HBV阳性血清对胎盘滋养层细胞的影响研究

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)阳性血清对体外培养胎盘滋养层细胞的影响。方法体外培养胎盘滋养层细胞(JEG-3),应用HBV阳性血清处理,分别于处理后24 h、48 h和72 h采用免疫组织化学SP法检测细胞中HBsAg蛋白的表达,PCR法检测细胞中HBV DNA,annexinⅤ/PI双标法检测细胞凋亡和坏死,透射电镜观察细胞超微结构的变化并寻找病毒颗粒。结果 HBV阳性血清处理后24～72 h,JEG-3细胞中HBsAg和HBV DNA呈阳性;处理后48 h,细胞坏死率显著增加(P<0.01),凋亡率无明显变化(P>0.05);细胞超微结构显示,JEG-3胞浆内出现较多空泡状结构,溶酶体明显增多,并可见病毒样颗粒。结论 HBV阳性血清可导致体外培养胎盘滋养层细胞的HBV感染,引起胎盘滋养层细胞损伤。     

血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝细胞癌中的表达及其与临床病理因素的相关性

目的 初步探讨肝细胞癌（HCC）患者血清和组织中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）在HCC诊断中的临床应用价值.方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法和免疫组织化学染色法检测79例HCC患者血清和组织中GPC3表达水平,并与35例肝炎后肝硬化患者和30例健康体检者GPC3含量检测结果进行比较,采用Logistic回归模型对HCC患者GPC3表达水平与影响因素进行分析.结果 HCC组患者血清GPC3水平[（143.02±40.26） μg/L]明显高于肝硬化患者组[（6.15±4.31） μg/L]和健康对照组[（4.47±3.22）μg/L],三组间比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）;GPC3阳性表达水平在HCC组织高于癌旁和远癌肝组织;GPC3蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤大小及甲胎蛋白（AFP）水平无明显相关性;与临床分期（x2 =4.250,P＜0.05）及肿瘤有无远处转移（x2=13.182,P＜ 0.001）关系密切.结论 GPC3检测对于HCC的诊断具有较好的特异性,联合血清AFP更有利于提高HCC诊断的敏感性,可作为HCC患者诊断及预后评估的标志物.     

乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测与HBV-DNA及血清标志物的相关性分析

目的 探讨乙型肝炎病毒外膜大蛋白(LHBs)与乙肝病毒血清标志物及HBV-DNA之间的相关性及临床意义.方法 采用酶联免疫吸咐试验(ELISA)和实时荧光定量PCR法分别检测396例慢性乙型肝炎患者血清中LHBs,HBV-M和HBV-DNA并进行相关性分析.结果 在HBeAg阳性的143例患者中HBV-DNA和LHBs的检出率分别为93.0%和96.5%;抗HBe阳性的191例中,分别为63.9%和59.2%;在HBsAg阳性、抗HBc阳性的62例中分别为50.9%和38.6%;慢性乙型肝炎轻度193例,中度119例,重度84例,其乙肝病毒包膜大蛋白阳性率分别为57.2%,63.9%和59.5%,三组之间比较差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 血清LHBs水平能够反映HBV感染者体内HBV-DNA复制程度,其灵敏度高于HBV-DNA,可作为病毒复制观察的新的血清学指标.     

一例HBV/HDV重叠感染患者血清中HDAg的基因克隆、表达及细胞内定位

丁型肝炎病毒( hepatitis Dvirus,HDV)属于缺陷病毒,其借助乙型肝炎病毒(H BV)的核壳蛋白完成自身生命周期.研究已证实,HDV感染可抑制机体内HBV的复制,但临床上却加剧病情迅速恶化.HDV的基因组仅含1个开放读码框架,分别编码S-HDAg和LHDAg两种功能蛋白.尽管两者在蛋白结构上基本相似,但功能截然相反,因此探讨HDAg某些特殊或重要功能结构域仍是该领域研究热点.基于此,我们从1例HBV/HDV重叠感染患者血清中成功克隆出了HDAg基因,并对其蛋白的生物学特点进行了初步分析.     

