自制羊膜载体复合物植入表皮细胞修复全层皮肤缺损

摘要 背景：利用组织工程和细胞培养技术研制的复合皮肤距理想的人工皮肤尚有一定的差距,如局部皮肤薄弱、抗拉及抗摩擦能力差、无皮肤附属器等。 目的：观察含碱性成纤维细胞生长因子和维生素C的羊膜载体复合物对皮肤缺损局部真皮组织的修复作用,寻找真皮组织修复重建促进表皮生长的最佳时期。 方法：取新西兰大耳白兔36只,在每只背部建立皮肤全层缺损模型3处,分别植入含有缓释碱性成纤维细胞生长因子和维生素C羊膜载体复合物、单纯羊膜载体复合物及油纱覆盖。随机分为3组,分别于术后21,14,7 d植入自体表皮细胞混合液,1周后行大体、组织学、免疫组织化学、墨汁灌注等观察。 结果与结论：术后21 d植入表皮细胞组皮肤缺损局部新生皮肤瘢痕轻、形态结构较满意,创面愈合速度和质量均优于术后14,7 d 植入表皮细胞组,并且植入含碱性成纤维细胞生长因子和维生素C羊膜载体复合物组创面皮肤新生真皮组织完全被新生的表皮覆盖,而且表皮几乎均变为复层,其生长速度及质量优于单纯羊膜载体复合物移植组和油纱覆盖组。说明含有碱性成纤维细胞生长因子和维生素C的羊膜载体复合物植入皮肤全层缺损后,能加速真皮的修复和重建;真皮组织修复增生晚期和重建初期为促进表皮生长的最佳时期。 关键词：羊膜载体复合物;表皮细胞;碱性成纤维细胞生长因子;皮肤创伤愈合;真皮 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.16.003     

直肠癌的治疗进展和看法

腹腔镜微创手术和低位直肠癌新辅助放化疗已成为直肠癌治疗的主流方式,直肠癌的治疗尤其是晚期直肠癌的治疗逐渐向微创、精准、个体化综合治疗方向发展. 一、腹腔镜微创手术持续普及和推广 随着1991年腹腔镜技术第一次应用于结直肠手术[1],腹腔镜技术也经历了从2D 到3D 和4K 超高清,从多孔到单孔和单孔＋1 孔的迭代更新,...     

NADPH氧化酶对培养的小鼠血管平滑肌细胞Toll样受体4介导的炎症表型的影响

目的 探讨NADPH氧化酶对培养的小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)介导的炎症表型中的作用.方法 分别采用NADPH氧化酶激动剂血小板衍生生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)和抑制剂夹竹桃麻素(apocynin)处理培养的C57BL/6J和TLR4-/-小鼠胸主动脉VSMC.分别采用荧光探针二氯荧光素双醋酸盐染色法检测VSMC内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,酶联免疫吸附法检测VSMC白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-o,TNF-α)表达,四甲基偶氮唑蓝染色法和Boyden小室检测VSMC的增殖和迁移.结果 PDGF-BB处理可显著增高C57BL/6J和TLR4-/-VSMC内ROS含量,而夹竹桃麻素可抑制ROS生成.PDGF-BB处理可使C57BL/6J VSMC IL-6[(52.69±3.49)ng/ml对(35.04±2.74) ng/ml,P=0.001]、IL-1β[(79.68±2.33) ng/ml对(62.38±0.54)ng/ml,P=0.000]和TNF-α[(218.35±5.42)ng/ml对(124.74±4.59) ng/ml,P=0.000]表达显著上调,增殖(1.69±0.53对1.04±0.40,P=0.000)和迁移(42.ll±4.05对1.69±0.53,P=0.000)能力均显著增强,而夹竹桃麻素预处理则可显著抑制VSMC IL-6[(42.11±4.05) ng/ml对(52.69±3.49) ng/ml,P=0.010]、IL-1β[(67.57± 1.36)ng/ml对(79.68±2.33) ng/ml,P=0.000]和TNF-α[(156.18±6.98) ng/ml对(218.35±5.42) ng/ml,P=0.000]表达以及增殖(1.23±0.42对1.69± 0.53,P=0.000)和迁移(42.11±4.05对52.69±3.49,P=0.000).TLR4-/-VSMC经PDGF-BB和夹竹桃麻素处理后,IL-6、IL-1β和TNF-α表达以及增殖和迁移能力均无显著变化.结论 NADPH氧化酶衍生的ROS参与了TLR4介导的VSMC炎症表型以及增殖和迁移,可能是其影响动脉粥样硬化发生和发展的重要机制.     

