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231.
目的:证实胞浆转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)介导抑癌基因NPRL2以CTP-NPRL2融合蛋白形式对人肾癌细胞株786-O的作用,检测其诱导的肾癌细胞凋亡及其对Bax-Caspase3凋亡通路的影响。方法:构建重组质粒pET28a-CTP-NPRL2和pET28a-NPRL2并转染大肠杆菌DH5α,从而得到原核表达体系用于CTP-NPRL2融合蛋白及NPRL2蛋白的表达和提取;Western blot验证CTP-NPRL2蛋白和NPRL2蛋白的表达;将肾癌786-O细胞分为2组,分别与等量的NPRL2蛋白和CTP-NPRL2蛋白共培养,采用免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测2种蛋白在肾癌细胞786-O的亚细胞定位情况;将在96孔板培养的786-O细胞分为5组,其中4组分别用1.0 μmol/L CTP-NPRL2蛋白、2.0 μmol/L CTP-NPRL2蛋白、4.0 μmol/L CTP-NPRL2蛋白、4.0 μmol/L NRPL2蛋白处理,剩余1组为对照组;MTT法检测各组786-O细胞增殖的情况;流式细胞仪分析各组细胞周期和细胞凋亡情况;real-time PCR、Western blot检测各组786-O细胞中Bax和Caspase-3在mRNA及蛋白水平的表达情况。结果:质粒测序结果显示成功构建所需的原核表达载体;Western blot结果显示CTP-NPRL2融合蛋白在原核表达载体中有表达。激光共聚焦显微镜结果提示CTP-NPRL2蛋白导入786-O细胞后定位于胞浆;MTT发现CTP-NPRL2组细胞增殖较NPRL2组及空白对照组受到明显的抑制(P<0.05);流式细胞分析显示,相对于空白对照组和NPRL2组,CTP-NPRL2组的凋亡率显著增高且处于G0/G1期细胞明显增多(P<0.05)。real-time PCR和Western blot结果提示,与空白对照组和NPRL2组比较,CTP-NPRL2组Bax和Caspase-3在mRNA和蛋白质水平的表达均明显上调(P<0.05)。结论:CTP介导抑癌基因NRPL2以CTP-NPRL2融合蛋白形式导入肾癌786-O细胞中并对其有明显的抑制作用,可能通过影响Bax-Caspase3凋亡通路的活性,抑制786-O细胞的增殖,并诱导其凋亡将细胞周期阻滞于G0/G1期,从而发挥抑癌作用。 相似文献
232.
目的探讨治疗阴茎阴囊转位伴隐匿性阴茎的治疗方法。方法采用G lenn-Anderson术式和黄鲁刚等[1]介绍的术式治疗阴茎阴囊转位伴隐匿性阴茎。结果术后随访效果满意。结论两种手术方法都较为简单,但术后患儿外观满意,易于在基层医院推广。 相似文献
233.
234.
健脾清热化瘀方对胃溃疡患者T细胞亚群及IL-8的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:观察中药复方健脾清热化瘀方对胃溃疡患者T细胞亚群及IL-8的影响。方法:将胃溃疡脾虚瘀热证患者50例,采用单盲随机法分为治疗组30例和对照组20例,治疗组服用健脾清热化瘀方,对照组服用雷尼替丁,同时设立正常对照组。采用流式细胞术和Elisa法分别检测血液T细胞亚群以及血清IL-8的浓度、溃疡灶周围黏膜组织IL-8的含量。结果:健脾清热化瘀方治疗后能使患者的CD3 、CD4 、CD8 恢复正常,而雷尼替丁组不能使CD4 、CD4 /CD8 比值恢复正常;两组治疗后血清IL-8浓度比较无明显差别,两组均有较好的改善作用;治疗后治疗组对病灶周围黏膜组织IL-8含量的改善优于对照组。结论:健脾清热化瘀方能有效提高胃溃疡患者免疫功能,从而有效地抑制溃疡及溃疡复发。 相似文献