四环素对朊病毒羊瘙痒因子263K蛋白酶抗性和感染性的影响

目的研究四环素对朊病毒羊瘙痒因子263K(PrPSc)体外蛋白酶抗性和实验动物感染性的影响。方法以不同浓度的四环素与PrPSc进行不同时间的作用,经蛋白酶K的处理后以Westernblot方法检测具有蛋白酶抗性的PrPSc蛋白;将经四环素处理的PrPSc样品分组颅内接种金黄地鼠,观察动物发病,以Westernblot方法检测发病动物脑组织中PrPSc的存在情况。结果四环素与PrPSc的体外作用可明显地降低或消除PrPSc对蛋白酶K消化的抵抗能力,并呈明显的剂量效应相关性。与对照组相比[平均潜伏期(53.75±0.50)d],经5mmol/L和20mmol/L四环素处理的高滴度PrPSc样品的实验动物感染潜伏期延长,潜伏期分别为(61.50±1.73)d(P<0.01)和(59.50±0.58)d(P<0.05),差异有统计学意义。结论四环素能够有效降低PrPSc的体外蛋白酶抗性,并延长PrPSc感染动物发病潜伏期。     

中国2008年克雅氏病监测病例特征分析

目的 了解中国克雅氏病(CJD)的发病情况及流行病学、临床特征.方法 对2008年中国克雅氏病监测网络获得的可疑CJD病例的临床及流行病学资料进行分析,收集患者脑脊液及血液样品,利用Western blot方法榆测脑脊液中是否含有14-3-3蛋白,提取全血基因组DNA并利用PCR及测序方法对脚基因进行129位多态性及基因突变分析.结果 共发现散发型CJD临床诊断病例31例,疑似诊断病例11例,2例家族性CJD和1例格-斯-斯综合征.病例的地理分布及职业无明显聚集性;临床诊断病例发病平均年龄56.7岁,男女比例8:9;疑似诊断病例发病平均年龄为57.4岁,男女比例5:6.快速进行性痴呆为最常见的首发症状,占全部诊断病例的33.3%.临床诊断病例比疑似诊断病例出现更多的典型临床表现.结论 2008年中国监测到的CJD病例以散发型为主,病例的地理分布、职业、性别比例以及平均年龄均符合散发型CJD的分布特点.     

吉林市区2005、2006年从业人员体检中乙肝阳性率调查

目的：对吉林市区2005～2006年各种场所从业人员进行健康体检,通过该人群乙肝病毒HBsAg、HBeAg阳性率,来了解吉林市区从业人员中乙肝患者所占大致比例,指导计划免疫的方向。方法：采用ELISA法,定性检测HBsAg、HBeAg。结果：2005年总体检人数19841人,HBsAg阳性者为425人,其阳性率为2.14%,其中HBeAg阳性者128人,占HBsAg阳性比率30.12%,2006年总体检为人数为18482人,HBsAg阳性者为329人,阳性率为1.78%,其中HBeAg阳性者为109人,占HBsAg阳性比率为33.1%。结论：吉林市各种场所从业人员中乙肝阳性患者2006年比2005年有所下降,说明疾控中心扩大免疫对象,加大免疫力度已有显著成效。     

荜铃胃痛冲剂质量标准的研究

目的：研究制订荜铃胃痛冲剂的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对方中的延胡索、香橼、大黄进行定性鉴别;采用双波长薄层扫描法测定了方中有效成分盐酸小檗碱的含量。结果该法具有简便易行,重现性好,结果可靠,专属性强等特点,结论,该方法可以用于该制剂的质量控制。     

朊病毒病实验动物脑组织PrPSc样本库的建立

目的 建立朊病毒病实验动物脑组织检测样本库,检测其在特定保存条件下的稳定性,以用于动物和人朊病毒病诊断技术的评估和考核.方法 选用30只经颅内注射感染羊瘙痒因子263K的仓鼠和30只正常仓鼠,每只分别制备10%、1%和0.5%3种浓度的脑组织匀浆,分装冷冻保存.以Western Blot方法 确定脑组织匀浆中PrPSc的存在情况,并分别在建库半年和3年检测PrPSc的稳定性.结果 30只感染仓鼠10%脑组织匀浆全部可检出PrPSc,1%脑组织匀浆有26份为PrPSc阳性,0.5%脑组织匀浆有19份为PrPSc阳性.半年及3年后复检,PrPSc阳性检出率基本不变.所有正常仓鼠脑匀浆均为PrPSc阴性.结论 建立了稳定性良好的含有90份PrPSc阳性标本和90份PrPSc阴性样本的朊病毒病实验动物脑组织检测样本库.     

