疏肝活血方对体外培养主动脉平滑肌细胞影响的实验研究

疏肝活血方对体外培养主动脉平滑肌细胞影响的实验研究范英昌，胡利民，陆融（天津中医学院）动脉粥样梗化（Ａｓ）是当今社会发病率最高、危害最大的疾病之一。多年来，人们对Ａｓ的病因病理从多方面进行了深入研究，以期揭示其病因病理，从而寻找出有效的防治手段。平滑...     

丹酚酸B对离体培养内皮祖细胞VEGF、bFGF mRNA表达及抗氧化酶活性的影响

目的 探讨中药单体丹酚酸B对离体培养内皮祖细胞(EPCs)细胞因子mRNA表达及抗氧化酶活性的影响.方法 密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs,免疫细胞化学法鉴定.选择丹酚酸B最佳药物浓度干预的EPCs,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞VEGF,bFGF mRNA表达,测定细胞培养液抗氧化酶SOD,GSH-Px的活性.结果 丹酚酸B组VEGF,bFGF mRNA的表达量增加,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).丹酚酸B组细胞培养液中SOD活性增强,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);GSH-Px活性有增强趋势,但与对照组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 丹酚酸B对EPCs具有保护作用,增强其细胞功能的部分机制与其增强分泌细胞因子VEGF和bFGF mRNA的表达,并且促进细胞释放SOD、GSH-Px,清除自由基能力增强有关.     

骨髓间充质干细胞与丹酚酸B预处理内皮祖细胞共移植对急性心肌梗死大鼠心功能及分化基因表达的影响

背景:由于心肌细胞自身增殖能力有限,急性心肌梗死后细胞移植是目前流行的再生心肌方法.骨髓间充质干细胞的存活受心肌微环境的影响,而内皮祖细胞参与血管新生,可为骨髓间充质干细胞提供微环境. 目的:探讨骨髓间充质干细胞联合中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞共移植后,对急性心肌梗死大鼠心功能改善及骨髓间充质干细胞分化早期基因表达的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-01/2008-03在天津中医药大学完成.材料:清洁级雄性Wistar大鼠45只,由中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供.丹酚酸B为天津天士力现代中药资源有限公司产品,批号 20060601.方法:分别取2只和1只大鼠,采用密度梯度离心法+贴壁筛选法分离培养纯化内皮祖细胞、骨髓间充质干细胞.剩余42只大鼠随机分为4组:假手术组9只、模型组11只、骨髓间充质干细胞组12只、共移植组10只.假手术组只开胸穿线,不结扎左冠状动脉;其余3组结扎左冠状动脉建立心肌梗死模型.结扎冠状动脉15 min后再次开胸,共移植组吸取骨髓间充质干细胞悬液250 μL(浓度1×1010L-1)+8mg/L丹酚酸B预处理的内皮祖细胞悬液250 μL(浓度1×108L-1),于结扎区附近心肌组织分5点注射:骨髓间充质干细胞组同法注射单纯骨髓间充质干细胞悬液500μL,模型组注射等量细胞培养液.主要观察指标:采用超声心动仪测定左室功能,Real-time PCR检测心肌分化基因Nkx2.5,GATA-4的表达.结果:细胞移植4周后与模型组比较,骨髓间充质干细胞组左室结构有改善趋势,但差异无显著性意义(P>0.05);共移植组左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、舒张末期室间隔厚度、收缩末期室间隔厚度均明显改善(P＜0.05),心室收缩功能指标射血分数、心输出量均明显改善(P<0.05).细胞移植4周后与模型组比较,骨髓间充质干细胞组、共移植组Nkx2.5及GATA-4 mRNA表达均明显增加,且共移植组Nkx2.5 mRNA增加幅度明显大于骨髓间充质干细胞组(P<0.05).结论:骨髓间充质干细胞联合丹酚酸B预处理的内皮祖细胞共移植方式,可上调骨髓间充质干细胞向心肌分化过程中Nkx2.5,GATA-4基因的表达,改善急性心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能.     