腮腺恶性淋巴瘤的螺旋CT影像表现及分析

目的:总结腮腺区恶性淋巴瘤的CT表现,分析不同病理类型的CT影像学特点.方法:收集我院20例腮腺恶性淋巴瘤病例,回顾总结其临床特征,CT表现,组织病理学及免疫组织化学结果.CT表现包括病灶的数目、大小、边界、密度和区域淋巴结受累情况;所有病例进行组织病理学观察,结合免疫组织化学分析进行病理学分型,并通过Ki-67进行肿瘤细胞增殖分析.结果:本研究中20例恶性淋巴瘤均为非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lym-phoma,NHL),其中黏膜相关性淋巴组织淋巴瘤(mucosal associated lymphoid tissue lymphoma,MALT)9例,弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)8例,滤泡性淋巴瘤(Follicular lymphoma,FL)2例,血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)1例.CT图像上,MALT多表现为边界不清晰(7/9);有6例呈沿腮腺轮廓塑形性生长(6/9),密度不均匀8例(8/9);DLBCL:多表现为边界清晰结节影(7/8),可为单发(4/8)或多发(4/8),密度均匀(4/8)或不均匀(4/8).20例中14例伴有淋巴结肿大.20例患者Ki-67(+)分布于20％～90％,4例DLBCL的Ki-67(+)大于50％.结论:腮腺恶性淋巴瘤多表现为MALT或DLBCL,这两类恶性淋巴瘤在螺旋CT上均具有一定的影像学特点.     

MyomiRs 在维甲酸诱导舌发育异常中对舌肌分化调控的机制研究

目的：检测维甲酸（Retinoic acid,RA）诱导小鼠胚胎腭裂模型中胎鼠舌体发育过程中肌相关 microRNAs（MyomiRs）、成肌调节因子（Myogenic regulatory factors,MRFs）以及 Pax 基因的表达变化,探究 MyomiRs 在舌肌分化过程中的调控作用,推测RA 致胎鼠腭裂伴发舌异常的可能机制。方法：建立 RA 诱导小鼠胚胎腭裂模型,分别在 E13．5、E14．5、E15．5收集胎鼠舌体组织,用 SYBR GreenⅠ实时定量 PCR 检测舌体中 MRFs 和 Pax 基因的表达;用 TaqMan 探针实时定量 PCR 检测舌体中 MyomiRs 的表达。结果：胎鼠舌体发育过程中,正常组 miR-1和 miR-206相对表达量均持续上升,RA 诱导组二者变化趋势与正常组相似,但相对表达量均低于正常组,miR-1的结果在 E14．5和 E15．5具有统计学意义（P ＜0．01）,miR-206的结果在 E13．5具有统计学意义（P ＜0．05）。正常组和 RA 诱导组胎鼠舌体中 MyoD 和 Myf5相对表达量都在 E14．5达到峰值,随后下降。RA 诱导组 MyoD 的表达在 E14．5显著低于正常组（P ＜0．05）,在 E15．5显著高于正常组（P ＜0．01）;RA 诱导组 Myf5的表达在 E15．5显著低于正常组（P ＜0．05）。正常组和 RA 诱导组胎鼠舌体中 Pax3表达均在 E14．5达到峰值,Pax7表达均在 E15．5达到峰值。RA 诱导组 Pax3的表达在 E14．5显著高于正常组（P ＜0．05）;Pax7的表达则在 E13．5显著高于正常组（P ＜0．01）。结论：在舌肌分化过程以及RA 诱导腭裂胎鼠的舌发育异常中,miR-1／miR-206与 Pax3／Pax7及 Myf5／MyoD 的表达趋势具有相关性。RA 可能通过下调 miR-1／miR-206而靶向上调 Pax3／Pax7,进而下调 MyoD ／Myf5表达,从而抑制舌肌分化,导致舌肌发育异常。     

耐阿米卡星铜绿假单胞菌氨基糖苷类耐药基因及其基因型研究

目的了解耐阿米卡星(AMK)铜绿假单胞菌(Pa)的氨基糖苷类修饰酶基因和氨基糖苷耐药基因的存在情况及其基因型。方法对临床分离的72株多重耐药Pa(其中对AMK耐药Pa组和对AMK敏感Pa组各36株)分别用聚合酶链反应(PCR)测定9种主要的氨基糖苷类修饰酶基因和2种氨基糖苷耐药基因,用基因外重复回文序列(REP)-PCR进行基因型研究。结果在分组研究中AMK耐药Pa组表现为aac(6′)-Ⅰ和aac(3)-Ⅱ基因同时阳性的占42.4%,aac(6′)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ基因同时阳性的占36.4%,是耐药组的主要修饰酶基因;AMK敏感Pa组表现为aac(6′)-Ⅰ基因阳性的占50.0%,aac(3)-Ⅱ基因阳性的占33.2%,是敏感组的主要修饰酶基因。2种氨基糖苷耐药基因(RmtA和RmtD)均为阴性。REP-PCR显示耐药菌株可分为A～G 7型,其中AMK耐药Pa组的主要分型为F型(其中尤以F1型为多);AMK敏感Pa组以E型为多见。结论通过2种或多种氨基糖苷类修饰酶同时作用于AMK是Pa对AMK耐药的重要途径之一。     

