PFNA与Gamma钉治疗骨质疏松性股骨粗隆间骨折的疗效评价

目的：比较PFNA与Gamma钉治疗骨质疏松性股骨粗隆间骨折的效果。方法：选择我科2005年12月～2010年12月收治的骨质疏松性股骨粗隆间骨折患者84例,分别应用Gamma钉治疗45例,PFNA治疗39例。观察手术时间、术中出血量、术后骨折愈合时间及Harris髋关节功能评分及术后并发症等指标。结果：两组患者在术后随访4～36个月,Gamma钉组3例发生拉力螺钉切出,2例发生股骨干骨折,2例发生内固定松动,1例发生髋内翻;PFNA组1例发生内固定松动。两组在手术时间、术中出血量和术后并发症方面比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;而术后引流量、骨折愈合时间及Hariris髋关节功能评分比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：与Gamma钉相比,PFNA治疗股骨粗隆间骨折具有操作简单、出血少、手术时间短、固定可靠、防旋转的优点,是骨质疏松性老年患者股骨粗隆间骨折的良好适应证。     

LARS人工韧带在陈旧性跟腱断裂中的应用

目的探讨聚酯韧带（ligament advanced reinforcement system,LARS）在陈旧性跟腱断裂手术中的临床应用效果。方法 2007年1月至2009年2月对12例陈旧性跟腱断裂患者进行LARS人工韧带重建手术。男7例,女5例;年龄32～60岁,平均44岁,左侧14例,右侧8例,均为闭合性损伤。结果 12例患者均获随访,随访时间3～39个月,平均随访18.5个月,所有病例术后伤口均一期愈合。跟腱未发生再次断裂,跟腱皮下滑动良好。采用Amer-Lindholm评定法评定,优10例,良2例。结论 LARS韧带用于重建陈旧性跟腱断裂短期临床效果令人鼓舞,但其远期疗效还有待于进一步观察。     

HBc二聚体组装核衣壳相关功能域突变对HBV复制的影响

目的 探讨乙型肝炎病毒核心蛋白(hepatitis B virus core protein,HBc)二聚体组装相关功能域突变对核心颗粒组装及HBV复制的影响.方法 基于HBc空间结构,PCR定点诱变二聚体组装核衣壳相关功能域重要氨基酸位点,以pcDNA3.1为载体构建4个突变体表达质粒pHBc14-18M、pHBc120-135M、pHBc23-39M和pHBc122-139M.将突变质粒与HBc缺失的含1.2拷贝HBV基因质粒pHBV1.2-core-共转染HepG2细胞,通过Northern blot检测HBV前基因组(pgRNA),Southern blot检测复制中间体,非变性琼脂糖凝胶电泳(native agarose gel electrophoresis)及Western blot检测细胞核心颗粒观察突变质粒自身形成核衣壳情况.将突变质粒与含有1.2拷贝HBV基因质粒pHBV1.2共转染HepG2细胞观测突变质粒对野生型HBc组装及HBV复制的影响.结果 突变质粒与pHBV1.2-core-质粒共转染HepG2细胞,pHBc14-18M、pHBc120-135M和pHBc122-139M突变能够组成核衣壳样结构.pHBc23-39M不能形成核衣壳样结构.Northern blot结果显示所有突变质粒组均未见pgRNA条带,Southern blot检测复制中间体也未见条带.将突变质粒与pHBV1.2共转染HepG2细胞,pHBc14-18M、pHBc120-135M和pHBc122-139M组HBV复制中间体及上清中病毒颗粒明显减少,而pHBc23-39M组无减少.结论 HBc23-39位氨基酸突变可阻止二聚体多聚化,不能形成核衣壳样结构,且不能与野生HBc二聚体相互作用.HBc14-18、120-135、122-139区域的氨基酸突变,能够形成核衣壳样结构但不支持HBV DNA复制,并且能与野生HBc二聚体相互作用,形成杂合体,干扰野生型HBV DNA的复制.     

丙型肝炎病毒3′非编码区准种研究

目的获得中国大陆1b型丙型肝炎病毒(HCV)3′非编码区(3′UTR)全长序列,探讨在丙型肝炎病毒3′非编码区(高变区)是否存在复杂的准种特性。方法利用逆转录套式聚合酶链反应(RT-PCR)限制性内切酶长度多态性分析(RFLP)初步筛选出6例1b型HCV感染者,采用半套式RT-PCR法扩增出约400 bp的cDNA片段,每例选择12~15个克隆测序。结果每例获得了5~8株全长1b型HCV3′非编码区克隆,由高变区,Poly(u)区,Poly(u/c)区及98碱基区四部分组成;各克隆中序列变异位点主要分布于高变区,Poly(u/c)区,核苷酸同源性0.2%~2.1%,呈现明显的准种分布特征。结论在丙型肝炎病毒3′非编码区(高变区)存在复杂的准种特性。     

KRAS G12V特异性T细胞受体治疗恶性肿瘤的临床前研究

目的：KRAS G12V是最为常见的KRAS突变类型之一,是一个T细胞表位抗原,目前尚无针对该位点的靶向药物,本研究旨在克隆能够特异性识别该表位抗原的T细胞受体(T cell receptor, TCR),通过体内外实验对该TCR基因修饰T细胞(TCR engineered T cells, TCR-T)靶向KRAS G12V突变肿瘤的安全性和有效性进行评估。方法：从1例结直肠癌患者的肿瘤浸润淋巴细胞中获得靶向KRAS G12V_8-16表位的高亲和力TCR序列,构建该TCR慢病毒载体并感染人源T细胞,获得TCR-T。采用抗原肽激活、γ-干扰素(interferon-γ, IFN-γ)酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)、T细胞体外增殖等实验,体外评价该TCR-T的免疫杀伤活性和脱靶-交叉反应性;通过体内实验评价该TCR-T的抑瘤效果、安全性等指标。结果：获得了能特异性识别HLA-A~*11:01限制性KRAS G12V_8-16表位的高亲和力TCR序列KVA11-01。KVA11-...