人CYB5R2基因真核表达载体的构建

目的构建人CYB5R2基因真核表达载体,并观察其在人鼻咽癌细胞HONE1中的表达。方法根据表达载体pCMV-Tag3A上的多克隆位点和CYB5R2基因CDS序列设计引物,应用RT-PCR从人睾丸cDNA中克隆出CYB5R2的CDS,并进行TA克隆。对经PER、双酶切和双向测序验证正确的质粒,进行CDS目的片段的回收,将其连接于pCMV-Tag3A载体的多克隆位点内构建真核载体,然后进行PCR、双酶切和双向测序验证。脂质体法转染鼻咽癌细胞HONE1细胞,荧光显微镜观察和RT—PCR验证该基因的表达。结果PCR、双酶切和双向测序结果显示pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体构建成功,荧光显微镜和RT—PER的结果显示该重组质粒在HONE1细胞中正确表达。结论成功构建了pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体,并在鼻咽癌细胞HONE1中表达,为进一步验证其抑癌作用及探索其抑癌机制做准备。     

真武汤对肾纤维化大鼠尿蛋白含量及血生化指标的影响

目的:建立单侧肾梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)致肾纤维化模型,探讨真武汤对肾纤维化大鼠24h尿量、尿蛋白含量、血液生化等指标的影响。方法:将大鼠随机分为5组,除正常对照组外,大鼠采用结扎左侧输尿管的方法建立肾纤维化模型。造模大鼠随机分为4组:模型组、氯沙坦钾组(20 mg/kg.d)、真武汤治疗组(2.1、9.8 g生药.kg-1.d-1),检测0、14、28 d大鼠24 h尿量及其尿蛋白含量。给药结束后,取双侧肾,比较肾脏组织形态变化,并检测大鼠的两肾比重及14、28 d大鼠的血液生化指标。结果:真武汤可减少UUO大鼠的24 h尿量,降低其尿蛋白含量,调节肾纤维化大鼠血浆中肌酐及尿素氮水平,对白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、低密度及高密度脂蛋白含量影响不明显。结论:真武汤对肾纤维化大鼠蛋白尿及肾功能具有正相调节作用,对大鼠体内脂质代谢也具有一定的影响。     

院内急危重症转运途中意外死亡研究

院内转运各类急危重患者是急诊工作重要的组成部分,如何避免转运及不合理的治疗给患者带来伤害,减少不良事件的发生,值得广大医务人员重视.现就遵义医学院附属医院院内转运过程中出现心搏呼吸骤停抢救无效死亡的63例患者情况总结分析如下.     

人胰淀素类似物普兰林肽体外活性测定方法的建立

建立体外人胰淀素类似物普兰林肽活性测定的方法,为普兰林肽及其制剂的质量控制提供可靠的细胞检测方法。将L6细胞培养并分化成有明显肌管的成熟骨骼肌细胞,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)检测普兰林肽对高糖培养环境下骨骼肌细胞葡萄糖吸收的影响。结果显示,在1×10-9～1×10-5mol/L的浓度范围内,普兰林肽能显著增加分化后的L6细胞的糖吸收量,在16 h达到最大值。普兰林肽浓度的负对数(x)与细胞糖吸收增加量(y)间呈现出良好的线性关系(y=-4.750x+59.54,R2=0.991 9)。应用本实验建立的方法检测了市售普兰林肽醋酸盐注射剂的活性,结果显示1×10-6、1×10-7和1×10-8mol/L的普兰林肽注射剂作用于分化的L6细胞16 h,细胞的糖吸收增加率为(61.89±9.54)%,(43.68±10.06)%和(33.30±13.03)%(P<0.01);与单用胰岛素组对比,普兰林肽与胰岛素联合使用能显著提高分化后的L6细胞的糖吸收量(P<0.05),与普兰林肽注射剂的临床使用结果一致。本实验为普兰林肽的活性测定提供了一种稳定可靠的细胞替代模型。     

高血压与失眠相关性研究

高血压病是最常见的心血管疾病之一。其发病率逐年上升,根据临床观察,许多病人伴失眠症,加重了疾病的发展。高血压病可以导致失眠,失眠常使血压升高,高血压与失眠之间相互影响,并形成恶性循环。文章主要就高血压与失眠之间的关系及中医对高血压伴失眠的认识进行阐述。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中的咖啡因和氯苯那敏

