孕妇尿液中五种邻苯二甲酸酯代谢产物的固相萃取-高效液相串联质谱测定法

目的 建立人体尿液中5种邻苯二甲酸酯代谢产物的固相萃取-高效液相串联质谱测定法.方法 尿液中5种邻苯二甲酸酯代谢产物经β-葡萄糖苷酸酶水解后,采用NEXUS固相萃取柱富集,乙腈-乙酸乙酯(体积比1∶2)洗脱,苯基柱分离,在正电离模式下利用质谱的多反应监测模式进行定性和定量分析.结果 该方法在0.3～800 μg/L范围内线性关系良好,标准曲线回归方程相关系数均＞0.99;孕妇尿中邻苯二甲酸单甲酯(MMP)、邻苯二甲酸单乙酯(MEP)、邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单丁苄酯(MBzP)、邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)的最低检出限分别为1.16、1.00、0.53、0.14、0.22 μg/L,加标回收率为95.36％～98.13％,相对标准偏差(RSD)为0.36％～3.75％.结论 该方法精密度和重现性良好,回收率高,检出限较低,可用于人体尿液中多种邻苯二甲酸酯代谢产物的同时检测.     

反复针刺分离联合结膜下注射5-FU治疗青光眼术后滤过泡功能不良

目的:评估以反复针刺分离联合结膜下注射5-FU的方法处理青光眼术后功能不良滤过泡的效果。方法:回顾性分析2009-03/2013-02在我院以反复针刺分离联合结膜下注射5-FU的方法处理因青光眼术后滤过泡功能不良而眼压升高的连续病例34例34眼。分析治疗后眼压、滤过泡形态的变化及眼部并发症。结果:治疗后平均眼压从35.51mmHg降至14.43mmHg(P<0.05),成功率达91%。常见并发症包括角膜上皮损伤、结膜撕裂和脉络膜脱离等。结论:反复针刺分离联合结膜下注射5-FU的方法处理青光眼术后滤过泡功能不良安全有效。     

Cortactin蛋白在结直肠癌中的表达变化及其临床意义

目的：探讨Cortactin（CTTN）蛋白在结直肠癌组织中的表达变化及其临床意义。方法：采用免疫组织化学法检测100例结直肠癌组织和癌旁正常组织中CTTN蛋白的表达情况,分析CTTN蛋白的表达变化与结直肠癌患者临床病理指标及预后的关系。结果：CTTN蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为58%,显著高于癌旁正常组织的6%（P＜0.01）。CTTN蛋白（P＜0.05）阳性表达率在不同的T分期（浸润深度）间的差异有统计学意义,而与患者的性别、年龄、肿瘤原发部位、肿瘤大小和淋巴结转移均无显著相关（P＞0.05）。生存分析的结果显示,CTTN阳性患者的预后差于CTTN阴性患者（P=0.014）。结论：CTTN蛋白在结直肠癌中表达增加,并与结直肠肿瘤的浸润深度有关,可能作为结直肠癌预后判断的指标。     

ApcMin/+小鼠红细胞形态及参数分析

[目的]探讨结直肠癌小鼠模型Apc Min/+贫血的类型及病因。[方法]对33只Apc Min/+小鼠和23只同窝对照Apc+/+小鼠进行外周血血细胞计数,比较两组之间红细胞计数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)和平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)间的差异,以及ApcMin/+小鼠上述各项参数与健康小鼠正常值之间的差异。同时,制备外周血血涂片,观察ApcMin/+小鼠红细胞形态的变化。[结果]ApcMin/+小鼠与对照组Apc+/+小鼠的红细胞参数RBC、HGB、HCT、MCV、MCH和MCHC之间均有显著性差异(P均<0.05)。其中,ApcMin/+小鼠的RBC、HGB、HCT、MCH和MCHC各项均值都显著低于对照组,而其MCV的均值显著高于对照组。与之相似,ApcMin/+小鼠的RBC、HGB、HCT、MCV、MCH和MCHC与健康小鼠相比也存在显著性差异(P均<0.05)。Apc Min/+小鼠的血涂片显示易出现大红细胞、嗜多色红细胞、嗜碱性点彩红细胞及网织红细胞。[结论]与对照组Apc+/+小鼠相比,ApcMin/+小鼠的RBC、HGB、HCT、MCH和MCHC的均值降低,而MCV的均值升高,同时红细胞数目减少,提示其为大细胞低色素性贫血。     

穴位注射加耳压治疗面肌痉挛61例疗效观察

面肌痉挛是临床常见病,为陈发性不规则的半侧面部肌肉不自主的抽搐,其发病原因不详,少数为面神经麻痹后遗症所致。笔者自1992年以来,用穴位注射加耳压的方法治疗面肌痉挛61例,收到良好的临床效果,现报告如下。     