叉头蛋白O1在黄连素抗人肺腺癌A549细胞中作用机制研究

目的探讨黄连素(BBR)抗肺腺癌A549细胞及叉头蛋白O1(FKHR)在其中的作用机制。方法实验分为对照组、BBR 25μM组、BBR 50μM组、BBR 75μM组,分别检测各组A549细胞活性、凋亡率以及FKHR和凋亡相关蛋白含量的变化。FKHR siRNA特异性抑制FKHR表达后,BBR(0、50μM)处理细胞24 h,重复上述检测。构建裸鼠移植瘤模型,腹腔注射BBR(10 mg/kg、20 mg/kg),对照组注射等体积磷酸盐缓冲液(PBS)。检测细胞活力和细胞凋亡率,Western-blot检测FKHR及凋亡相关蛋白的表达。结果 BBR有效降低A549细胞活力并促进细胞凋亡(P0.05);Western-blot检测结果显示BBR上调FKHR和Bax的含量(P0.05),抑制Bcl2的表达(P0.05);FKHR siRNA转染显著抑制其表达,同时抑制BBR抗肺腺癌作用(P0.05)。结论黄连素可有效抑制肺腺癌A549细胞增殖、促进细胞凋亡,此作用可能与激活FKHR有关。     

致死性家族失眠症脑组织基因表达谱特点分析

目的：研究致死性家族失眠症（FFI）脑组织基因表达谱特点。方法取3例FFI患者丘脑组织按照标准流程制备生物素标记的互补RNA,以正常人丘脑RNA为对照,利用人类基因组芯片U133＋2.0检测FFI患者丘脑中差异表达基因,并分析差异基因表达特点。结果共有1314个差异表达基因,其中254个上调,1060个下调。主要受影响的分子功能是转录、转录调节和电子转移链。改变最显著的信号通路是阿尔茨海默病、帕金森病和氧化磷酸化。结论 FFI改变了丘脑大量基因表达,其中受影响最显著的信号通路与其他神经退行性疾病相关。     

牙龈卟啉单胞菌prtH基因克隆及其多态性的研究

目的：建立牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.g)prtH全基因序列的克隆株，分析5株不同P.g菌株中prtH基因多态性。方法：利用PCR技术获得prtH全基因序列，克隆至载体pGEM-T;设计3对引物，用PCR的方法扩增prtH基因的不同区域；以生物素标记prtH基因序列为特异性探针，用斑点杂交和Southern印迹杂交进一步分析prtH基因的多态性。结果：酶切分析和DNA测序证实重组质粒pGEM-T-prtH的插入片段为prtH基因序列；核酸分子杂交显示菌株W 381和ATCC 33277杂交类型一致，菌株ATCC 49417和菌株14－3－2呈现各自不同的杂交条带，而菌株47A－1中未检测到prtH基因。结论：不同P.g菌株中prtH基因序列存在差别，这种基因多态性提示不同P.g菌株毒力大小可能存在差异。所建立的PCR扩增技术可以敏感地检测prtH基因的存在。     

Fibro Touch技术在诊断慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度中的应用价值

目的:探讨Fibro Touch技术在诊断慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度中的应用价值.方法:选取某院2018年10月～2019年3月收治的200例慢性乙型肝炎患者,所有患者均行Fibro Touch技术检查及肝组织活检,统计肝组织活检结果,并将肝组织活检结果作为诊断金标准,对比S0～S4分期肝纤维化患者Fibro Tou...     

河南省致死性家族失眠症家系遗传生物学分析

目的 了解河南省致死性家族性失眠症(FFI)临床表现、致病因子、遗传规律及家族性流行特征,探索预防及控制对策.方法 对河南省FFI家系7代175名家族成员的迁徙史和发病史进行追踪调查分析,采集患者及家族成员静脉血标本进行PRNP基因检测、限制性片段长度多态性(RFLP)NspI酶切分析及序列测定,对死亡患者尸检、采集脑组织进行神经病理学检查和western blot方法检测PrPSc蛋白.结果 2例FFI确诊患者临床症状典型;该FFI家族中死亡的23人中有13人出现与先证者相似的FFI临床症状;90个家族成员血标本检测中出现20个PRNP基因178位密码子突变携带者,129位等位基因为M/M纯合子,突变检出率为22.22%;男女性别比约为1∶1;自先证者祖父辈以来发病年龄有逐渐提前的趋势(遗传早现).结论 该家系FFI家族聚集性发病特点明显,是国内罕见的最大的朊病毒引起FFI发病的家族.