蒺藜总皂甙对TNF-α及IL-1β诱导内皮细胞粘附的抑制作用

目的：观察蒺藜总皂甙（ｇｒｏｓｓｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍ ＴｒｉｂｕｌｕｓｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓＬ,ＧＳＴＴ） 对肿瘤坏死因子－ α（ＴＮＦ－ α） 、白细胞介素－１β（ＩＬ－１β） 诱导的培养新生牛脑微血管内皮细胞（ＣＭＥＣ） 粘附大鼠血单核细胞（ＭＮＣ） 及中性粒细胞（ＰＭＮ） 的影响。方法：用ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β分别诱导传代的ＣＭＥＣ,计粘附ＭＮＣ及ＰＭＮ的细胞数,并计算粘附率。结果：ＣＭＥＣ 经ＴＮＦ－ α处理４ｈ 后,ＣＭＥＣ与ＭＮＣ及ＰＭＮ的粘附率,分别增加到３１．３±０．５％ 和３２．１±０．５％ （对照组分别为１２ ．５±０ ．２％ 和１３ ．８±０ ．４ ％） ,经ＩＬ－１β处理２ｈ 后,则分别为４４．５ ±１．０ ％ 和４４．８ ±０．７ ％ （ 对照组分别为１２ ．９ ±０．６ ％ 和１４．７ ±０．６％ ）。在ＴＮＦ－ α（ＩＬ－ １β） 处理前,用ＧＳＴＴ与ＣＭＥＣ共孵育,预处理２ｈ,则ＧＳＴＴ可剂量依赖性地抑制ＴＮＦ－ α和ＩＬ－ １β的作用。结论：ＧＳＴＴ可抑制ＣＭＥＣ 与ＰＭＮ及ＭＮＣ的粘附。     

中国人血管抑制素Endostatin基因的分子克隆与序列鉴定

目的：内抑素（Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）是一种有效的血管生成抑制因子,分离、克隆和测定中国人的Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ基因,为进一步研究Ｅｎｄｏｃｔａｔｉｎ的功能奠定了基础。方法：从中国人胎肝组织中提取ｍＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ方法将Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ的ｃＤＮＡ扩增出,克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体中,测定其ＤＮＡ序列。结果：中国人的Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ ｃＤＮＡ序列被成功克隆,序列分析证实为 Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ基因。结论：中国人的Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ ｃＤＮＡ基因编码序列与国外文献报道的相应序列完全一致。     

烟碱对大鼠脑微循环中白细胞运动的影响

目的 :观察烟碱对大鼠脑微循环中白细胞运动状态的影响。方法 :采用围堤式颅窗直视大鼠大脑软脑膜微循环 ,若丹明 6G标记循环血白细胞 ,微循环仪观察软脑膜微血管 (直径 2 5～ 40 μm ,长度 10 0μm)内白细胞的运动状态。结果 :烟碱能浓度依赖性的运动大鼠脑微血管内白细胞在内皮表面的滚动和粘附 ,预先皮下注射烟碱受体拮抗剂美加明可使滚动和粘附的白细胞分别降至 14 .2± 1.1个和 1.3± 0 .7个 (对照组为 10 .2± 1.2个 )。抗E 选择素单抗能明显阻断烟碱依赖所至的白细胞滚动 ,使滚动白细胞数目从 14 .2± 1.7个减为 2 .8± 0 .8个 ,而抗αvβ3整合素抗体能使粘附的白细胞数目从 10 .6± 1.0个降至 3 .8± 1.3个。结论 :烟碱可改变大鼠脑膜微循环中白细胞的运动状态 ,使白细胞在血管内皮表面滚动或粘附于其表面 ;烟碱的作用与激活脑烟碱受体有关 ;E 选择素介导烟碱引起的白细胞滚动 ,而αvβ3整合素则与烟碱引起的白细胞与血管内皮的粘附有关。     

溶血磷脂酰胆碱刺激脑微血管平滑肌细胞增殖的细胞内信号转导途径

通过测定［³H］胸腺嘧啶核苷(［³H］TdR)参入和结晶紫染色法测定平滑肌细胞增殖,研究了溶血磷脂酰胆碱(LPC)刺激牛脑微血管平滑肌细胞(BCMSMC)增殖的细胞内信号转导途径. 结果显示,LPC能浓度依赖性(1 nmol·L^-1-10 μmol·L^-1)诱导BCMSMC摄取［³H］TdR,在LPC的浓度为10 μmol·L^-1时作用达最大,cpm由366±142升至1761±296(P<0.01);LPC亦能浓度依赖性(1 nmol·L^-1-10 μmol·L^-1)诱导BCMSMC增殖,在LPC浓度为1 μmol·L^-1时促增殖作用达坪值,A_{595 nm}由0.060±0.009增至0.100±0.015(P<0.01). 丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂PD 98059(2-50 μmol·L^-1),血小板衍生生长因子受体抑制剂酪氨酸磷酸化抑制剂AG 1296(2-50 μmol·L^-1)以及蛋白质酪氨酸激酶抑制剂除莠霉素A(2-10 μmol· L^-1)能浓度依赖性地抑制LPC的上述作用. 表明LPC能促进BCMSMC增殖,其细胞内信号转导与MAPK途径有关.     

