小鼠卵母细胞体外成熟培养系统的建立与优化

目的 探讨激素刺激时间、体外培养时间对小鼠卵母细胞核成熟及不同激活方案对卵母细胞孤雌激活、胚胎发育能力的影响。方法 孕马血清促性腺激素（PMSG）超排处理,在体外培养的不同时间点检测卵母细胞核成熟率（每个处理至少重复3次,3只/重复,以下实验相同）。
分别采用乙醇结合6-二甲氨基嘌呤（6-DMAP）法和SrCl₂ 法激活卵母细胞,胚胎培养液选用CZB［胎牛血清（FBS）或牛血清清蛋白（BSA）］两种,确定最佳激活方案。对不同时间点成熟的卵母细胞进行激活,确定最佳激活卵龄。研究缩短PMSG刺激时间对卵母细胞发育的影响。结果 将
PMSG刺激时间从46h缩短至24h,卵母细胞获得最高核成熟率（97.6% vs 91.9%）的培养时间由14h延长至16h;缩短PMSG刺激时间,核成熟率不受影响,但能显著降低激活率（91.2% vs 37.1%）和囊胚率（20.9% vs 0.0%）。 两种方法体内成熟卵母细胞激活率均高于90%,但囊胚率差异
显著(P<0.05)。卵母细胞体外培养至24~26h时,激活率（89.5%）和囊胚率（21.9%）均达到最高点。结论 建立了一种小鼠卵母细胞体外成熟培养系统,即PMSG超排处理46h、卵母细胞培养24h,CZB（10mmol/L SrCl2）激活2.5h后采用CZB（0.5%BSA）进行胚胎培养。     

亚硒酸钠对Bcap-37人乳腺癌细胞体外增殖及3种酶细胞化学的影响

目的 观察体外培养中亚硒酸钠的浓度变化和培养时间的延长对Bcap-37人乳腺癌细胞增殖及酶活性的影响。方法 在体外培养Bcap-37人乳腺癌细胞中加入不同浓度的亚硒酸钠，常规染色显示其形态和增殖情况及各组Bcap-37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和非特异性酯酶活性。结果 2umol／L的亚硒酸钠对肿瘤细胞的生长具有一定的抑制作用，而10umol／L、50umol／L的亚硒酸钠具有一定的细胞毒性。Bcap-37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、非特异性酯酶活性随着硒浓度的加大，培养时间的延长呈下降趋势，并且10umol／L、50umol／L亚硒酸钠培养2d后，3种酶的活性完全消失。结论 硒对肿瘤细胞的生长和酶的活性都具有抑制作用，并且两者之间存在着一致性。     

硒对氧化偶氮甲烷诱导大鼠结肠黏膜癌变影响的观察

目的:探讨高硒摄入对氧化偶氮甲烷(azoxymethane, AOM)诱发的大鼠结肠黏膜癌变的影响.方法:给3周龄断乳SD雄性大鼠腹腔注射AOM(1次/周),连续2周以构建大鼠结肠黏膜癌动物模型,分别在注射前及2次注射后开始给动物自由饮用含亚硒酸钠(Na2SeO3,浓度为4 μg/mL)水.利用亚甲基蓝染色及HE染色观察大鼠结肠黏膜病变.结果:注射AOM的实验组大鼠自注射第10周起结肠黏膜内均可见异常隐窝灶(aberrant crypt foci, ACF).在第32周起,致癌前或致癌后补硒组大鼠结肠黏膜均出现癌前病变标志-大异常隐窝灶,且均显著高于实验对照组(6.00±1.67,10.60±3.37,2.20±0.55).ACF的异形性随时间延长显著增加,致癌前或致癌后补硒组大鼠结肠黏膜出现腺瘤数均显著高于实验对照组(4,4, 0).结论:饮用含高亚硒酸钠水可促进AOM诱发大鼠结肠黏膜癌变,可能是硒的胰岛素模拟作用所致.     

硒对大鼠胃癌时脑垂体ACTH阳性细胞的影响

目的　观察硒在预防大鼠实验性胃癌过程中垂体远侧部 ACTH细胞的免疫组织化学变化。方法　用断乳雄性 Wistar大鼠 30只 ,分为盐水对照组 N-甲基 - N -硝基 - N-亚硝基胍(MNNG)组和 Se+MNNG组 ,每组 1 0只。用免疫组织化学、图像分析和形态计量方法观察大鼠脑垂体 ACTH细胞。结果　补硒组大鼠 ACTH细胞的面数密度减小 ,免疫反应减弱 ,与 MNNG组相比有显著性差异 (P<0 .0 5) ,与对照组相比略有增加 ,但无统计学意义 (P>0 .0 5)。 MNNG组大鼠 ACTH细胞的面数密度增大 ,免疫反应增强 ,与对照组相比有显著性差异 (P<0 .0 5)。结论　硒在预防大鼠实验性胃癌过程中 ,可能参与了垂体远侧部 ACTH细胞功能的调节。     

