热休克蛋白70在肝细胞癌中的表达及作用

热休克蛋白(HSP)70在肝细胞癌(HCC)组织中呈不同程度的表达,其表达及调节机制尚不清楚,能否为HCC的早期诊断、治疗及预后提供帮助成为学者们研究的热点。从HSP70来源及家族、在HCC中的异常表达、与HCC各种治疗方法及其预后相关性等方面进行了综述,旨在为HCC的临床诊断及治疗提供帮助。     

慢性乙型肝炎患者基因耐药变异的病毒学及血清学分析

目的：探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者应用核苷（酸）类似物治疗后基因耐药变异的病毒学及血清学变化。方法选择2010年6月至2011年12月北京军区总医院287例CHB患者,按照服用拉米夫定（LAM）、阿德福韦酯（ADV）、替比夫定（LdT）和恩替卡韦（ETV）分为4组。定期检测血清HBV DNA载量与ALT水平,用聚合酶链反应-逆向点杂交法检测血清HBV DNA耐药变异位点。结果 LAM治疗后24个月耐药率为41.9%（31/74）;ADV耐药率为7.7%（7/91）;LdT耐药率为10.8%（4/37）;ETV耐药率较低,为2.3%（2/85）。 CHB患者抗病毒基因耐药变异组ALT异常率（27.3%）明显高于未变异组（9.9%）,差异有统计学意义（P 〈0.05）;未变异组HBV DNA转阴率（62.6%）明显高于变异组（20.5%）,差异有统计学意义（P 〈0.05）。结论 LAM、ADV、LdT和ETV均会出现不同程度的耐药变异。定期进行基因耐药检测有助于及时调整治疗方案,提高疗效。     

逆转录病毒载体携带HBV载体表达显性阴性突变体抗HBV作用的研究

目前基因治疗尚未见取得满意的临床疗效 ,所遇到的主要障碍是载体缺乏导向性及难以向众多的靶细胞导入足量的目的基因。为探索ＨＢＶ作为载体用于抗ＨＢＶ治疗的作用 ,构建了两种表达突变型ＨＢＶ的载体。一个是ＨＢＶ ＣＰ在核心蛋白末端与Ｐ蛋白重叠区引入突变点 ,使其形成融合蛋白 ,即假核心蛋白 ;另一个是ＨＢＶ ＣＳ把核心蛋白至表面抗原间区域删除 ,也形成融合蛋白 ,利用假核心蛋白干扰野生型ＨＢＶ的包装。由于ＨＢＶ在细胞培养条件下很难感染其它细胞 ,因而用逆转录病毒作载体 ,使其在细胞内表达突变型ＨＢＶ前基因组ｍＲ ＮＡ ,后…     

丙型肝炎患者外周血单个核细胞内HCV感染与干扰素疗效反应

干扰素(IFN)已广泛用于丙型肝炎的治疗,但持续应答者仅占少数,短期应答者居多,且停止治疗后易复发,无应答者占相当比例.     

重组逆转录病毒转导HBV载体表达显性阴性突变体抗HBV作用的研究

目的 探讨重组逆转录病毒转导HBV载体表达显性阴性突变体的抗HBV作用.方法 在逆转录病毒载体中插入两种不同类型表达显性阴性突变体的HBV基因复制单元,制备重组逆转录病毒pRV-CP、pRV-CS和空载体G1Na对照,并转染HepG2.2.15细胞,ELISA法检测细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg,斑点杂交法检测细胞内HBV核壳中HBV DNA,PCR检测上清液中重组HBV颗粒.结果 转染HepG2.2.15细胞后3 d、5 d、7 d、9 d和11 d,pRV-CP、pRV-CS和G1Na对照组对HBsAg表达的平均抑制率分别为(28.9±4.73)%(P＜0.01)、(39.3±7.04)%(P＜0.01)和(2.6±3.77)%;对HBeAg表达的平均抑制率分别为(40.38±2.59)%(P＜0.01)、(33.1 4±4.27)%(P＜0.01)和(3.1±3.02)%;对HBV复制的抑制率分别为67.2%和55.8%,对照组为13.4%.只有pRV-CP组培养上清液中检测出突变型HBV颗粒.结论 重组逆转录病毒能转导HBV载体表达显性阴性突变体,对HBV复制及抗原表达有抑制作用,有望用于抗HBV治疗.     

应用自制简易穿刺引流管治疗胸腹腔积液患者的临床观察

目的探讨自制穿刺引流管治疗胸腹腔积液的价值。方法给予自制引流管穿刺放液治疗200例胸腹腔积液患者。结果治疗后患者生活质量与临床症状得到明显改善；有效139例，显效53例，无效8例，总有效率96％；以胸腔积液为主的患者治疗后其心率、呼吸频率逐渐恢复正常，以腹腔积液为主的患者治疗后其腹围减少、体重下降明显（P〈0．05）；肾素、血管紧张素及醛固酮水平有明显下降，24小时尿量增加明显（P〈0．01）；血浆蛋白上升、肌酐下降。结论应用自制穿刺引流管治疗胸腹腔积液疗效较好，制作简单，安全方便。     

小鼠骨髓干细胞诱导分化为肝细胞的实验研究

目的探讨成年小鼠骨髓干细胞在肝细胞生长因子(HGF)作用下分化为肝细胞的可能性及其分化特性，为肝细胞移植提供实验基础。方法HGF100ng／ml体外诱导小鼠骨髓干细胞向肝细胞分化，于诱导的第0、7、l4、21、28天，观察细胞形态特征；半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)mRNA水平的表达；免疫细胞化学法检测ALB、AFP和细胞角蛋白l9(CK19)蛋白水平的表达。结果新鲜分离的骨髓干细胞ALB及AFP mRNA呈弱阳性。在非诱导组，培养7d时ALB mRNA已检测不到，AFP mRNA明显减弱，14d时消失。在诱导组，7d时ALB mRNA检测不到，14d时再次出现阳性条带，21d时表达量最大，而AFP mRNA在诱导组始终呈阳性，14d时表达量最大，以后逐渐减少。免疫细胞化学结果与RT-PCR结果基本一致，但CK19蛋白始终阴性。结论小鼠骨髓干细胞在HGF单独作用下能诱导分化为肝细胞样细胞，诱导分化的最佳时期是2～3周。     

反义基因治疗乙型肝炎研究近况

反义技术为乙型肝炎治疗提供了新策略,其中反义RNA与核酶最具代表性.HBV的S与C区似乎是反义RNA抗HBV的最佳靶区;核酶库的构建、核酶的改造及多聚体核酶的设计促进了核酶抗HBV的研究进展.HBV感染动物模型研究有助于推动反义基因治疗乙型肝炎向临床的过渡.     

原发性肝细胞癌中乙型肝炎病毒X抗原表达的分析

我们前已报道用抗ＨＢＶｘ抗原（ＨＢｘＡｇ）三种不同肽段的抗体检出肝癌细胞中ＨＢｘＡｇ的存在。我们用ＰＣＲ技术扩增肝癌肝组织中的ｘ基因，用重组ＨＢｘＡｇ及其抗体分别检测肝癌患者血清中的抗ＨＢｘ和ＨＢｘＡｇ并用免疫组织化学的方法分析肝组织中ＨＢｘＡｇ的表达及其分布。我们发现ＨＢｘＡｇ在肝癌肝组织中阳性率高达９２．６％而且分布广泛，主要表达在细胞浆，但细胞核内亦有见到。癌旁组织检出率也很高，而且在小胆管上皮细胞内亦见有ＨＢｘＡｇ的存在。研究结果表明ＨＢｘＡｇ的表达与肝癌有密切关系