术前肝胆囊静态显像胆囊未显影行微创保胆取石术33例临床分析

目的 评价术前肝胆囊静态显像(ECT)胆囊未显影患者行保胆取石术的成功原因及概率.方法 2006年8月～2009年4月在该院行微创保胆手术的患者术前常规行肝胆囊静态显像(ECT)检查.将胆囊未显影的患者纳入研究组,统计成功完成微创保胆手术例数并分析原因.结果 术前有80例患者肝脏显影良好.但胆囊未显影,均为胆囊结石患者,其中有33例患者成功地完成微创保胆取石术,占40.1%,成功原因主要是结石能全部取出等.结论 术前肝胆囊静态显像(ECT)胆囊显影表明胆囊有功能,是微创保胆术的适应证,未显影表明胆囊功能不良,均为胆囊结石患者,在术中若发现胆囊无萎缩,无明显积脓或急性炎症水肿.结石无严重嵌顿且能全部取出者可行微创保胆取石术,丰富了微创保胆手术的适应证.     

自制羊膜载体复合物植入表皮细胞修复全层皮肤缺损

背景:利用组织工程和细胞培养技术研制的复合皮肤距理想的人工皮肤尚有一定的差距,如局部皮肤薄弱、抗拉及抗摩擦能力差、无皮肤附属器等.目的:观察含碱性成纤维细胞生长因子和维生素C的羊膜载体复合物对皮肤缺损局部真皮组织的修复作用,寻找真皮组织修复重建促进表皮生长的最佳时期.方法:取新西兰大耳白兔36只,在每只背部建立皮肤全层缺损模型3处,分别植入含有缓释碱性成纤维细胞生长因子和维生素C羊膜载体复合物、单纯羊膜载体复合物及油纱覆盖.随机分为3组,分别于术后21,14,7 d植入自体表皮细胞混合液,1周后行大体、组织学、免疫组织化学、墨汁灌注等观察.结果与结论:术后21 d植入表皮细胞组皮肤缺损局部新生皮肤瘢痕轻、形态结构较满意,创面愈合速度和质量均优于术后14,7 d 植入表皮细胞组,并且植入含碱性成纤维细胞生长因子和维生素C羊膜载体复合物组创面皮肤新生真皮组织完全被新生的表皮覆盖,而且表皮几乎均变为复层,其生长速度及质量优于单纯羊膜载体复合物移植组和油纱覆盖组.说明含有碱性成纤维细胞生长因子和维生素C的羊膜载体复合物植入皮肤全层缺损后,能加速真皮的修复和重建;真皮组织修复增生晚期和重建初期为促进表皮生长的最佳时期.     

基于性染色体定量检测的伴性遗传病无创性产前筛查方法的研究

目的：利用孕妇血浆游离DNA对产前胎儿性别进行识别,为伴性遗传性疾病的无创性产前筛查提供参考。方法利用X、Y染色体的特异性引物和探针构建识别胎儿性别的实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测技术,并对灵敏度、准确性等方法学指标进行评价,然后将构建好的方法用于24例未孕健康女性及临床上50例16～20孕周的孕妇血浆DNA的检测。结果在母体DNA胎儿Y染色体定性检测方法的灵敏度检测中,当胎儿DNA丰度为3％～6％时,母体DNA模板量下限是50 pg。当母体DNA模板量在0．5～50 ng时,Y染色体最低检测丰度为1％,相当于胎儿DNA丰度为2％;当母体DNA模板量在0．05～0．5 ng时,Y染色体最低检测丰度为2％～4％,相当于胎儿DNA丰度为4％～8％;当无母体DNA时,Y染色体模板量下限为0．5 pg。标本定量检测中妊娠女性的血浆DNA浓度明显高于未孕健康女性（P＜0．05）。50例孕妇静脉血标本中,除1例标本因提取失败未作检测外,其余49例标本初次试验在未考虑母体血浆DNA模板起始用量时,检测结果为17例男性,32例女性,与胎儿出生后性别不完全一致;但是当加大母体血浆DNA模板起始用量（＞50 pg）后,结果为23例男性,26例女性,准确率为100％。结论该试验所构建的利用母体血浆游离DNA进行的早期无创性产前筛查方法具有较高的准确性,可以为伴性遗传出生缺陷性疾病的早期筛查和预防提供重要的参考价值。     

氟碳人造血液的临床研究(附140例报告)

本文报告140例术中输注氟碳乳剂(FCE,亦称氟碳人造血液)的临床研究。140例中,男99例,女41例,年龄17～71岁。FCE 输注量为500～1000ml。结果表明输注过程中生命体征平稳,ECG未见明显改变,BP、PaO_2显著升高,动脉氧含量增加。65例(46.4%)输注 FCE 后未再输库血。输注FCE 后,可引起 WBC 及纤溶活性升高,血小板数、纤维蛋白原量、CH_(50)、FN 降低;3例有 SGPT 上升,但均为一过性的。输注 FCE500ml 后即刻血中氟碳浓度为8.06±3.31mg/ml 血液,氟碳的携氧量为0.96±0.37ml%。结果提示 FCE 具有良好的载氧和扩容功能,用于术中代替输血和对创伤失血性休克的抢救是安全有效的。