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目的 探讨反式激活新基因剪切体TTG 1 A的生物学功能和参与肝纤维化的致病机制.方法 应用酵母双杂交系统3,将PCR扩增的TTG1A基因与酵母表达载体pGBKT7连接,转化酵母细胞AH109,并在其内表达,而后与转化了人白细胞文库的质粒pACT2的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在涂有X-α-gal营养缺陷型培养基上进行双重筛选,提取阳性酵母克隆的质粒转化大肠杆菌经Bgl Ⅱ酶切后测序,进行生物信息学分析. 结果成功构建了重组酵母表达载体pGBKT7-TTGlA.应用酵母双杂交系统3从人白细胞文库中筛选出19个与TTGlA相互作用的蛋白,其中包括人类主要组织相容性复合物Ⅱ型DP D(HLA-DP β),人类核糖体蛋白L30、人类核磷蛋白B23、人类核组蛋白2、人类ash2、人类变异的家族性睥性贫血和变异的异染性脑白质营养不良相关蛋白,人类死亡因子4(MORF4L1)、人类遍在蛋白偶连酶E2L3、人类载脂蛋白A-1(APOA1)、人类半乳凝素1以及5个未知功能蛋白. 结论 成功构建了重组酵母表达载体pGBKT7-TTGlA,初步揭示了新基因TTGlA的生物学功能,为进一步研究TGF β1介导的肝纤维化分子发病机制中的作用提供基础. 相似文献
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筛选转化生长因子β1刺激肝星状细胞差异表达基因的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 筛选转化生长因子β 1(TGF β 1)刺激大鼠肝星状细胞(Hsc)的差异表达基因,以揭示TGF β1介导肝纤维化的分子发病机制. 方法分别用Trizol法抽提TGF β1刺激的HSC及磷酸盐缓冲液刺激为对照的HSC总RNA,逆转录合成双链cDNA,制备掺入生物素标记的cDNA探针,与人基因表达谱芯片杂交,用Agilent扫描仪对芯片结果进行扫描,利用软件对差异表达基因进行生物信息学分析. 结果 从13824条目的 基因中筛选出177条差异表达基因,其中123条基因表达上调,其中包括:结缔组织生长因子,微管蛋白ε 1,V型胶原α2,连环蛋白6 2,钙粘蛋白6,2型,Smad3,丝裂源活化蛋白激酶4,生长因子受体结合蛋白7,丝裂原活化蛋白激酶相互作用/丝氨酸/苏氨酸激酶1等;54条基因表达下调,包括:肿瘤坏死因子受体相关因子4,干扰素调节因子7,干扰素诱生蛋白p78,骨形态发生蛋白7,基质gLa蛋白,人类丝氨酸蛋白酶抑制剂进化支B成员8,干扰素刺激基因2.0×104,死亡相关蛋白6,金属硫蛋白1H,超氧化物歧化酶2等;同时筛选到8个未知功能蛋白. 结论 应用基因表达谱芯片技术成功筛选了TGF β 1刺激HSC的差异表达基因,初步揭示了TGF β1致肝纤维化的分子机制是诸多因素共同作用的结果,为进一步寻找新的基因治疗靶点奠定了基础. 相似文献
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根治性近端胃切除术后的两种重建术式评价 总被引:1,自引:4,他引:1
目的 探讨近端胃癌根治术后合理的消化道重建方式.方法 回顾性总结2004年6月至2007年1月期间我院行近端胃癌次全胃切除连续病例59例,依据重建方式分为2组:胃食管侧端吻合重建组(GE组)和调节型双通道间置空肠重建组(GIE组),GIE组重建在残胃与食管间增加一段长35 cm的连续性间置空肠,对比分析2组术后患者生活质量状况.结果 全组病例无围手术期死亡、吻合口漏、倾倒综合征及中度以上贫血病例发生.术后1和6个月体重、RBC、Hb、Alb、PNI值以及其相对于术前的变化值[术后1个月RBC(P=0.006)、Hb(P=0.001)相对于术前的变化值除外],GIE组和GE组间差异均无统计学意义(P>0.05).GIE组术后腹部症状和反流性食管炎症状的Visick评分优于GE组(P<0.001):GIE组主要为Ⅱ级(74.2%),GE组主要为Ⅲ级(64.3%).与GE组比较,GIE组术后并未延迟首次化疗时间(P>0.05),手术时间延长(0.35士0.13)h(P=0.01).结论 调节型双通道间置空肠消化道重建在近端胃次全切除术中是安全、可行的,有利于防止癌细胞残留和改善近端胃癌根治术后患者生活质量. 相似文献
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核糖核酸干扰沉默survivin基因对A549细胞增殖及顺铂敏感性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:利用核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响。方法:将靶向survivin的基因片段插入带有绿色荧光蛋白基因的载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR分析转染前后survivin mRNA的表达情况,免疫荧光及Western blot分析转染前后survivin蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化。结果:成功构建pGenesil1。1-survivin重组质粒。与对照组相比,转染重组质粒后,survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为65%和71%;细胞凋亡率增加;转染前顺铂对A549细胞的IC50为转染后的7.68倍,两者比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:靶向survivin的RNA干扰表达载体能下调survivin基因表达,增强A549细胞对顺铂药物敏感性。 相似文献
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宫腔镜术后稀释性低钠血症 总被引:2,自引:0,他引:2
唐良萏(主持人,妇产科教授):稀释性低钠血症(1FURP综合征)是宫腔镜手术的严重并发症,处理不及时或不恰当可能给患者带来灾难性后果,甚至危及患者生命.今天,我们请来内分泌科、神经内科的专家们参加妇科1例宫腔镜术后TURP综合征的病例讨论,希望通过回顾性分析,进一步加深对本病的认识,提高预防及正确处理该并发症的水平.首先请住院医师汇报病史. 相似文献
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人工膝关节置换术治疗重症膝关节疾病92例临床分析 总被引:11,自引:7,他引:4
目的探讨人工膝关节置换术(TKA)治疗重症膝关节疾病的临床疗效。方法1999年6月~2006年1月,对92例重症膝关节疾病(106膝)使用后稳定型TKA。其中10例(11膝)为类风湿性关节炎,2例(2膝)为创伤性关节炎,80例(93膝)为严重骨性关节炎,5例(5膝)合并外翻畸形,40例(50膝)并内翻畸形。所有患者进行10个月~6年(平均30个月)的随访,并应用HSS膝关节评分系统进行分析。结果手术优良率为94.2%,患者术后在疼痛、功能及关节活动度等方面都有明显改善,各种并发症的发生率低。结论TKA是治疗重症膝关节疾病的有效方法。 相似文献
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目的:了解输血传播病毒(TTV)在各型肝炎患者中的感染情况。方法:采用套式PCR方法,对218 例不同型别的肝炎病人血清进行TTV-DNA检测。结果:218 例不同肝炎病人中共检出72 例TTV-DNA阳性血清,总检出率为33.0%,不同民族、性别间TTV-DNA 阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。其中排除非甲非戊型肝炎单纯转氨酶增高病人中TTV-DNA阳性率为53.9%,而在明确诊断为甲型、乙型、丙型肝炎病人中TTV-DNA阳性率为26.5%,两组相比差异有统计学意义(χ2=13.38,P<0.05)。结论:各型肝炎患者中存在TTV感染,非甲非戊型肝炎单纯转氨酶增高病人中TTV感染率明显高于明确病原肝炎病人。TTV感染与肝炎有关,可能是原因不明肝炎的病因之一。 相似文献