骨髓间充质干细胞与丹酚酸B预处理内皮祖细胞共移植对急性心肌梗死大鼠心功能及分化基因表达的影响

背景:由于心肌细胞自身增殖能力有限,急性心肌梗死后细胞移植是目前流行的再生心肌方法.骨髓间充质干细胞的存活受心肌微环境的影响,而内皮祖细胞参与血管新生,可为骨髓间充质干细胞提供微环境. 目的:探讨骨髓间充质干细胞联合中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞共移植后,对急性心肌梗死大鼠心功能改善及骨髓间充质干细胞分化早期基因表达的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-01/2008-03在天津中医药大学完成.材料:清洁级雄性Wistar大鼠45只,由中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供.丹酚酸B为天津天士力现代中药资源有限公司产品,批号 20060601.方法:分别取2只和1只大鼠,采用密度梯度离心法+贴壁筛选法分离培养纯化内皮祖细胞、骨髓间充质干细胞.剩余42只大鼠随机分为4组:假手术组9只、模型组11只、骨髓间充质干细胞组12只、共移植组10只.假手术组只开胸穿线,不结扎左冠状动脉;其余3组结扎左冠状动脉建立心肌梗死模型.结扎冠状动脉15 min后再次开胸,共移植组吸取骨髓间充质干细胞悬液250 μL(浓度1×1010L-1)+8mg/L丹酚酸B预处理的内皮祖细胞悬液250 μL(浓度1×108L-1),于结扎区附近心肌组织分5点注射:骨髓间充质干细胞组同法注射单纯骨髓间充质干细胞悬液500μL,模型组注射等量细胞培养液.主要观察指标:采用超声心动仪测定左室功能,Real-time PCR检测心肌分化基因Nkx2.5,GATA-4的表达.结果:细胞移植4周后与模型组比较,骨髓间充质干细胞组左室结构有改善趋势,但差异无显著性意义(P>0.05);共移植组左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、舒张末期室间隔厚度、收缩末期室间隔厚度均明显改善(P＜0.05),心室收缩功能指标射血分数、心输出量均明显改善(P<0.05).细胞移植4周后与模型组比较,骨髓间充质干细胞组、共移植组Nkx2.5及GATA-4 mRNA表达均明显增加,且共移植组Nkx2.5 mRNA增加幅度明显大于骨髓间充质干细胞组(P<0.05).结论:骨髓间充质干细胞联合丹酚酸B预处理的内皮祖细胞共移植方式,可上调骨髓间充质干细胞向心肌分化过程中Nkx2.5,GATA-4基因的表达,改善急性心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能.     

疏肝活血方对体外培养主动脉平滑肌细胞影响的实验研究

疏肝活血方对体外培养主动脉平滑肌细胞影响的实验研究范英昌，胡利民，陆融（天津中医学院）动脉粥样梗化（Ａｓ）是当今社会发病率最高、危害最大的疾病之一。多年来，人们对Ａｓ的病因病理从多方面进行了深入研究，以期揭示其病因病理，从而寻找出有效的防治手段。平滑...     

心复康联合骨髓间充质干细胞对心脏干细胞CD31和VEGFR2蛋白表达的影响

[目的] 观察心复康联合骨髓间充质干细胞(BMSC)调节心脏干细胞(CSC)内皮细胞标记物CD31(CD31)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的蛋白表达。[方法] 原代获取BMSC,制备并鉴定心复康含药血清,酶联免疫吸附法(ELISA法)检测心复康对BMSC分泌基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)的影响。组织块贴壁法分离CSC,并行流式细胞分选及免疫荧光鉴定。利用Transwell小室建立细胞共培养体系,实验分为对照组、心复康组、抑制剂组,蛋白质印迹法(Western Blot)分析各组CSC的CD31和VEGFR2蛋白表达情况。[结果] 与另两组相比,心复康组CSC的CD31和VEGFR2蛋白表达显着增高,差异有统计学意义(P<0.05).[结论] BMSC经心复康干预后,可促进CSC的CD31和VEGFR2蛋白表达,提示SDF-1α/CXCR4轴为其作用机制之一。     

丹酚酸B对大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中Desmin、α-actinmRNA表达的影响

[目的]探讨丹参单体丹酚酸B(SalB)在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的情况及Desmin和α-actin mRNA的表达,确定大鼠MSCs体外诱导为心肌样细胞的条件、规律及转化细胞的特点。[方法]选用成年近交系Wistar大鼠,利用percoll分离液进行密度梯度离心法和直接贴壁法进行分离、提纯MSCs,并进行培养扩增。免疫组化方法对第9代MSCs表面抗原进行鉴定。分别应用10μmol/L5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)及250μg/LSalB联合5-aza(5-aza+SalB)对第9代的MSCs进行联合诱导24h,于诱导后第4周,用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Desmin、α-actin mRNA的表达。[结果]1)第9代MSCs免疫组化染色CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达。2)诱导4周后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构。5-aza组、5-aza+SalB组均出现明确的心肌早期分化基因与5-aza组相比,5-aza+SalB组的Desmin和α-actin mRNA表达明显增强。[结论]SalB具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用。     

