微流控芯片技术在免疫分析中的应用

微流控芯片已广泛用于生物医学、高通量药物合成筛选、环境监测和生物战剂侦检等领域,本文就微流控芯片在免疫分析中的应用做一综述。1微流控芯片技术分析概述微流控芯片技术是通过微细加工技术在芯片上构建由储液池、微反应室、微管道等微功能元件构成的微流路系统,加载生物样品和反应液后,在压力泵或者电场作用下形成微流路,于芯片上进行一种或连续多种的反应,达到对样品高通量快速分析的目的。微流控芯片技术由于具有高度集成性,可在一张芯片上完成采样、稀释、加试剂、反应、分离和检测等多种功能,又被称为微型全分析系统(micro total a…     

用于AFP检测的电流型免疫传感器的研究

目的 研制一种新的检测AFP的电流型免疫传感器。方法 通过把抗体固定在电聚合邻苯二胺膜的铂电极上，夹心法连接HRP标记的AFP抗体，电流法检测HRP作用于底物对苯二酚后的产物产生的还原电流间接检测血清AFP浓度。结果 制得的传感器在5～400ng／ml范围内．电流和AFP浓度的对数成线性关系，相关系数为0．986．最低检测限为0．51ng／ml，初步临床实验结果良好。结论 研制的传感器具有保存时间长、灵敏度高、特异性好、重复性好、无放射性等优点．有望在临床检测中发挥作用。     

红细胞变形能力与脂质

本文综述了红细胞膜的脂质组成,红细胞的变形能力与膜胆固醇、磷脂及膜脂质过氧化的关系,以及膜脂质成份改变对红细胞形状的影响。     

不同全自动酶免分析系统性能对比研究

目的比较中国烟台艾德康公司Elisa800型全自动酶免分析系统(简称Elisa800分析仪)和瑞士帝肯公司Freedom Evolyzer型全自动酶免分析系统(简称Freedom Evolyzer分析仪)在的基本使用性能。方法采用Elisa800分析仪、Freedom Evolyzer分析仪,以及相同的试剂盒,对相同的标本进行抗甲型肝炎病毒抗体、抗丙型肝炎病毒抗体、抗丁型肝炎病毒抗体、抗戊型肝炎病毒抗体、乙型肝炎病毒前S1抗原、乙型肝炎病毒前S2抗原检测。比较两台分析仪标本检测前处理操作步骤及操作时间,以及标本检测结果。结果两台分析仪检测结果完全一致,阳性符合率为100%。当标本量大于91份时,Freedom Evolyzer分析仪检测耗时约为Elisa800分析仪检测耗时的2倍。与Freedom Evolyzer分析仪相比,Elisa800分析仪标本前处理操作步骤由24步缩减为3步,处理操作时间由11min缩减至1min。结论 Elisa800分析仪与Freedom Evolyzer分析仪检测结果一致,但Elisa800分析仪检测耗时更短,操作更简便。     

新型十万目六边形微腔芯片数字PCR对肺癌基因突变的绝对定量分析

目的 以表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)G719S突变为对象,建立用于肺癌基因突变绝对定量分析的新型十万目六边形微腔芯片(novel 100 000 hexagonal microchamber chip,NHMC)数字PCR(digital PCR,dPCR)平台.方法 首先构建并优化适用于EGFRG719S突变的PCR检测体系;然后用NHMC-dPCR平台检测8个浓度梯度的EGFR G719S标准品质粒和4种干扰物质,评估该方法的灵敏度、特异性和抗干扰能力;最后分别用NHMC-dPCR、液滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)和DNA测序法检测6例EGFR G719X突变的肺癌组织样本,验证NHMC-dPCR在临床样本检测中的可靠性.结果 NHMC-dPCR对EGFR G719S的最低检测浓度为3.01 copies/μL,检测值与期望值的线性方程为Y=0.725X-0.581,相关系数R2=0.984.该平台检测4种干扰物未发现阳性拷贝,检测G719S突变及其与4种干扰物混合的结果分别为23 194.4 copies和22 095.7 copies.NHMC-dPCR、ddPCR和DNA测序3种方法检测6例临床样本的定性结果符合率为100％,其中2例由NHMC-dPCR定量的结果为1 822.4 copies和451.7 copies,其对应由ddPCR定量的结果为1 581.8 copies和218.3 copies.结论 本研究建立的核酸绝对定量技术—NHMC-dPCR具有成本低、操作简单、速度快、抗干扰能力强等优点,可用于肺癌基因突变的绝对定量分析.     

