基因工程构建核酶（Ribozyme）及其体外切割人乳头瘤病毒（HPV）16型转化基因──E6E7转录产物的作用（简报）

基因工程构建核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）及其体外切割人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型转化基因──Ｅ６Ｅ７转录产物的作用（简报）胡延忠，司静懿，宋国兴，刘世德，李昆（中国医学科学院，中同协和医科大学，基础医学研究所，北京１００００５）对我国不同地区宫颈癌组织及...     

圆弧青霉代谢物的诱变作用

从食管癌高发区林县农户粮食中分离出19株圆弧青霉,随机选4株(45A_2,7B_3,155D_1,26B_1),在以甘露醇为碳源的Raulin-Thom培养基中培养。氯仿提取其代谢物,应用CHO(Chinese hamster ovary)细胞SCE(Sister Chromatid Exchange)法检测了它们的诱变作用,结果发现:45A_2加S_9后诱发SCE频率显著升高;7B_3,155D_1在不加S_9情况下诱发SCE频率显著升高;26B_1在加与不加S_9情况下均为阳性,但以不加S_9时作用较强,所测试的4株圆弧青霉代谢物均有不同程度的损伤细胞DNA作用,与食管癌的发生可能有一定关系。     

畸形胎儿羊水细胞形态学初步观察

我们建立了一种简便的羊水细胞形状态学方法,初步表明对畸形胎儿的产前诊断有一定意义。选择:①对照妇女20人,近期无致畸物接触史及病毒感染史,并经B型超声波及引产后尸体解剖证实为正常胎儿的健康中期妊娠(3～7个月)妇女。③怀畸胎中期妊娠(3～7个月)妇女5人,经B型超声波及引产后尸检证实为无脑儿3例,胸腹腔积液1例及腭裂1例。羊水涂片:即令孕妇充分振摇腹部,常规消毒后穿刺,丢弃最初2ml以防止母体细胞污染,再抽取5～10ml羊水,1500转/分离心10分钟,弃上清液,加入少许小牛血清,混匀后推成薄片,Giemsa染色,在高倍镜下观察,同时按Countryman方法记录1000个羊水有核细胞中的微核数及出现微核的细胞数。微核诊     

雷公藤对男性性激素的影响

患轻度银屑病,无其它系统病,成年已婚具有正常生育男子26例。口服GTW20mg/天连服4-6个月后停药,即精子参数达不育标准3个月后停药。随访观察4～5个月,至精子参数恢复服药前水平后3个月终止观察。服药前1周,服药期间和停药后每月检查精液,测定血中FSH、LH和T浓度。结果表明,服药后2月,精子密度和活率指标达不育水平,停药2月,精子检查指标恢复至服药前水平。在服药期间,血清LH和T浓度有轻度的升高,停药后恢复正常。血清FSH浓度自始至终无显著性变化。     

雷公藤对男性生殖影响的研究

雷公藤多甙(GTW)为市售中成药,长期以来用于类风湿关节炎、慢性肝炎和一些皮肤病的治疗。不久前表明本品对雄大鼠,也可能对男子有抗生育作用。才研究在26名轻型银屑病人,用小剂量(20ms/日)GTW治疗,同时观察精子数据、精浆生化、血清激素及生化、血象、尿常规以及有关免疫及遗传指标。结果表明,服药1月后精子密度,特别是活率,明显下降,2月后降至不育水平;连服5～6月除少数人有暂时性上腹不适外,无其他明显副作用,性功能如常。停药二月后精子恢复。服药时精浆中游离左旋肉毒碱明显下降,停药后恢复,提示作用部位之一为附睾。所观察的其他指标均无明显影响。     

热休克转录因子1蛋白在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨热休克转录因子1( HSF1)蛋白在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义,并推测HSF1在肝细胞癌发生、发展中的可能分子机制.方法 收集2006年3月至2007年3月第四军医大学西京医院67例行手术切除的肝细胞癌组织,以及21例因肝血管瘤行手术切除的部分正常肝脏组织,采用免疫组织化学法柃测肝细胞癌及正常肝脏组织中HSF1蛋白及热休克蛋白70( HSP70)的表达,分析HSF1蛋白与患者临床病理特征及预后之间的关系,并根据HSFI蛋白与HSP70表达情况的相关性分析推测HSF1在肝细胞癌发生、发展中的可能分子机制.不同组织中HSF1蛋白阳性率的分析以及肝细胞癌中HSF1蛋白阳性表达率与各临床病理资料的关系采用x2检验及Fisher确切概率法,HSFI蛋白与HSP70在肝细胞癌中表达的相关性采用Spearman相关性分析.采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存情况比较采用Log-rank检验.结果 HSFI蛋白在肝细胞癌组织中的阳性率为69％ (46/67),在正常肝脏组织中的阳性率为29％ (6/21),两者比较,差异有统计学意义(x2=10.628,P＜0.05).HSP70在肝细胞癌组织中的阳性率为57％( 38/67),在正常肝脏组织中的阳性率为24％ (5/21),两者比较,差异有统计学意义(x2=6.929,P＜0.05).HSF1蛋白与HSP70在肝细胞癌组织中的表达呈正相关(r=0.319,P＜0.05).HSFI蛋白的高表达与肝细胞癌的包膜完整与否、分化程度以及TNM分期有关(X2=5.935,9.762,5.159,11.267,P＜0.05);而与患者性别、年龄、HBsAg水平、AFP水平以及是否存在门静脉癌栓无关(x2=0.822,0.172,2.059,P＞0.05).HSF1蛋白阳性和阴性表达者的生存时间分别为(21.4+1.9)个月和(29.8±2.7)个月,两者生存率比较,差异有统计学意义(x2=4.276,P＜0.05).结论 HSF1与肝细胞癌的发生、发展、侵袭转移以及不良预后相关,其可能通过调控HSP70的表达而发挥作用,在肝细胞癌的诊断和治疗中有良好应用前景.     

雷公藤多甙及其活性化合物的遗传学研究

雷公藤乡甙(GTW)在雄性大鼠及男子均可致不育而无明显毒副作用,从雷公藤提得的新化合物T_4在雄大鼠也有明确的抗生育作用,至于它们是否会产生遗传学后果,是人们关注而迄未报道的问题。本文进行了GTW对大鼠及人某些重要遗传学指标的影响,包括大鼠显性致死突变、胎肝淋巴细胞染色体畸变与微核率、以及人外周淋巴细胞染色体畸变率、姐妹染色单体互换(SCE)率、微核率、细胞分裂指数的研究,也观察了T_4对大鼠外周淋巴细胞微核率的影响。结果表明,从上述指标来看,抗生育剂量的GTW及T_4未见导致明显的遗传学影响。     

涂布介入器械的人血管内皮生长因子真核表达载体的构建

目的：构建可涂布于介入器械的人血管内皮生长因子（VEGF）真核表达载体。 方法：根据人VEGFA（NM_001025366）目的序列设计引物制备目的基因及载体,双酶切载体pIRES2-ZsGreen1和目的基因homo VEGFA进行连接后转化入大肠杆菌,构建质粒pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA并测序鉴定。 结果：目的基因VEGFA已连接到载体pIRES2-ZsGreen1,大小约1400 bp,与人VEGFA（NM_001025366）目的序列比对结果一致,未见变异。质粒pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA构建成功。 结论：成功构建重组人血管内皮生长因子真核表达载体,可用于涂布介入器械表面进行下一步实验。