探讨透骨草总生物碱对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长、迁移侵袭的作用及其机制研究

目的探讨透骨草总生物碱(TTAT)对MDA-MB-231细胞生长、迁移和侵袭的作用,并对其机制进行研究。方法实验分为正常组、实验组和阳性对照组,体外培养MDA-MB-231细胞,MTT法检测TTAT对细胞生长、增殖的影响,Transwell实验和细胞划痕实验检测TTAT对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭转移能力的作用,Western Blot法测定不同浓度TTAT处理人乳腺癌后,转移相关蛋白金属基质蛋白-2(MMP2)、MMP9、血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果TTAT对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长、迁移和侵袭有明显的抑制作用,并具有一定的量效关系,且转移相关蛋白MMP2、MMP9、VEGF的表达均下调。结论透骨草总生物碱能够抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与抑制MMP2/9、VEGF的表达以及二者之间的协同作用有关。     

心脏跳动中心内直视手术1 032例体外循环管理

目的探讨完善浅低温体外循环心脏跳动中心内直视手术中体外循环管理技术,报告1 032例临床经验.方法 1997年11月～2000年9月间,应用浅低温体外循环心脏跳动中心内直视手术技术,实施心脏手术1 032例,男503例,女529例.其中先天性心脏病714例,心脏瓣膜病318例.静脉复合麻醉,体外循环中灌注流量成人2.4～2.8L*(m2)-1*min-1,儿童2.8～3.0L*(m2)-1*min-1,1岁以内者3.0～3.5L*(m2)-1*min-1.灌注压成人保持8.0kPa以上,儿童6.0～8.0kPa.结果全组手术死亡率为2.33%(24/1 032),其中先天性心脏病手术死亡率2.7%(19/714),心脏瓣膜病手术死亡率为1.6%(5/318).全组无体循环气栓和永久性房室传导阻滞发生.血色素尿42例(4.1%).结论浅低温体外循环心脏跳动中心内直视手术技术安全可行,保持较高灌注流量和较高压力,平稳降温,维持心脏跳动,可减轻心肺等脏器的损害,避免术中心脏传导束损伤.     

“类标准化病人”在中医妇科学病案教学中的应用

在PBL教学理念的指导下,根据中医妇科学的学科特点,在中医妇科学各论部分教学中开展病案导入式教学,并引入情景式教学方法,通过"类标准化病人"扮演法等环节模拟临床诊疗过程,取得了良好的教学效果。     

基因芯片技术在中医药防治肿瘤研究中的应用

基因芯片技术已被广泛应用于中医药防治肿瘤的研究。本文归纳总结了近年来,基因芯片技术在肿瘤常见中医证候的物质基础研究、不同中医治法的作用机制研究、中药及其有效成分抗肿瘤的机制研究等领域中的应用情况,并对其中存在的问题及今后的研究前景进行了思考与展望。     

RNA干扰研究波形蛋白在肝癌细胞增殖中的 作用及不同中医治法的调节

目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌波形蛋白(vimentin,VIM)表达的调控差异,以及VIM在人肝癌细胞增殖中的作用。方法:将84只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组以及实验组,除正常组外均采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌,实验组分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)VIM表达的差异;根据人VIM基因编码区设计2个siRNA靶点,并将构建好的重组质粒转染SMMC-7721人肝癌细胞株,Realtime-PCR检测转染前后该基因的表达差异,MTT法检测转染前后细胞生长增殖情况。结果:芯片结果显示,VIM基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加(模型组芯片读数为正常组10倍以上),健脾和活血治法明显下调其表达;采用MTT法筛选到一个VIM基因RNA干扰有效靶序列,脂质体转染144 h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;实时荧光定量PCR检测表明,转染72 h后该基因的表达量明显降低(转染效率为50%)。结论:肝癌细胞恶性增殖有赖于VIM基因的高表达,健脾和活血方药能显著下调该基因表达。     

心脏跳动下心内直视手术的体外循环管理

目的探讨心脏跳动下心内直视手术中体外循环的管理方法。方法总结分析2 290例心脏跳动下行心内直视手术的体外循环管理方法。术中均常规建立左心引流,术毕采用综合序贯排气技术。转流中鼻咽温维持在30～32℃,红细胞压积维持在20%～30%,流量控制在2.4～3.2 L.m-1.min-2,采用α稳态血气管理方法,术中酌情行常规超滤或改良超滤。结果全组体外循环均顺利停机,转流时间22～179 min。术中室颤256例,其中181例自动复跳。全组死亡22例,其中复杂先天性心脏病15例,重症瓣膜病7例。全组无体外循环气栓并发症。结论浅低温体外循环方法在心脏跳动下心内直视手术中安全可行且易于管理,能有效避免心肌缺血-再灌注损伤。     