尿液一般检验中值得重视的几个问题

尿液检验在泌尿系统疾病及一些全身性疾病的诊治中具有很重要的意义 ,因而尿液分析是各级医疗单位必做的常规检验项目。自动化仪器的广泛使用 ,赋予了尿液分析许多新的内容 ,在当前尿液一般检验工作中 ,有几个问题值得重视。1　尿液化学检验过筛项目是否越多越好前几年尿液常规     

实验性慢性肾功能衰竭早期脂质代谢的研究主动脉脂质沉积动态变化

目的从分子水平阐明了慢性肾衰（ＣＲＦ）早期脂质变化与动脉粥样硬化（ＡＳ）发生发展的关系及它们之间的相互作用。方法Ｗｉｓｔａｒ鼠５／６肾切除ＣＲＦ条件形成后，分别在１０，２０，４０天各时相点同时测定主动脉弓组织中甘油三脂（ＴＧ）、总胆固醇（Ｔ－Ｃｈ）、总磷脂（Ｔ－ＰＬ）的动态水平，并在１０、２０、３０、４０天时相点动态观察了血浆中ＴＧ、Ｔ－Ｃｈ、Ｔ－ＰＬ及红细胞膜Ｔ－Ｃｈ、Ｔ－ＰＬ的水平。结果主动脉弓组织中的三种脂质水平从１０天时相点开始稍高于同时相点对照组，在２０天ＴＧ首先明显增高（Ｐ＜０．０５），在４０天Ｔ－Ｃｈ和ＴＧ增高非常显著（Ｐ＜０．００１），Ｔ－ＰＬ明显增高（Ｐ＜０．０５）。血浆中的ＴＧ、Ｔ－Ｃｈ水平与主动脉组织不同程度的升高，两者显著相关。红细胞膜Ｔ－Ｃｈ升高，Ｔ－ＰＬ下降导致红细胞刚性增强，变形能力下降。结论揭示ＣＲＦ早期就存在脂质代谢异常的同时伴随着主动脉脂质沉积和红细胞膜脂质成分的改变。提示ＣＲＦ早期已经具备了合并心血管病发病的危险因素。为ＣＲＦ心血管病合并症的早期预防治疗提供一定的理论基础     

一氧化氮与血液细胞的凋亡和分化

一氧化氮是一种有广泛作用的生物活性介质,在细胞凋亡和分化中有着重要作用。本文就近年关于一氧化氮诱导、抑制血液细胞凋亡机制及其影响因素,一氧化氮与血液细胞的分化等作一综述。     

GITR抗体介导增强NK细胞杀伤活性的实验研究

目的探讨糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关受体（glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor family related receptor．GITR）抗体通过调节Treg细胞和NK细胞的功能对L615白血病细胞增殖的影响．了解NK细胞对白血病细胞的杀伤活性。方法通过不同的给药方式将L615白血病小鼠设立为4个实验组．提取实验分组后的小鼠脾脏中NK细胞作为效应细胞．以L615白血病细胞作为靶细胞．在体外观察了NK细胞的杀伤活性变化情况．并运用RT-PCR进一步观察了体现NK细胞杀伤活性的几个相关指标的变化。结果GITR抗体可以明显增强小鼠脾脏中NK细胞的杀伤活性．表现为同NK细胞活性密切相关的3个指标穿孔素（Perforin）、γ干扰素（IFN-γ）、Fas的表达量明显增加。结论GITR抗体能够通过Treg细胞的调节增强NK细胞的杀伤活性,进而有效的抑制L615自血病细胞。     

无创血糖仪的研制

血糖是临床上分析病人是否患糖尿病的重要参考指标之一。常规检测血糖高低的方法 (1)用传统的量糖计 (旋光计 )检测尿糖的浓度 ,以间接知道病人血糖高低 ;(2 )用目前临床使用的血糖计 ,通过抽取病人血液检测血糖的浓度 ;(3)用分光光度计法测量血清糖化蛋白以确定病人血糖的高低 ;(4 )测定血清果糖胺以确定糖尿病等。这些方法中旋光计要用数毫升的尿液才能检测 ,早已被淘汰 ;后面的几种方法则需要针刺手指 ,或静脉血 ,用血液来检测。虽然有的方法正在广泛使用 ,有的正在研究之中 ,但是不管是那一种方法它们都要抽取病人的血液 ,是属于有创探测 ,会引起病人的不适和增加感染的机会 ,所以都不是理想的检测方法。本文介绍一种新颖的、方便制作的无创血糖探测仪 ,它不用血液 ,而用唾液就能方便地测出病人血糖含量的高低。实践证明 ,此装置方便、快捷、无创、安全 ,其应用前景十分光明