羟基积雪草苷对小鼠抑郁行为和大鼠不同脑区单胺氧化酶活性的影响

目的:研究羟基积雪草苷(madecassoside, MC)对实验小鼠抑郁行为及对大鼠不同脑区单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性的影响.方法:以丙咪嗪为阳性对照药,采用小鼠强迫游泳实验和利舍平拮抗实验,观察MC对小鼠游泳不动时间和利舍平诱导的小鼠体温降低的影响;分别以吗氯贝胺和帕吉林为阳性对照药,测定急性(3 d)和慢性(21 d)给予大鼠MC对不同脑区单胺氧化酶A (monoamine oxidase-A,MAO-A)和单胺氧化酶B(monoamine oxidase-B,MAO-B)活性的影响.结果:(1) MC高、中、低剂量(10、20、40 mg/kg)均可显著减少小鼠的游泳不动时间(P<0.01).(2)低剂量(10 mg/kg)和中剂量(20 mg/kg)均能显著拮抗利舍平诱导的小鼠体温降低(P<0.05),但高剂量(40 mg/kg)对利舍平诱导的小鼠体温降低无显著性影响(P>0.05).(3)急性给药,MC高、中、低剂量均显著降低大鼠海马MAO-A活性(P<0.01),高剂量显著降低下丘脑MAO-A活性(P<0.01),对皮质MAO-A活性无显著性影响(P>0.05);慢性给药,MC对皮质和下丘脑MAO-A 的活性没有显著影响(P>0.05),MC高剂量可显著增加海马MAO-A的活性(P<0.01).(4)急性给药,MC低、中剂量可显著降低大鼠大脑皮质MAO-B的活性(P<0.05),MC低剂量可显著降低下丘脑MAO-B的活性(P<0.05),而MC中剂量显著增加海马MAO-B的活性(P<0.01); 慢性给药,MC高、中、低剂量对不同脑区MAO-B的活性均没有显著影响(P>0.05).结论:MC具有抗抑郁作用,其作用可能与降低脑内MAO的活性有关,急性给药比慢性给药对MAO的影响更为显著,引起这种差异的原因尚需作进一步研究.     

灯盏花素对创伤性脑损伤大鼠学习记忆功能的影响

目的 观察灯盏花素对创伤性脑损伤大鼠学习记忆功能和脑氧自由基的影响.方法 通过液压损伤法建立大鼠创伤性脑损伤模型,水迷宫实验和避暗实验测定大鼠学习记忆功能,并于测试后取脑测定总超氧化物歧化酶（T-SOD）、丙二醛（MDA）含量.结果 在Morris水迷宫实验中,灯盏花素能明显缩短脑创伤大鼠逃避潜伏期;在避暗实验中,灯盏花素能显著延长脑创伤大鼠学习记忆潜伏期,减少错误次数.灯盏花素可以显著降低脑创伤大鼠脑组织MDA含量和显著增加T-SOD含量.结论 灯盏花素可改善脑创伤大鼠学习记忆功能,其作用与抑制氧自由基反应有关.     

探索以本科学员为主体的药理学实验设计与实施

药理实验课教学是药理教学的重要组成部分,我们以激素类药物的抗炎作用为实验素材,探索以本科学员为主体的自主设计实验,开拓学生的科研视野、培养科研思路,以满足学员自主学习的需要。     

欧芹素乙对人脐静脉内皮细胞的保护作用及对血管内皮生长因子表达的影响

目的:研究欧芹素乙对内皮细胞的保护作用;溶血磷脂酰胆碱(LPC)对人脐静脉内皮细胞株HUVEC细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响以及欧芹素乙的影响.方法:应用四唑盐(MTT)法检测溶血磷脂酰胆碱对HUVEC细胞的毒性作用及欧芹素乙的保护作用;应用基础酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组条件培养基中VEGF蛋白含量;采用RT-PCR法及Reahime PCR方法检测溶血磷脂酰胆碱对VEGF mRNA的表达及欧芹素乙的影响.结果:MTT检测结果显示,溶血磷脂酰胆碱对HUVEC细胞具有较强的生长抑制作用,而欧芹素乙对溶血磷脂酰胆碱所致的细胞增殖抑制具有较好的保护作用.ELISA结果显示,HUVEC细胞暴露于溶血磷脂酰胆碱后,VEGF蛋白含量明显升高;加入欧芹素乙后剂量依赖性地降低VEGF蛋白的表达.RT-PCR结果显示,溶血磷脂酰胆碱可以增加3种VEGF异构体的转录水平,其中VEGF165的表达显著增加,欧芹素乙可剂量依赖性地抑制溶血磷脂酰胆碱引起的VEGF mRNA的高表达.结论:欧芹素乙对溶血磷脂酰胆碱引起的细胞损伤有明显的保护作用;欧芹素乙可抑制溶血磷脂酰胆碱所诱导的HUVEC细胞中VEGF蛋白及VEGF mRNA的高表达,对内皮细胞起到保护作用.     

MicroRNAs与缺血性脑卒中的研究进展

MicroRNAs(miRNAs)是一类单链小分子非编码RNA,通过结合靶基因mRNA的3′非翻译区从而抑制mRNA表达。目前发现miRNAs不仅参与生命过程的一些重要进程,也与许多疾病的发生和发展密切相关。本文综合近年文献,对缺血性脑卒中这一病理状态下的动物和病人的脑组织及血液miRNAs的表达及其作用做一综述。