心复康对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧损伤酶及超微结构影响的实验研究

目的:观察心复康对心肌细胞缺血样损伤的保护作用,探讨其保护机理。方法:采用培养的大白鼠乳鼠心肌细胞,通过暂时停止供应心肌细胞生存必需的糖和氧,造成心肌细胞缺血样损伤,观察心复康对体外培养心肌细胞心肌酶及超微结构的影响。结果:心复康可明显降低培养液中心肌酶的活性,改善心肌结构的缺血样损伤。结论:心复康对心肌细胞的缺血样损伤具有保护作用。     

红芪多糖对培养人血管内皮细胞的影响

目的:观察红芪多糖对培养人血管内皮细胞的影响。方法:采用酶消化法,体外培养胎儿脐静脉血管内皮细胞,观察红芪多糖对内皮细胞在正常、高脂血清不同培养条件下的影响。结果:红芪多糖在正常和2％高脂血清培养条件下均有降低细胞内过氧化脂质含量、提高超氧化物歧化酶活力的作用(P<0.01);但当高脂血清浓度达5％时,此作用丧失。对内皮细胞孵育液中前列环素无显著影响,对血栓素 B_2在不同培养条件下均有降低作用(P<0.05),起到提高前列环素与血栓素 B_2比值的作用。结论:红芪多糖对内皮细胞有良好地保护作用,使其免受高脂血清的损伤作用,起到维护内膜屏障作用,防止动脉硬化的发生、发展。     

丹酚酸B、丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型内皮细胞功能的影响

【目的】探讨丹参水溶性成分丹酚酸B和脂溶性成分丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型内皮细胞功能的影响，以寻找其作用靶点。【方法】复制家兔动脉粥样硬化模型，放射性免疫方法检测血浆血栓素（TXB2）、6酮前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）,内皮素（ET）浓度，观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA对内皮细胞功能的影响。【结果】丹酚酸B能够减少动脉粥样硬化家兔血浆TXB2、ET浓度，增加6-keto-PGF1α浓度，丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化家兔血浆TXB2、6-ke-to-PGF1α、ET没有明显影响。【结论】丹参水溶性成分与脂溶性成分在治疗动脉粥样硬化过程中作用靶点及机制不同。     

救心胶囊对损伤内皮细胞黏附因子表达的影响

【目的】研究救心胶囊对缺氧和低密度脂蛋白（LDL）血管内皮细胞（EC）损伤的保护作用。【方法】采用体外细胞培养技术，制造缺氧和LDL内皮损伤模型。采用免疫组化方法观察救心胶囊对血管内皮黏附分子-1（VCAM-1）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的影响。【结果】在缺氧或者LDL状态下，内皮细胞黏附分了（VCAM-1，ICAM-1）表达显著增加。救心胶囊可明显地抑制内皮细胞黏附因子的表达率。【结论】救心胶囊对缺氧和LDL造成的内皮细胞有保护作用。     

调肝导浊中药对动脉粥样硬化家兔PDGF-A及其受体α表达的影响

[目的]探讨调肝导浊中药对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔模型血小板源性生长因子A链(PDGF-A)及其受体(PDGFR—α)表达的影响，以阐明其抗动脉粥样硬化的作用机制。[方法]采用高胆固醇饮食饲喂家兔，并在饲喂过程中依分组进行不同处理。实验结束后，处死动物取主动脉，用免疫组化方法检测PDGF—A、PDGFR—α的表达。[结果]AS模型组家兔主动脉PDGF—A、PDGFR—α阳性表达增强，而调肝导浊中药可有效降低其表达。[结论]调肝导浊中药可有效抑制高胆固醇饮食诱导的PDGF—A、PDGFR—α表达增强，从而阻止AS的发生发展。     

通络救脑注射液对Aβ_(1-40)致脑微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨通络救脑注射液及其有效成分对脑微血管内皮细胞的保护作用及机制。方法建立β淀粉样蛋白(Aβ_(1-40))致人脑微血管内皮细胞(h BMECs)损伤模型,用通络救脑注射液及其有效单体成分京尼平苷、人参皂苷Rg1干预,采用CCK-8染色法测定细胞活性,检测条件培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,Western blot法检测h BMECs高度糖基化终产物受体(RAGE)的表达。结果通络救脑注射液及其有效单体成分京尼平苷、人参皂苷Rg1可显著提高Aβ_(1-40)损伤的h BMECs活性,减少细胞损伤后LDH的漏出和h BMECs RAGE的表达,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论通络救脑注射液及其有效单体成分京尼平苷、人参皂苷Rg1可提高Aβ_(1-40)损伤的h BMECs的活性,对其具有保护作用,其机制可能与减少血管内皮细胞RAGE的表达有关。     

