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目的 评价血清维生素D结合蛋白(vitamin D binding protein,VDBP)用于大鼠肝毒性诊断的价值。方法 用酮康唑(ketoconazole,KTZ)、四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)和对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)在雄性大鼠中构建3种肝毒性模型,在不同时间点从腹腔大静脉采集外周血,3 000 r/min离心制备血清。用ELISA法测定血清中VDBP含量,用全自动生化分析仪测定血清中的丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、总胆汁酸(total biliary acid,TBA)、胆碱酯酶(cholinesterase,CHE)、谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GLDH)、5'核苷酸酶(5'-nucleoticlase,5'-NT)、单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)和苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase,MDH)含量。实验组与对照组进行t检验分析,检查指标值的差异是否具有统计学意义。结果 在CCl4肝毒性模型中,与对照组相比,ALT,AST,TBIL和CHE在CCl4给药后4 h起升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。GLDH,MAO和MDH在给药后6 h起升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。在KTZ肝毒性模型中,与对照组相比,ALT在KTZ给药6天后升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。AST和TBIL在给药后8天升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。在APAP肝毒性模型中,与对照组相比,ALP在APAP给药后4 h和8 h点升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。CHE在给药后8 h点升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。ALT和TBIL在给药后24 h点升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。在3种肝毒性模型中,VDBP含量在给药后的所有时间点都降低,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论 VDBP比其它肝功能指标能更灵敏地预测肝毒性的发生。 相似文献
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目的总结病毒载体疫苗非临床生物分布研究的关键点,提高疫苗生物分布研究水平。方法依据文献、指导原则和实验室经验,分析实时荧光定量聚合酶链式反应(Q-PCR)和取材组织选择、取材时间点设定以及交叉污染预防措施等动物实验设计环节的关键质量控制点。结果生物分布研究应采用实时荧光定量PCR技术,并对核苷酸序列、扩增反应特异性、灵敏度、抑制因子及反应条件进行验证。对于动物实验部分,各时间点、各组及不同性别一般3~5只动物;给药途径、制剂和剂量应和预期临床应用一致;在给药后数天至数月的不同时间点进行组织取材;采取有效的方法预防组织间交叉污染。结论研究过程中的每个环节都会影响生物分布研究的结果 ,要采取相应的措施对研究过程中的关键环节进行质量控制,同时应尽快制定详细的具有指导意义的生物分布研究指导原则和标准。 相似文献
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目的建立Beagle犬和食蟹猴血液及血清生化指标的正常参考值范围,为判定血液和血清生化指标异常提供依据。方法普通级健康Beagle犬,6~9个月龄,食蟹猴,2~3岁。Beagle犬前肢桡静脉采血(食蟹猴为前臂静脉),分别采用Hitachi 7060自动生化分析仪和Advia 120自动血球分析仪检测生化和血液指标,对测定结果作统计检验。结果经过统计分析,分别得出Beagle犬及食蟹猴血清生化和血液指标的正常参考均值以及标准差。结论初步建立不同性别间Beagle犬和食蟹猴的血液学指标和血生化指标正常值的参考范围。 相似文献
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目的 介绍GLP体系下临床检测室的质量保证要素.方法 通过研究美国病理学家学会(College of American Pathologists,CAP)认可程序、美国临床实验室质量改进法案(CLIA-88)以及卫生行业标准WS/T 250-2005对实验室质量保证的要求,结合本实验室的具体情况,总结GLP体系下有关临床检测室的质量保证要素.结果 质量保证涉及到实验室的所有工作,主要涵盖样品采集、标识、运输、接收、检验和报告、人员培训和考核、仪器管理、室内质量控制、室间质量评价、方法验证以及客户沟通和交流等等.结论 质量保证各个要素的实施是临床检测室获得质量数据的决定性因素. 相似文献
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目的验证Microtech 648 ISO型电泳分析仪的性能,并建立实验动物的血清蛋白电泳参考值。方法用商业质控血清作为测试物,分别测定日内精密度、日间精密度、灵敏度和准确性。结果 Alb、α1、α2、β、γ区带的日间CV分别为2.5%、7.4%、7.6%、7.1%、9.9%;在同一膜片上的日内CV值分别为1.6%、8.9%、4.9%、4.6%、5.4%;在不同膜片上的日内CV值分别为3.5%、8.7%、9.3%、9.3%、5.8%;准确度在可接受的范围内;白蛋白和球蛋白的检测灵敏度分别为1.1g/L和1.2g/L。用验证后的仪器建立了常用实验动物的血清蛋白电泳参考值。结论 Microtech 648 ISO型电泳分析仪的性能良好,可以用于实验研究。 相似文献
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目的建立和验证用于CMV启动子序列检测的绝对定量PCR方法。方法针对CMV启动子序列设计探针和引物,用SYBR Green I熔解曲线分析引物扩增的特异性。对反应体系进行系统优化。用含CMV启动子的基因治疗产品和质粒标准品验证建立的PCR方法。结果上游引物为5’-AGACTTGGAAATCCCCGTGAGT-3’,下游引物为5’-CGTATTAGTCATCGC-TATTACCATGGT-3’,探针为5’-AACCGCTATCCACGCCCATTGATG-3’。扩增的特异性较强,反应体系优化后能达到较高的灵敏度。Ct值的变异系数都小于2%。标准曲线的定量范围为1.5×102~1.5×107拷贝,灵敏度为30拷贝。质粒标准品和基因治疗产品的扩增效率相近。结论建立了检测CMV启动子序列的绝对定量PCR方法。 相似文献
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目的探讨动物的骨髓细胞在不同动物血清中的微环境差别变化,从而有助于判断新药在实验动物毒性研究中对造血系统的影响。方法利用胎牛血清、大鼠血清、Beagle犬血清、恒河猴血清和食蟹猴血清对食蟹猴股骨部位采集到的骨髓细胞分别进行骨髓细胞图片的制备。结果利用大鼠血清、Beagle犬血清时,红细胞和骨髓细胞破损程度相差不大,胞膜均出现了不同程度的破裂;利用胎牛血清时,红细胞的形态较为完整,骨髓细胞的破损状况有所改善;采用猴血清时,红细胞的形态完整,骨髓细胞边界清楚,其形态也最为清晰。进一步电子显微镜下观察发现采用恒河猴的血清制备食蟹猴的骨髓细胞,细胞形态并无太大差异。结论非同种属动物血清制备的骨髓细胞,其形态受损。其中粒细胞受损尤为突出。这些受损的骨髓细胞可能是由于非同种属动物血清中的营养成分差别及不同血清来源的分子基础。 相似文献
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目的 评价食品药品检测机构对血糖(GLU)、总胆固醇(CHO)、三酰甘油(TG)、钾离子(K+)、钠离子(Na+)以及氯离子(Cl-)等6种生化指标的检测能力。方法 分别采用单因素方差分析和t检验法对能力验证样品的均匀性和稳定性进行研究。用Kolmogorov-Smirnov 检验法研究43家实验室能力验证数据的正态性。按照美国临床实验室改进法案(CLIA'88)能力验证评价标准,对各实验室的结果进行评价。结果 GLU,CHO,TG,K+,Na+和Cl-的满意率分别为97.6%,97.6%,100%,90.9%,72.7%和84.8%。结论 通过该次能力验证研究,发现部分实验室的GLU,CHO,K+,Na+和Cl-指标检测能力存在缺陷,有利于促进实验室的质量改进。 相似文献