组织学探究性实验对医学生学习兴趣培养的作用及其效果分析

为了激发医学生的学习兴趣,培养其自主学习能力,对泰山医学院2008-2010级临床医学与英语本科学生开展了从动物模型制作、取材、石蜡切片或铺片制作、染色、结果分析和讨论为程序的探究性实验。通过问卷调查,93.8%学生认为该项实验有必要,87.8%学生认为能够激发学习兴趣,84.6%学生认为能够培养自主学习能力。     

MNNG所致大鼠腺胃癌过程中腺胃、胰CGRP阳性细胞的免疫组织化学研究

目的　探讨大鼠腺胃、胰CGRP阳性细胞与其腺胃癌发生、发展的关系。方法　用N甲基 -N’ -硝基 -N亚硝胍 (MNNG) 2 0mg/kg给大鼠灌胃 ,每天一次 ,连续 10天 ,以诱导大鼠腺胃癌 (大鼠腺胃异倍体形成 )。第 2 5周时 ,用流式细胞仪测定大鼠腺胃幽门粘膜细胞DNA异倍体形成 ,用免疫组织化学ABC法观察了大鼠腺胃、胰CGRP阳性细胞的免疫组织化学变化 ,并对以上结果进行定性、定位、定量分析以及统计学处理。结果　在MNNG所致大鼠腺胃癌 (腺胃异倍体形成 )的过程中 ,其腺胃、胰CGRP阳性细胞的免疫组织化学反应增强 (P <0 .0 5,P <0 .0 1)。结论　胃、胰CGRP阳性细胞可能与MNNG所制大鼠腺胃癌的发生有关     

以科研课题为主线的组织学探究性教学实践

为了培养学生自主学习的能力和科学素养，在医学本科生的教学过程中，实施了以科研课题为主线的探究性、创新型教学活动，学生通过课题设计、动物实验、结果分析、课题总结及论文撰写等过程，大大提高了学习兴趣，培养了动手能力、创新思维能力，提高了获取信息和综合应用知识的能力。     

大鼠实验性腺胃癌过程中脑垂体远侧部FSH细胞的免疫组织化学观察

目的：观察腺垂体ＦＳＨ细胞在大鼠实验性腺胃癌的免疫组织化学变化。材料和方法：ＭＮＮＧ诱发断乳雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠的实验性脾胃癌模型,免疫组织化学、形态计量及图像分析技术。结果：实验性腺胃癌组大鼠脑垂体ＦＳＨ细胞与正常组相比较,免疫反应减弱,面数密度减少（Ｐ〈０．０５）,平均光密度（ＭＯＤ）减弱（Ｐ〈０．０５）。结论：在大鼠实验性胃癌过程中,腺垂体ＦＳＨ阳性细胞数量减少的同时,可能伴有合成和分泌功能     

硒对大鼠腺胃癌的作用及其对腺胃、胰CGRP阳性细胞的影响

目的：探讨硒在机体自然抗肿瘤发生过程中的作用。方法：用ＭＮＮＧ（２０ｍｇ／ｋｇ）灌胃诱导大鼠腺胃粘膜异倍形成（大鼠腺胃癌模型形成）。用流式细胞仪测定硒对大鼠腺胃幽门粘膜异倍体形成的影响。用免疫组织化学ＡＢＣ法观察硒在大鼠腺胃粘膜异倍体形成过程中,大鼠腺胃、胰ＣＧＲＰ阳性细胞的变化。并对以上结果进行图像分析及统计学处理。结果：（１）硒能掏所致大鼠腺胃粘膜细胞异倍体的形成。（２）在ＭＮＮＧ所致大鼠异倍     

髓复康促进大鼠脊髓修复再生的超微结构研究

目的 观察脊髓损伤后,脊髓神经毡等超微结构的变化和中药髓复康对于这种变化的影响;另外,希图从脊髓损伤区行细胞血管内皮细胞的超微结构方面,探查髓复康对大鼠损伤脊的保护作用,促修复再生作用及其作用柚是。方法 制备４５只下胸髓右侧半横断损伤的Ｗｉｓｔａｒ大鼠模型,分为髓复康、补阳还五汤、甲基强地松龙和空白对照４组,另设正常对照组用透射电镜和图像分析技术观察和分析髓复康对脊髓损伤区神经元和毛细血管内皮细胞