不同治法方药对脂肪肝大鼠血脂作用的比较研究

目的:探讨不同治法方药对脂肪肝大鼠血脂的影响。方法:将SD大鼠随机分为8组,每组10只:①正常对照组,②模型组,③综合组,④疏肝组,⑤健脾组,⑥补肾组,⑦祛湿组,⑧活血组。采用高脂高糖加白酒建立大鼠脂肪肝模型,分别以综合方、疏肝方、健脾方、补肾方、祛湿方、活血方进行干预,连续灌胃给药10周,禁食12小时后,以乙醚麻醉动物,从眼眶静脉取血,在全自动生化分析仪上测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,观察肝组织病理学变化。结果:模型组大鼠血清TC、LDL-C含量较正常对照组均明显升高(P<0.01),模型组肝组织多呈中重度脂肪改变,汇管区炎细胞浸润明显,并有较多的灶性纤维增生。疏肝组与模型组TC、LDL-C含量比较,差异有显著性意义(P<0.05)。疏肝组、健脾组均无明显脂肪变,综合组、祛湿组、活血组肝组织均为轻度脂肪改变,补肾组则脂肪变改善不明显。结论:疏肝治法及其方药对脂肪肝大鼠的血脂有较为明显的影响,除补肾组外,其他各用药组对大鼠肝脏脂肪变性的病理变化均有较显著的改善。提示血脂指标与脂肪肝的发生发展虽有一定的相关性,但并不能确切反映脂肪肝的有无及其程度;疏肝、健脾、祛湿、活血及综合治法均有预防大鼠脂肪肝发生的作用。     

热性惊厥儿童白细胞介素-1受体拮抗剂基因多态性分析

目的分析白细胞介素-1受体拮抗剂基因(IL-1RN)与儿童热性惊厥(FS)遗传易感性的关系。方法采用病例-对照研究方法收集52例FS病例组和53例对照组外周血样本和流行病学调查资料,提取基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)方法直接检测IL-1RN基因多态性。结果采自广东省汉族儿童的105例样本中仅发现3种IL-1RN基因型,分别是Ⅰ/Ⅰ、Ⅰ/Ⅱ、Ⅱ/Ⅳ,各基因型在病例与对照组分布无显著性差异。等位基因Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ在病例组分布频率分别是95.2%、3.8%、1.0%,在对照组中的分布频率分别是84.9%、10.4%、4.7%,IL-1RN等位基因Ⅰ的频率明显高于对照组(P<0.05)。结论IL-1RN等位基因Ⅰ可能与儿童FS易感性有关。     

钙通道阻滞剂对内毒素性发热的抑制作用

本实验用新西兰家兔６１只，观察钙通道阻滞剂异博定对内毒素性发热及脑脊液中ＰＧＥ２、ｃＡＭＰ含量的影响，结果显示：异博定能降低内毒素引起的体温升高及脑脊液中升高的ＰＧＥ２含量，但不能明显降低脑脊中升高的ｃＡＭＰ含量。作者认为，异博定的降热作用很可能是通过抑制下丘脑ＰＧＥ的合成而减弱其发热效应的，而ｃＡＭＰ可能不参与其降热机制。     

Rip2诱导人胰腺癌细胞自噬和凋亡的交互作用及机制研究

目的:探讨受体相互作用蛋白2(Rip2)诱导人胰腺癌细胞自噬和凋亡的交互作用及其机制。方法:用jetPRIME将pEGFP-C2空质粒和pEGFP-Rip2重组质粒分别转染至人胰腺癌Panc-1细胞。用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用于过表达Rip2的细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白的表达;比色法检测caspase-8、-9、-3的活性。此外,用caspases抑制剂Z-VAD-FMK作用于过表达Rip2的细胞,Western blot检测自噬相关蛋白及PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达;透射电子显微镜观察自噬体的数量及形态。结果:(1)pEGFP-Rip2组细胞凋亡率显著高于对照组和pEGFP-C2组(P<0. 05),而pEGFP-Rip2+3-MA组细胞凋亡率进一步升高(P<0. 05);与pEGFP-Rip2组比较,pEGFP-Rip2+3-MA组细胞Fas、Bax和胞浆细胞色素c(Cyt-c)蛋白表达水平显著升高(P<0. 05),Bcl-2蛋白表达水平则显著下降(P<0. 05);pEGFP-...     

