目的 探讨G蛋白信号转导调节子5(RGS5)参与实验性脉络膜新生血管(CNV)生成的可能机制.方法 对照实验研究.采用532 nm激光,对88只(176只眼)雄性棕色挪威(BN)大鼠诱导实验性CNV.其中40只大鼠按光凝后时间分组:光凝后1 d、3 d组各6只大鼠,光凝后7 d组7只大鼠,光凝后14 d组21只大鼠;48只大鼠在光凝后两个时间段按处理因素分组:光凝后7 d的生理盐水组和Avastin注射组各6只大鼠;光凝后14 d的生理盐水组和Avastin注射组各18只大鼠.另选择未进行任何干预的19只大鼠作为正常对照组.分别采用免疫荧光染色法、免疫印迹法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠视网膜和脉络膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)和RGS5蛋白及其mRNA表达灰度值;组织病理学切片和脉络膜铺片观察CNV厚度和面积.组间RGS5蛋白和mRNA表达、VEGF蛋白和mRNA表达灰度值比较,均采用Student's t检验.结果 (1)RGS5和VEGF蛋白表达水平:光凝后14 d组大鼠RGS5蛋白表达水平达到高峰,灰度值为0.899±0.057,但与正常对照组(0.820±0.032)差异无统计学意义(t=2.079,P＞0.05);光凝后7 d组大鼠VEGF蛋白表达水平最高,灰度值为0.600±0.031,较正常对照组(0.382±0.036)明显升高(t=7.959,P＜0.01).(2)RGS5和VEGF的mRNA表达水平:光凝后1 d和3 d组大鼠RGS5 mRNA表达灰度值分别为0.763±0.035、0.725±0.054,较正常对照组(0.886±0.047)明显下降(t=3.646,3.888;均P＜0.05),光凝后14 d组达到高峰,但与正常对照组差异无统计学意义(t=2.194,P＞0.05);光凝后7 d组大鼠VEGF mRNA表达水平达到高峰,灰度值为0.855±0.029,较正常对照组(0.274±0.039)明显升高(t=20.709,P＜0.01).提示在大鼠CNV形成过程中,RGS5蛋白和mRNA表达高峰期均晚于VEGF蛋白和mRNA表达高峰期.(3)CNV厚度和面积变化:光凝后14 d大鼠CNV形成,CNV厚度为(81.513±10.091)μm,CNV面积为(35 867.167±3159.007)μm2;玻璃体腔注射Avastin后,CNV厚度为(70.967±8.867)μm,CNV面积为(12 397.50±1308.559)μm2;注射Avastin前后的CNV厚度和面积差异有统计学意义(t=2.616,15.179;P＜0.05,0.01).结论 光凝后RGS5与VEGF共同表达于大鼠的CNV区域,RGS5表达高峰期晚于VEGF表达高峰期.玻璃体腔注射Avastin后,在抑制CNV形成过程中,可下调RGS5表达水平.RGS5可能参与了VEGF调控CNV生成的机制.