食管癌中KIAA1522基因的转录本及蛋白表达分析

目的：检测食管鳞癌组织及细胞系中KIAA1522基因不同转录本的表达及丰度，确定其蛋白的表观分子量，为进一步研究KIAA1522在食管癌中的表达改变及功能提供实验依据。方法：使用反转录PCR（RT-PCR）及实时荧光定量PCR（qPCR）检测食管癌组织及细胞系中KIAA1522基因4个不同转录本的表达及丰度；以特异性siRNA敲降食管癌细胞中KIAA1522的表达，并在模式细胞中过表达KIAA1522，通过Western blot检测确定KIAA1522的表观分子量，并通过质谱分析验证KIAA1522条带的序列组成。结果：KIAA1522的转录本T1和T4在食管鳞癌组织及多个细胞系中均有表达，其中T1的表达丰度相对最高。Western blot检测中观察到的分子量为170 kDa的条带为KIAA1522基因特异性的蛋白表达产物，同时质谱分析结果也证实该条带为KIAA1522多肽。结论：T1为食管鳞癌组织及细胞系中KIAA1522基因的优势转录本，KIAA1522蛋白的表观分子量为170 kDa。     

基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4在翼状胬肉中的表达及意义

目的:探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体趋化因子受体(CXCR4)在不同年龄翼状胬肉患者中的表达及意义。方法:收集2018-01/10在中国人民解放军第四七四医院行原发性翼状胬肉切除术的手术标本60例60眼(其中年龄<50岁30眼,年龄>50岁30眼),同时间收集年龄匹配的斜视矫正术和视网膜脱离复位术患者的正常结膜组织30例30眼(其中年龄<50岁15眼,年龄>50岁15眼)。采用HE染色和免疫组织化学法检测SDF-1和CXCR4在翼状胬肉组织标本中的表达和定位,分析SDF-1和CXCR4的表达与患者临床表现的关系。使用IPP 6.0软件定量测定SDF-1和CXCR4的平均光密度。结果:SDF-1和CXCR4在正常结膜上皮基底层细胞显示阳性或无阳性表达,而在翼状胬肉中全层结膜上皮细胞和血管内皮细胞均有阳性表达,其表达水平差异显著,基底层细胞中表达更明显,显示出明显极性。翼状胬肉组织中SDF-1和CXCR4的表达量均高于正常结膜组织(P<0.05);年龄<50岁患者的CXCR4表达量大于年龄>50岁患者的表达量(P<0.05)。结论:SDF-1和CXCR4在翼状胬肉中表达上调,提示SDF-1和CXCR4参与翼状胬肉的形成,抑制SDF-1/CXCR4信号通路,可能抑制翼状胬肉发生,也可能成为翼状胬肉的药物治疗靶点,成为一个新的研究方向。年轻翼状胬肉患者CXCR4的表达更高,提示未来可能实现个体化给药,减少医疗资源的浪费。     

实体瘤间期细胞制备技术对荧光原位杂交效果的影响

目的将改进的实体瘤间期细胞制备方法应用于荧光原位杂交,为实体瘤间期细胞的制备建立技术平台。方法采用随机引物法标记3号染色体着丝粒探针,分析实体瘤不同间期细胞制备技术对荧光原位杂交效果的影响。结果6种制片方法各具特点,根据其在应用方面有不同侧重,可采用不同制片方法。胶原酶法制片的荧光原位杂交效果最佳。对于冰冻组织或较小的组织,可采用印片法制片。结论适当的制片方法,结合荧光原位杂交,为实体瘤的染色体研究和诊断应用奠定了技术基础。     

乙型肝炎卡介苗联合疫苗与单价乙型肝炎疫苗免疫效果的比较

目的：比较乙型肝炎卡介苗联合疫苗与单价乙型肝炎疫苗的免疫效果。方法：实验动物采用豚鼠，按0、1、2月三针免疫程序接种，并于每针免疫后1个月采血，ELISA方法检测血清抗体滴度。实验分三部分进行。实验一：三种不同规格的联合疫苗与单价乙型肝炎疫苗的比较；实验二：同一规格连续三批联合疫苗与单价乙型肝炎疫苗的比较；实验三：联合疫苗与两种单价疫苗同时免疫的比较。结果：在三个实验中，联合疫苗组第一针血清抗体滴度均低于对照组，但无统计学差异：联合疫苗组第二、三针血清抗体滴度均高于对照组，也无统计学差异，实验组各组之间无明显差异。结论：联合疫苗组三针免疫程序的HBsAg的效力与单价乙型肝炎疫苗组相似。     

食管癌MAL基因变化的RNA原位杂交研究

目的 观察食管癌组织及癌旁粘膜ＭＡＬ基因ｍＲＮＡ的表达情况。方法 非放射性ＲＮＡ原位杂交。结果 ３３例配对标本中食管粘膜全部表达ＭＡＬ基因,而只有８例食管癌组织表达,表达与否与临床参数无关。结论 ＭＡＬ基因的表达下调可能是食管癌发生中的重要事件。