人HSV-1 UL40基因重组质粒的构建及其在siRNA筛选中的应用

目的： 快速筛选出高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA，为进一步应用RNA干扰的相关研究奠定基础。方法: 应用RT-PCR扩增人HSV-1 F株UL40基因，将其连接到pEGFP-N1构建pEGFP-N1-UL40融合蛋白表达质粒。将化学合成的针对UL40基因的siRNA与重组质粒共转染Vero细胞，通过观察绿色荧光蛋白报告基因的表达筛选高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。结果: 倒置荧光显微镜观察发现设计的4对siRNA中siRNA3和siRNA4能明显降低绿色荧光蛋白的表达，流式细胞仪检测证明siRNA3和siRNA4对目的基因沉默效率分别达到76.99％和84.00％。结论: 成功构建了人HSV-1 UL40基因融合表达载体pEGFP-N1-UL40，并利用该载体筛选出2对高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。     

参与免疫及炎症反应调控的胞浆蛋白NODs

Nucleotide- binding oligomerization domain (NOD) proteins are members of a growing family of cytosolic factors related to the apoptosis regulator Apaf-1 and a class of plant disease resistance proteins. NOD proteins have been implicated in the induction of NF-κB activity and in the activation of caspases. Biochemical evidence has unraveled the role of NOD1 and NOD2 as intraceUular sensors of bacterial peptidoglycan. Notably, genetic variation in the genes encoding the NOD proteins NOD2, cryopyrin and C Ⅱ TA inhmnans is associated with inflammatory disease or increased susceptibility to bacterial infections. NOD proteins may be involved in the recognition of microorganisms and regulation of inflammatory responses.     

牙髓创伤时牙髓PGE2、PGI2和TXA2浓度改变的研究

目的:探讨前列腺素与牙髓炎的关系。方法:建立大鼠创伤性牙髓炎模型,动态观察创伤后大鼠牙髓的组织学改变和检测牙髓中PGE₂,6-Keto-PGF_1α和TXB₂ 浓度的变化。结果:创伤后大鼠牙髓呈明显炎症改变,PGE₂,6-Keto-PGF_1α和TXB₂ 浓度升高,在创伤 6h后达到高峰。结论:前列腺素参与急性牙髓炎的发病。     

柴胡疏肝散对NAFLD大鼠肝脏脂质代谢及AMPK/SIRT1通路的影响

 目的: 观察柴胡疏肝散对高脂饮食建立的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织脂质代谢和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/sirtuin 1(SIRT1)通路相关蛋白的影响。方法: 选用SPF级SD大鼠24只,随机分为正常(NC)组、高脂(HFD)组和柴胡疏肝散(CSP)组,每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型,用药组大鼠同时灌服柴胡疏肝散浸膏剂(9.6 g·kg^-1·d^-1)进行干预,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清和肝匀浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)以及血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)含量;HE染色观察肝组织病理损伤变化;油红O染色观察肝组织脂质蓄积程度,透射电镜观察肝细胞内超微结构变化;Western blot法检测肝组织AMPK、磷酸化AMPK(pAMPK)、SIRT1和解偶联蛋白2(UCP2)的蛋白水平。结果: 大鼠肝组织HE染色、油红O染色和电镜结果证实肝细胞脂质蓄积严重,提示NAFLD大鼠模型建立成功。与NC组比较,HFD组血清和肝组织匀浆TC、TG含量显著升高(P < 0.01),血清AST含量显著升高(P < 0.01),肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著降低(P < 0.01),UCP2蛋白水平显著升高(P < 0.01);与HFD组比较,CSP组大鼠肝组织脂质蓄积程度明显改善,血清和肝匀浆TC和TG含量呈下降趋势,其中肝匀浆TC和TG含量下降显著(P < 0.05),血清AST含量显著降低(P < 0.05),肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05),UCP2蛋白水平显著下调(P < 0.01),但各组大鼠总AMPK蛋白水平差异无统计学显著性。结论: 柴胡疏肝散能够改善16周高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与其激活AMPK/SIRT1通路有关。     

脆性组氨酸三联体基因微卫星D3S1234和D3S1300长度多态性与肺癌的关系

目的： 研究脆性组氨酸三联体（FHIT）基因微卫星D3S1234和D3S1300长度多态性与肺癌的关系。方法： 采用病例－对照研究方法结合多重PCR技术、尿素聚丙烯酰胺电泳等分子生物学方法，检测肺癌病例组54人和健康对照组131人的FHIT基因微卫星D3S1234和D3S1300的等位基因频率分布，并应用二项分类的多因素Logistic回归的方法分析D3S1234和D3S1300多态性与肺癌的关系。结果： 肺癌组与对照组之间各种分子量大小D3S1234等位基因的频率无统计学差异，而D3S1300等位基因的频率存在统计学差异。多因素Logistic回归分析结果表明，吸烟指数与肺癌存在较强的统计关联。在排除了吸烟与肺癌的统计关联后，D3S1234和D3S1300的长度多态性与肺癌均存在统计学关联（P<0.05），D3S1234分子量越大，即CA二核苷酸的重复次数越多，患肺癌的风险越高；D3S1300分子量越大，即CA二核苷酸的重复次数越多，患肺癌的风险越低。而且在肺癌的发病过程中，吸烟指数（SI）与D3S1234和D3S1300的长度多态性存在交互作用（P<0.01）。结论： D3S1234和D3S1300的长度多态性与吸烟所致的肺癌存在统计学关联，可作为肺癌的早期诊断指标，对了解肺癌的发病机制有重要的意义。