基于Treg细胞探讨补阳还五汤对动脉粥样硬化斑块的影响及机制

目的:从调节性T细胞(Treg)细胞和炎症角度探讨补阳还五汤(BYHWT)对动脉粥样硬化斑块影响及具体作用机制。方法:8周龄50只Apo E基因敲除(Apo E~(-/-))小鼠随机分为模型组,BYHWT组低、中、高剂量,雷帕霉素组,以C57/BL小鼠作为正常组。模型组,BYHWT组给予高脂饮食造模12周,正常组给予正常饮食。造模成功后,BYHWT低、中、高剂量组分别给予5,10,20 g·kg~(-1)BYHWT灌胃,雷帕霉素组给予促进Treg细胞增殖剂-雷帕霉素(4 mg·kg~(-1)),正常组和模型组给予等剂量生理盐水灌胃,所有组灌胃4周;4周后取心脏主动脉窦,制备成石蜡组织切片,采用苏木素-伊红(HE)染色法评价斑块面积,采用免疫组化评估斑块内Treg细胞表达数量。眼内眦取血,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测外周血炎症因子表达,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测外周血叉状头转录因子p3(Foxp3)mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组动脉粥样硬化斑块面积显著增加(P0.01),外周血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)含量均显著升高(P0.05),转化生长因子-β(TGF-β),白细胞介素-10(IL-10)明显降低(P0.05),外周血Foxp3 mRNA表达明显降低(P0.05);与模型组相比,BYHWT中、高剂量组斑块面积明显减小(P0.05),外周血TNF-α,IL-6含量降低(P0.01),BYHWT高剂量组TGF-β,IL-10表达增加(P0.05,P0.01),高剂量组斑块内Treg细胞表达增加(P0.01),各剂量组外周血Fxop3 mRNA表达增加(P0.01)。结论:BYHWT具有抗动脉粥样硬化作用,该作用可能与增加Treg细胞数量,进而抑制体内炎症反应有关。     

心复康含药血清对骨髓干细胞转录和分泌SDF-1α的影响

目的 研究心复康含药血清对骨髓干细胞（BMSCs）中间质源性细胞因子α（SDF-1α）mRNA表达和蛋白分泌的影响.方法 采用全骨髓培养法分离和扩增BMSCs,并用流式细胞仪进行鉴定.以定量PCR（q-PCR）和酶联免疫吸附测定法（ELISA）分别检测含药血清作用后BMSCs中SDF-1α mRNA表达和蛋白分泌的改变情况.结果 经心复康含药血清作用72 h后,SDF-1α mRNA的表达量明显增加,实验组约为对照组的200倍（P＜0.05）;SDF-1α蛋白分泌量增加近1倍（P＜0.05）,其中实验组为（277.561 1±15.651 8）pg/ml,对照组（153.107 1±14.765 1）pg/ml.结论 全骨髓培养法可获得高纯度的BMSCs,含药血清可明显促进SDF-1αmRNA的表达及其蛋白分泌.     

高糖高脂诱导脐静脉内皮细胞凋亡及对线粒体膜电位的影响

[目的]明确糖基化终末产物(AGEs)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)联合诱导内皮细胞凋亡及其作用机制。[方法]以AGEs和ox-LDL联合作用人脐静脉内皮细胞24 h,hochest33258染色后观察凋亡,Rhodamin123染色后流式细胞术检测线粒体膜电位。[结果]研究表明AGEs和ox-LDL共同作用可增加内皮细胞的凋亡率,降低内皮细胞线粒体膜电位。[结论]提示高糖高脂促进内皮细胞凋亡,可能和降低线粒体膜电位有关。     

大鼠脾气虚型慢性萎缩性胃炎动物模型的实验研究—胃粘膜病理形态及超微结

本研究采用２％水杨酸钠溶液灌胃及饥饱失常、劳倦过度等方法，塑造大鼠脾气虚型ＣＡＧ模型，对其胃粘病理形态及超微结构的观察结果表明：模型大鼠胃粘膜出现慢性萎缩性胃炎样改变，部分动物出现明显的肠上皮化生，其超微结构也显示相应病变，结合宏观表现和功能代谢的观察结果，证明该动物模型的塑造是成功的，为中西医结合研究脾气虚型ＣＡＧ的病证演变规律提供了较为可靠的手段。