尖锐湿疣患者外周血中HPV DNA的检测

目的 检测尖锐湿疣(CA)患者外周血中的人乳头瘤病毒(HPV)DNA。方法 采用聚合酶链反应(PCR)检测30例CA患者皮损和外周血中的HPV DNA,20例正常人外周血作对照。采用限制性内切酶RsaⅠ、PstⅠ对HPV作分型鉴定。选取1例皮损与外周血均为阳性的PCR产物进行测序。结果 30例CA患者皮损均检出HPV DNA,血浆中未检测到HPV DNA,有8例外周血单一核细胞(PBMC)中检测到HPV DNA(阳性率为26.7%),20例正常人对照为阴性,两组阳性率经χ²校正检验χ²=4.52,P<0.05,差异有显著性。酶切和测序结果显示PBMC中的HPV型别与其皮损处的型别有一致性。结论 CA患者在HPV感染的病程中可能存在病毒血症,这可能是CA易于复发的原因之一。     

巨大寻常疣并发皮角

目的:探讨巨大寻常疣并发多发巨大皮角的治疗及其与人乳头瘤病毒(HPV)亚型的相关性.方法:对3例手足巨大寻常疣并发对称性巨大皮角的患者采用抗病毒、手术、免疫、放疗和中药等综合治疗,同时应用免疫组化和PCR等方法研究其中2例患者皮损与HPV感染亚型的相关性.结果:3例患者的皮损全部治愈,随访至今无复发;其中2例患者的皮损均为HPV-2a感染,并发现编码E1和E7的基因存在突变.结论:巨大寻常疣并发皮角宜采用综合治疗.     

比色法测定柴酮片中总黄酮含量

利用比色法对柴酮片中总黄酮进行含量测定,其最大吸收波长为510nm,线性范围0.103～0.516mg/10ml,相关系数0.9995,平均回收率为100.3％,变异系数为1.02％。本法操作简便、精密度高。     

大青叶,板蓝根中靛玉红含量测定

大青叶、板蓝根中靛玉红含量测定董小平，孙波（江苏省药品检验所２１００８瞧宁县卫生局）主题词大青叶／分析，板蓝根／分析，靛玉红／分析我们采用了双波长薄层扫描法测定了大青叶、板蓝根主要成分靛玉红的含量．取得较为满意的结果。１仪器与材料仪器型号：日本岛津Ｃ...     

朊病毒病实验动物脑组织PrPSc样本库的建立

目的 建立朊病毒病实验动物脑组织检测样本库,检测其在特定保存条件下的稳定性,以用于动物和人朊病毒病诊断技术的评估和考核.方法 选用30只经颅内注射感染羊瘙痒因子263K的仓鼠和30只正常仓鼠,每只分别制备10%、1%和0.5%3种浓度的脑组织匀浆,分装冷冻保存.以Western Blot方法 确定脑组织匀浆中PrPSc的存在情况,并分别在建库半年和3年检测PrPSc的稳定性.结果 30只感染仓鼠10%脑组织匀浆全部可检出PrPSc,1%脑组织匀浆有26份为PrPSc阳性,0.5%脑组织匀浆有19份为PrPSc阳性.半年及3年后复检,PrPSc阳性检出率基本不变.所有正常仓鼠脑匀浆均为PrPSc阴性.结论 建立了稳定性良好的含有90份PrPSc阳性标本和90份PrPSc阴性样本的朊病毒病实验动物脑组织检测样本库.     

气相色谱法测定络通喷雾剂中丁香酚的含量

目的:建立络通喷雾剂中丁香酚的含量测定方法。方法:采用气相色谱法,色谱条件为10％PEG—20M Chromosorb W(AW—DMCS)(60～80目),2m×3mm玻璃柱;柱温和检测器(FID)溫度分别为175℃、240℃,采用内标法定量。结果:丁香酚在1.0～3.0mg/ml范围内呈良好线性,r=1.000。结论:该方法专属性强、精密度高、重现性好,可用于络通喷雾剂的质量控制。     

定位表达于溶酶体、泛素的PrP载体的构建及鉴定

目的 构建定位于溶酶体、泛素的PrP表达载体,并进行蛋白表达特点及定位的鉴定.方法 将泛素基因、溶酶体膜定位信号序列基因和PrP基因连接,克隆至pcDNA3.1载体中,构建表达载体pcDNA3.1-UPrP、pcDNA3.1-PrPL;瞬时转染真核表达细胞,经Western Blot和间接免疫荧光技术检测PrP表达特点.结果 构建的各种PrP定位表达载体均可定位表达具有三种类型的糖基化分子的PrP,以双糖基化分子类型最多.带有泛素、溶酶体信号的质粒pcDNA3.1-UPrP、pcDNA301-PrPL的PrP表达随着时间的延长蛋白表达量下降,提示泛素、溶酶体信号能加速表达PrP在细胞内的降解.结论 成功构建了溶酶体、泛素定位表达的PRNP核酸疫苗载体pcDNA3.1-UPrP、pcDNA3.1-PrPL,为PRNP核酸疫苗的研究奠定了一定的基础.     

人乳头瘤病毒16型长控制区域上YY1位点的缺失可增强病毒？…

目的 人乳头瘤病毒１６型早期启动子Ｐ９７控制着病毒癌基因的表达。为了观测长控制区结合位点的破坏对病毒转化能力的影响。方法 构建了带有自然发生突变ＬＣＲ序列的ＨＰＶ１６全基因质粒，利用ＥＭＳＡ和荧光素酶实验检测小鼠纤维细胞胞核内源性ＹＹ１蛋白存在和功能状态；将标准及突变的ＨＰＶ１毒株转染至Ｃ１２７细胞进行软琼脂糖培养基生长实验。结果 与上皮类细胞相似，在Ｃ１２７胞核提取物中可检出ＹＹ１蛋白，并且具有     

YYI蛋白对HPV16启动子P97的抑制效应依赖于上游？…

目的 观测位于ＨＰＶ１６ＬＣＲ序列ＹＹ１结合位点上游的组织特异性增强子序列对ＹＹ１蛋白的启动子Ｐ９７抑制作用的影响。方法 构建带有不同长度的ＨＰＶ１６野生株、启动子远端ＹＹ１位点突变株、启动子近端ＹＹ１位点突变株的５’端ＬＣＲ缺损序列的荧光素酶报导质粒，以及不同长度的近端ＹＹ１／ＳＰ１重叠结合位点基因工程突变ＬＣＲ的荧光素酶报导质粒；将各种质粒转染到人类子宫颈癌细胞系Ｃ３３Ａ中，检测在不同ＬＣＲ序