目的 采用LC-MS/MS法同时测定人血浆中咖啡因和氯苯那敏的浓度.方法 人血浆样本经液液萃取后,选用Inertsil ODS-SP色谱柱(75 mm×2.1 mm,3μm),流动相为甲醇-5 mmol·L-1乙酸铵(含0.5％甲酸)(55∶45),流速0.3 mL·min-1,选用API3200型三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,电喷雾离子化源,正离子方式,选择监测离子反应分别为m/z 195.3→110.2(咖啡因)、m/z 275.2→230.2(氯苯那敏)和m/z256.2→167.3(苯海拉明内标).结果 血浆中咖啡因和氯苯那敏的线性范围分别为4.0～1.2×103、0.05 ～15.0μg·L-1(r＞0.999);批内、批间RSD均小于13％;相对误差(RE)均在±5％的范围内;平均提取回收率分别为67.6％±1.3％、69.1％±3.4％.结论 所用方法快速、灵敏、专属性强、重复性好,适用于人血浆中咖啡因和氯苯那敏的测定,并可用于小儿氨酚烷胺泡腾片的人体生物等效性研究.     

LC-MS法同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和金刚烷胺的浓度及其制剂的人体生物等效性研究

目的:建立液-质联用(LC-MS)法同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和金刚烷胺的浓度,并应用于小儿氨酚烷胺泡腾片的人体生物等效性研究。方法:人血浆样本以甲醇沉淀蛋白后进样测定,色谱柱为Shim-packVP-ODS,流动相为甲醇-5mmol·L-1乙酸铵测(,含电喷0.5雾%离甲子酸化)(源45,∶正55)离,子流方速式为,0选.3择mL监·测mi离n-子1;选反用应分AP别I3为20m0/型z1三52重.2四→极11杆0.1(串对联乙质酰谱氨仪基的酚多)重、m反/z应15监2.测3(→M13R5M.2()金扫刚描烷方胺式)进和行m监/z166.1→148.1(伪麻黄碱,内标)。结果:乙酰氨基酚和金刚烷胺血药浓度分别在0.0800～12.0mg·L-(1r=0.9964)、0.0080～1.20mg·L-(1r=0.9995)范围内线性关系良好;日内、日间相对标准偏差(RSD)均<6%;平均方法回收率分别为99.23%、101.70%;平均提取回收率分别为(97.0±2.0)%、(92.4±2.7)%。结论:本方法高效、灵敏、准确、专属性强、快速,适用于对人血浆中乙酰氨基酚和金刚烷胺的测定,可应用于小儿氨酚烷胺泡腾片的人体生物等效性研究。     

百草枯中毒致消化道出血死亡个案1例

患者,男,49岁,因"口服百草枯5h"入院。5h前口服"百草枯"量约10ml。非喷射性呕吐胃内容物1次,量约50g,无咖啡样物及鲜血,无口舌疼痛及咽痛,无心悸、气促及呼吸困难,无昏迷、抽搐及大小便失禁。既往无消化性溃疡等引起消化道出血病史,无长期服用非甾体类消炎药物病史,无烟酒嗜好。查体:T 36.4℃,P 95次/min,R 21次/min,BP 126/82mm Hg,SPO298%,神志清楚。双肺呼吸音清晰,未闻及干湿性啰音。腹平软,上腹部轻压痛,肠鸣音3~5次/min。实验室检查:     

穿透性胎盘植入的处理

穿透性胎盘植入是指胎盘绒毛侵入子宫浆膜层,甚至突破浆膜层侵及周围脏器,其中膀胱多易受累,是产科较为罕见的极危重症.穿透性胎盘植入在胎盘植入患者中发生率为6.6％[1],但由于剖宫产、人工流产的增多,胎盘植入发生率在过去50年间增加了10倍[2],因而穿透性胎盘植入也随之增加.正常妊娠时子宫胎盘血流速度可达700～800 ml/min,穿透性胎盘植入患者胎盘部分剥离,血窦长期开放,出血可极为凶险,常危及产妇生命,病死率达7％[3].因此,穿透性胎盘植入术前和术中及时、积极地产科处理,对于预防和控制出血尤为重要.     

丹红注射液指纹图谱研究

目的 应用HPLC法建立丹红注射液(丹参、红花)的指纹图谱.方法 以AlltimaTMC18(4.6 mm ×250 mm,5μm)反相色谱柱为分析柱,0.4％甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长为254 nm.结果 丹红注射液各成分得到较好的分离,以原儿茶醛峰为参照物峰,确定了26个共有峰,10批丹红注射液指纹图谱相似度大于0.990.结论 本方法可同时分离丹红注射液中的各成分,方法简单准确,稳定可靠,可作为丹红注射液的指纹图谱.