有限稀释定量PCR检测血清HBV-DNA的临床应用及意义

探讨有限稀释定量ＰＣＲ用于临床检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，及其对干扰素抗病毒治疗的指导意义。利用有限稀释定量ＰＣＲ技术分别检测３８例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ双阳性患者α－２ｂ干扰素治疗前后血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量，观察检测结果对治疗的指导意义。３８例患者干扰素治疗１２周ＨＢＶ－ＤＮＡ阴转７例（１８．４％）；治疗２４周阴转１１例（２８．９％）。其中病毒滴度〉２５０ｐｇ／ｍｌ者阴转１１．１％（１／９）；病毒滴     

多项肿瘤标志物蛋白芯片在原发性肝癌诊断上的应用

目的探讨多项肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对原发性肝癌的诊断价值.方法采用蛋白芯片检测技术,对93例原发性肝癌、71例非癌性肝病、49例健康献血员血清中的12种肿瘤标志物进行定量分析.结果对原发性肝癌诊断的敏感性为88.1%,特异性为87.3%.原发性肝癌组与非癌性肝病组比较差异显著(P＜0.01).结论多项肿瘤标志物蛋白芯片检测系统可用于对肝癌高危人群的筛查,联合多因素分析亦有助于原发性肝癌的早期诊断.     

补气活血利水方联合腹水浓缩回输治疗肝硬化顽固性腹水45例

目的：观察补气活血利水方联合自体腹水浓缩回输治疗肝硬化顽固性腹水的效果。方法将2013年1—11月北京军区总医院全军肝病治疗中心收治的肝硬化顽固性腹水90例分为观察组与对照组,每组45例。两组均给予常规治疗和腹水浓缩回输治疗,观察组在此基础上加用补气活血利水方药。观察两组临床疗效、肝肾功能、体液及细胞免疫功能变化。结果观察组总有效率高于对照组(P<0．05),肝功能和免疫学指标改善情况优于对照组(P<0．05)。两组肝肾功能和免疫指标均较治疗前改善(P<0．05)。结论补气活血利水方联合腹水浓缩回输可以明显改善肝硬化顽固性腹水患者的肝肾功能,且能提高其体液和细胞免疫功能。     

糖耐量筛查对空腹血糖正常肝硬化的诊断价值

目的：探讨糖耐量筛查在空腹血糖正常的肝硬化患者中的临床意义。方法选择2011年1月—2013年12月于北京军区总医院全军肝病治疗中心就诊的空腹血糖正常肝硬化患者312例作为观察组,选取312例同期在门诊进行体检的健康人作为对照组,比较两组口服葡萄糖耐量试验不同时点的血糖和胰岛素释放水平,观察组不同Child-pugh分级与不同时点血糖和胰岛素水平的关系。结果观察组糖耐量异常率为81.09%。观察组口服葡萄糖后30 min、1和2 h血糖和胰岛素水平以及空腹胰岛素水平均高于对照组( P<0．05),且胰岛素释放高峰较对照组延迟。观察组不同Child-pugh分级患者口服葡萄糖后各时点血糖和胰岛素水平以及空腹胰岛素水平均由A级到C级逐渐增高(P<0．05)。结论空腹血糖正常的肝硬化患者常出现糖耐量异常,糖耐量筛查可作为临床诊断肝硬化的辅助指标。     

肿瘤特异性生长因子测定在肝癌诊断中的应用及AFP的比较

恶性肿瘤特异性生长因子（tumor specific growth factor,TSGF）是近年来研究发现的一种与恶性肿瘤血管增殖有关的因子。在肿瘤的发生中起重要作用^[1]。因此，TSGF可作为一种肿瘤标记物而为临床应用。为了解肝癌、肝硬化病人血清中TSGF水平及肝癌标记物AFP的相关性，我们检测了肝癌和肝硬化患者血清中TSGF的水平。现报告如下。     

乙型肝炎病毒感染者血清肝特异性自身抗体的检测及临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者血清肝特异性自身抗体的检出率及临床意义。方法采用间接免疫荧光法检测186例慢性HBV感染者血清肝特异性自身抗体,回顾性分析AST、ALT、ALP和GGT等生化指标与自身抗体检出率的相关性。结果在186例慢性HBV感染者中检出自身抗体阳性66例（35.5%）;在60例HBV携带者、74例慢性肝炎和52例肝硬化患者肝特异性抗核抗体（ANA）检出率分别为25.0%、24.3%和21.2%,明显高于30例健康对照人群（6.6%,P＜0.05）;自身抗体阳性者以低滴度为主,主要以抗核抗体（ANA）和类风湿因子（RF）阳性为主,免疫荧光模式以“均质型”和“颗粒型”为主;66例自身抗体阳性的HBV感染者血清ALT、AST、ALP和GGT分别为268.4±213.6u/L、241.5±21.3.0u/L、287.2±175.0u/L和168.9±54.7u/L,均显著高于120例自身抗体阴性者（分别为130.8±29.0u/L、118.2±27.3u/L、142.0±63.5u/L和36.5±17.2 u/L,P〈0.01）。结论慢性HBV感染可诱导自身免疫反应而有可能产生多种自身抗体,后者的检出率与肝功能指标显著相关,可能是感染HBV后肝组织损伤的重要因素。