心脑血脉宁对家兔易损斑块模型血脂NF-κB和ICAM-1 mRNA表达的影响

目的:探讨心脑血脉宁对家兔易损斑块NF-κBmRNA、ICAM-1mRNA的表达和血脂的影响。方法:通过球囊拉伤主动脉内皮配合高脂饲料喂养复制家兔易损斑块模型。术后1周始,给予心脑血脉宁口服12周,于处死前24h和48h,分别予以药物触发斑块破裂,触发前收集血液,测定血脂水平。处死后切取斑块,采用实时定量RT-PCR法测定NF-κBmRNA、ICAM-1mRNA的表达。结果:心脑血脉宁可以有效降低血清TG、TC、LDL水平,提高HDL水平;抑制NF-κB和ICAM-1mRNA的表达。结论:调节血脂水平,抑制炎症反应是心脑血脉宁稳定斑块的机制之一。     

学高为师，德高为范

教师是一个特殊的职业，它的对象是人，产出的是对社会有用有益的人才，教育的新理念是以人为本。人在创造社会的同时也在创造自我：学高为师。德高为范，这就组成了师范两字。这是我国教育的两个最高理想境界，一个是对知识的追求，一个是对品德的讲究。     

星形胶质细胞介导的胶质-血管耦合与AD血脑屏障破坏的关系

血脑屏障(BBB)破坏作为β淀粉样蛋白(Aβ)级联学说的上游或下游事件促进阿尔茨海默病(AD)的发生。BBB特征的维持依赖于星形胶质细胞(AC)介导的胶质-血管耦合。AD时,AC极性状态及旁分泌功能改变,影响胶质-血管耦合,可能参与BBB破坏进程。近年来,水通道蛋白4(AQP4)的极性分布及Sonic Hedgehog(SHH)信号在AC介导的胶质-血管耦合中的作用备受关注。文章从AC的AQP4极性分布及旁分泌SHH因子在BBB特征中的作用及AC病理改变与BBB破坏间的关系进行综述,并提出改善AC对Aβ的反应,调控胶质-血管耦合将是保护BBB防治AD的新思路。     

射血分数正常心力衰竭的中医辨治进展

射血分数正常的心力衰竭,已成为基础研究和临床研究的热点。随着诊疗技术的提高,射血分数正常心力衰竭在临床上越发常见,其机制研究尚待深入。近年来中医药对该病的认识逐渐深入,并在治疗上取得良好效果。     

《金匮要略》大黄甘遂汤对小鼠实验性肝纤维化治疗作用的实验研究

[目的]观察研究《金匮要略》大黄甘遂汤对四氯化碳(CCl₄)导致的小鼠肝纤维化的治疗作用及机制。[方法]昆明种小鼠42只随机分为3组,正常组、模型组、治疗组。除正常组外,其余两组依高连相法改进后造模,观察53d后各组小鼠肝脏病理、脾脏质量及体质量变化。[结果]光镜下每高倍镜视野贮脂细胞密度,造模组明显高于其他两组(P<0.01)。脾脏质量各组间无显著性差异(P>0.05)。小鼠体质量,正常组明显高于其他两组(P<0.01)。[结论]大黄甘遂汤对CCl₄导致的小鼠肝纤维化有明显的治疗作用,其机制可能与抑制了贮脂细胞的激活和转化,减少了成纤维细胞的生成有关。     

丹酚酸B对离体培养内皮祖细胞VEGF、bFGF mRNA表达及抗氧化酶活性的影响

目的 探讨中药单体丹酚酸B对离体培养内皮祖细胞(EPCs)细胞因子mRNA表达及抗氧化酶活性的影响.方法 密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs,免疫细胞化学法鉴定.选择丹酚酸B最佳药物浓度干预的EPCs,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞VEGF,bFGF mRNA表达,测定细胞培养液抗氧化酶SOD,GSH-Px的活性.结果 丹酚酸B组VEGF,bFGF mRNA的表达量增加,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).丹酚酸B组细胞培养液中SOD活性增强,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);GSH-Px活性有增强趋势,但与对照组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 丹酚酸B对EPCs具有保护作用,增强其细胞功能的部分机制与其增强分泌细胞因子VEGF和bFGF mRNA的表达,并且促进细胞释放SOD、GSH-Px,清除自由基能力增强有关.