重症婴儿先天性心脏病手术的体外循环策略

目的探讨重症婴儿先天性心脏病外科治疗的体外循环策略。方法回顾性分析接受心内直视手术治疗的354例重症先心病婴儿的临床资料。术前合并有心血管系统、呼吸系统、消化系统等严重并发症患儿318例（89.8%）。根据不同手术方式,术中采用浅度低温（80例,22.6%）、中度低温（191例,54.0%）和深低温低流量灌注（79例,22.3%）以及深低温停循环（4例,1.1%）的体外循环方法;心肌保护措施采用不阻断主动脉心脏不停跳（80例）或阻断主动脉根部间断灌注4∶1冷血停搏液（274例）;复温后行平行超滤与改良超滤联合应用。结果心脏停跳体外循环时间为（112.11±31.37）min,阻断主动脉时间（56.12±22.17）min;心脏不停跳体外循环时间为（79.3±19.1）min,阻断腔静脉时间（39.1±11.8）min;4例采用深低温停循环体外循环下行心内畸形矫治术,体外循环时间为114～161 min,阻断主动脉时间56～116 min,停循环5～16 min。253例开放主动脉后自动复跳,自动复跳率为92.3%（253/274）,全组8例停机困难,术后死亡11例,死亡率为3.1%。结论针对具体患儿制定合理的预充预案、选择高质量的体外循环管道和氧合器,术中选择合理的体外循环方案、常规进行超滤和加强重要脏器保护是重症婴儿先天性心脏病外科治疗成功的保障。     

基于对背根神经节中神经生长因子的调控探究华蟾素治疗骨癌痛的机制

目的 基于对骨癌痛大鼠背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）中神经生长因子（nerve growth factor,NGF）的调控,探讨中药华蟾素治疗骨癌痛的机制。方法 筛选痛阈值满足条件的SD雌性大鼠构建骨癌痛模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、华蟾素组、华蟾素＋NGF组和anti-NGF组。华蟾素组、华蟾素＋NGF组在造模第7天开始ip华蟾素,其余各组ip等体积的生理盐水;华蟾素＋NGF组、anti-NGF组在造模第12天鞘内插管给药,造模21 d后处理大鼠。检测大鼠造模前后痛阈值变化;采用Western blotting法检测各组大鼠DRG中原肌球蛋白受体激酶A（tropomyosin receptor kinase A,TrkA）、p75神经营养受体（p75 neurotrophy receptor,p75NTR）、μ阿片受体（μ opioid receptor,MOR）和神经递质P物质（substance P,SP）蛋白表达;采用免疫组化法检测各组大鼠DRG中MOR的表达;采用免疫荧光双标检测各组大鼠DRG中MOR与TrkA共表达情况。结果 与模型组比较,华蟾素明显提高大鼠机械痛阈值与热痛阈值（P＜0.01）;华蟾素组抑制大鼠DRG中TrkA、p75NTR和SP蛋白表达（P＜0.05、0.01）,上调MOR蛋白表达（P＜0.01）。华蟾素＋NGF组激活大鼠DRG中TrkA、p75NTR和SP的表达（P＜0.01）,抑制MOR的表达（P＜0.05）。结论 华蟾素可能通过调节内源性NGF抑制TrkA、p75NTR的表达,激活MOR,并能够减少SP的释放,最终参与骨癌痛的镇痛过程。     

IFRD1基因表达下调对人肝癌细胞细胞株SMMC-7721基因表达谱的影响

目的 探讨IFRD1表达下调后人肝癌细胞SMMC-7721基因表达谱的改变.方法 采用脂质体lipo2000将构建的含目的基因shRNA的质粒转染入SMMC-7721细胞,并应用Affymetrix U133 plus 2.0 array基因芯片检测目的基因表达下调后,该细胞基因表达谱的变化.结果 RNA干扰抑制IFRD1基因表达后,基因芯片检测发现25476个基因中,表达量发生明显改变的有4221个(上下调大于等于1.5倍),上调的基因有1109个,下调的有3 112个;这些基因涉及到细胞周期、细胞凋亡、DNA复制等通路.结论 IFRD1基因表达下调后,人肝癌细胞SMMC-7721基因表达谱发生明显变化,与细胞生长增殖关系密切的细胞信号通路也发生了明显的改变.     

癌痛形成机制及模型研究进展

癌痛是一个复杂的病理学过程,同时也是临床上的一大难题。近年来,为了给临床上癌痛的治疗提供更可靠、有效的方法,研究者通过构建适当的动物模型进行对癌痛的机制和治疗的基础研究。目前,已经成功研究出几种癌痛动物模型,包括骨癌痛模型、皮肤癌痛模型、面癌痛、神经癌痛、内脏肿瘤牵扯痛模型及化疗药物引起的化疗痛。这些模型说明癌痛不同的药理学和神经化学。该文对不同的癌痛模型做一总结,为进一步的研究提供参考。