丹酚酸B对AGEs诱导高脂内皮细胞凋亡的保护作用

目的：探讨丹酚酸B对糖基化终末产物（AGEs）诱导高脂内皮细胞凋亡的保护作用。方法：以AGEs和氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）联合作用诱导人脐静脉内皮细胞凋亡,通过hochest 33258染色,观察不同浓度丹酚酸B（10-4、2×10^-4mol/L）作用不同时间（12、24、36、48、72h）,对内皮细胞凋亡的影响。结果：研究表明丹酚酸B能够明显抑制AGEs诱导高脂内皮细胞凋亡,并有一定剂量效应性和时间效应性。结论：提示丹酚酸B对防治糖尿病合并动脉粥样硬化具有一定作用。     

丹酚酸B预处理EPCs对AMI大鼠移植骨髓间充质干细胞后心肌微环境的影响

[目的]探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)大鼠移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)后心肌微环境的影响。[方法]56只AM I模型大鼠随机分为假手术组、模型组、BM SCs组、EPCs+BM SCs组,其中治疗组用丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs与BM SCs混合,在大鼠AM I区周边分5点注射。免疫荧光和免疫组化方法检测AM I大鼠梗死区心肌收缩蛋白α型肌球蛋白重链(α-MHC)和I型胶原蛋白的表达。[结果]细胞移植4周后,各细胞联合移植组中,2:14、:1和8:1组在Brdu集中表达区域均有不同强弱程度的α-MHC阳性表达,除假手术组较少外,所有接受冠状动脉结扎的大鼠心肌梗死区I型胶原表达均升高。[结论]BMSCs在丹酚酸B预处理的EPCs干预的心肌微环境下可向心肌细胞分化,可预防或改善心室重塑的发生。     

通络救脑注射液对Aβ致脑微血管内皮细胞损伤的保护作用

摘要：目的 通过观察复方通络救脑注射液及其单体成分对Aβ损伤脑微血管内皮细胞活性及其受体高度糖基化终产物（RAGE）表达的影响，探讨其对脑微血管内皮细胞的保护作用。方法 采用人脑微血管内皮细胞 (BMECs)，培养液中加入Aβ淀粉样蛋白建立脑微血管内皮细胞损伤模型，复方通络救脑注射液及其有效单体成分在不同的时间段进行干预，采用CCK-8染色法测定细胞活性，采用乳酸脱氢酶漏出量检测细胞损伤程度，免疫蛋白印迹法检测脑微血管内皮细胞RAGE 的表达。结果 复方通络救脑注射液可显著提高Aβ损伤的脑微血管内皮细胞活性，减少细胞损伤后LDH的漏出和脑微血管内皮细胞RAGE的表达，与模型组相比， 差异具有统计学意义（P<0.01），复方注射液作用明显优于两个单体成分。结论 复方通络救脑注射液可提高Aβ损伤的脑微血管内皮细胞的活性，对其具有保护作用，其机制可能与减少血管内皮细胞RAGE 的表达有关，中药复方的作用优于有效单体成分。     

高脂饮食对氧化修饰低密度脂蛋白和巨噬细胞集落刺激因子影响的实验研究

目的：探讨高脂饮食引起动脉粥样硬化的机理。方法：采用高脂饮食喂养小鼠，用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中OX－LDL含量；用RT－PCR法检测小鼠腹腔M－CSF mRNA的表达。结果：高脂刺激动物体内OX－LDL含量增加和M－CSF mRNA的表达的增强。结论：高脂刺激动物体内OX－LDL、M－CSF含量的升高，加速动脉粥样硬化的形成。     

Experimental study on antiatherosclerotic treatment by PGE2 combined with vitamin E and estradiol.

The effects of single dose of PGE2 combined with vitamin E and with estradiol on experimental atherosclerosis were studied by means of morphological, ultrastructural, autoradiographic and several functional techniques. The results showed that two combined treatment groups had more coordinative inhibition on aortic and coronary atherosclerotic lesions, as well as on platelet aggregation, smooth muscle cell proliferation and lipid peroxidation than that of single dose of PGE2. It was revealed that the coordinative mechanism might be closely related to the synergistic inhibitory function of above-metioned drugs on endothelial permeability, platelet aggregation, smooth muscle cell proliferation and lipid peroxidation.     

五参方对疲劳紧张所致老年前期大鼠脑MAO-B活性的影响

老年前期是人类45～59岁年龄阶段,是人体由盛至衰的转折时期,老年前期的抗衰防老应该成为现代老年医学研究的一个重要方面。而老年前期的主要致衰因素存在特殊性,如心理生理的过度疲劳导致机体脏器功能失调等,本研究主要探讨疲劳紧张对老年前期大鼠脑MAO-B活性的影响和中?..