血小板抗体及淋巴细胞亚群检测在特发性血小板减少性紫癜中的诊断意义

目的 比较抗血小板特异性抗体、PAIgG及淋巴细胞亚群在特发性血小板减少性紫癜（ITP）及非免疫性血小板减少症中的水平,以评价其在ITP中的诊断价值.方法 用改良单克隆抗体特异性俘获血小板抗原法（MAIPA）检测患者血浆中抗血小板膜糖蛋白（GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb和P-选择素）的特异性抗体.利用流式细胞术（FCM）检测患者外周血中PAIgG及淋巴细胞亚群.结果 ITP组MAIPA的阳性率为63.3%,非免疫性血小板减少组为阴性;PAIgG分别为73.3%、45%.淋巴细胞亚群中,ITP组CD3、CD4、CD4/CD8显著高于正常对照组,CD8、CD19则显著低于正常对照组.结论 抗血小板特异性自身抗体抗体对提高ITP的诊断有一定的实用价值,淋巴细胞亚群的变化能较好地反映ITP 的病理机制.     

抑瘤素M的研究进展

抑瘤素M(OSM)最初是1986年Zarling等从U937组织型淋巴瘤细胞(histiocytic lymphomacells)培养上清液中分离的一种对A375黑色素瘤细胞有生长抑制作用的因子[1]。OSM主要由活化的T淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞分泌,这种诱导分泌过程可以出现在机体的大多数组织中。OSM属于白细胞     

丝素蛋白材料细胞相容性的研究

目的：研究再生丝素膜对大鼠真皮细胞生长和细胞遗传学的影响。方法：采用静置贴壁培养法在再生丝素膜上培养大鼠真皮细胞，并用活细胞计数法和常规染色体检测技术，观察再生丝素膜对细胞生长和染色体的影响。结果 再生丝素膜能支持细胞正常生长，呈现正常的生长繁殖曲线且染色体的形态和数目正常。结论 再生丝素膜对大鼠真皮细胞具有良好的细胞相容性。     

F1t3/FL结构、功能及对脐血造血干/祖细胞体外扩增作用的研究

Flt3是主要表达于造血干/祖细胞上的一种Ⅲ型酪氮酸激酶受体,Flt3配基(FL)是一种早期造血生长因子,与造血凋控密切相关.FL在脐血造血干/祖细胞体外扩增中发挥重要作用,并具有其他方面的功能.本文就Flt3/FL的结构、功能及其在脐血造血干/祖细胞体外扩增中的作用作一综述.     

ING4基因真核表达载体的构建及其功能

目的：构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,观察ING4基因对人肝癌SMMC7721细胞周期及凋亡的影响。方法：小鼠肝组织经RT-PCR扩增,构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,分别用双酶切、PCR、基因测序进行鉴定,将其转导进入人肝癌SMMC7721细胞,检测ING4基因的表达情况及其对细胞周期的影响,应用荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况。结果：RT-PCR产物为约750bp的条带,基因测序正确,转导进入人肝癌细胞株SMMC7721后可延长G2期,其凋亡率（23.66％）明显高于对照组（13.75％）。结论：成功分离得到了小鼠ING4基因并成功构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,该质粒转染人肝癌SMMC7721细胞后可延长G2期并可促使细胞凋亡。     

浓缩铀235U内污染对脑内蛋白组分的作用

目的 研究不同水平浓缩铀内污染机体时，对脑内主要蛋白组分的变化。方法 通过低温高速离心，离子交换层析，以及透析过程，从SD大白鼠脑中经分离纯化，获得β-NGF，并经PC12细胞突起生长试验鉴定其活性。结果 发现浓缩铀内污染机体时，可导致β-NGF得率降低，并与内污染剂量成线性关系，同时可导致脑内蛋白质裂解，从而使SDS-PAGE电泳图谱中主要蛋白组分分子量范围扩大，条带增加，结论 浓缩铀内污染诱发机体脑组织的放射毒理效应是可导致脑内蛋白质的裂解，同时可使β-NGF得率降低。     

hIFN-λ1（hIL-29）基因及在COS-7细胞中瞬时表达和抗病毒效应

目的：克隆hIFN-λ1基因，构建pcDNA．3．IA-IFN—λ1表达质粒，并在真核细胞中获得表达，以进一步研究rhIFN-λ1的生物学特性。方法：采用RT-PCR法从病毒诱导的A549细胞mRNA中克隆hIFN-λ1基因，并重组于pcDNA3．1A真核表达载体上。结果：经双酶切和PCR鉴定及DNA序列分析，发现所克隆的基因与GenBank公布的序列一致，并在COS-7细胞中获得了有效瞬时表达。结论：成功克隆了hIFN-λ1基因，并成功地获得了瞬时表达，其rhIFN-λ1表达产物具有抗病毒活性。     

凋亡相关基因TNFAIP3、ENC1在人脑胶质瘤组织中的表达

目的：检测细胞凋亡相关基因TNFAIP3和ENC1在不同级别胶质瘤组织和正常脑组织中的表达。方法：提取组织总RNA，用半定量RT-PCR检测其中TNFAIP3和ENC1 mRNA的表达。结果(1)同一患者肿瘤组织与其正常脑组织相比，TNFAIP3基因表达上调，ENC1基因表达下调；(2)与正常脑组织相比，WHOⅡ和Ⅳ级肿瘤组TNFAIP3表达升高，WHOⅠ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤组ENC1表达下降。结论：RT-PCR结果与芯片检测结果基本相符；胶质瘤组织中TNFAIP3表达上调、ENC1表达下调，它们的异常表达可能参与了胶质瘤的恶性进展过程。     

人抑瘤素M基因重组逆转录病毒载体的构建及鉴定

目的构建携带人Oncostatin M（OSM，抑瘤素M）基因的逆转录病毒载体。方法用DNA重组技术，以pcDNA3．1finyc-his（-）A-hOSM重组质粒为模板PCR扩增人OSM基因，酶切连接到带有GFP标记的逆转录病毒载体pEGZ／MCS．HA上，连接产物转化大肠杆菌DH5a，筛选阳性克隆，抽提质粒，用PCR法、限制性内切酶EeoRI和BamHI双酶切法及测序鉴定。然后以脂质体转染法，将重组的逆转录病毒载体与辅助质粒HIT456、HIT60共同转染入包装细胞系293T以包装病毒。结果构建了重纽人抑瘤素M基因逆转录病毒载体，PCR产物电泳可见约750bp处有特异性条带，EcoRI和BamH，双酶切，电泳出现两个条带，约750bp处亦有相应条带。核酸测序结果与GenBank中所报道的人抑瘤素M基因的CDS序列完全一致。转染293T细胞在倒置荧光显微镜下可见绿色荧光，且细胞有病变。提示构建携带人OSM基因的逆转录载体成功。结论携带人抑瘤素M基因的重组逆转录病毒载体pEGZ／MCS-HA-hOSM成功构建为此基因的临床应用和实验研究奠定了基础。     

重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN对肝癌细胞的抑制作用

 [摘要] 目的：用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染人肝癌SMMC-7721细胞,检验对细胞的作用。方法：用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染QBI-293A细胞,对病毒进行扩增并测定其效价,荧光显微镜下观察感染效果。用扩增得到的Ad-ING4和Ad-PTEN感染SMMC-7721细胞,流式细胞术及MTT检测作用效果。结果：空腺病毒组的凋亡率为3.4±1.3%,Ad-ING4组和Ad-PTEN组分别为49.7±4.8%和11.4±3.2%,均显著高于空腺病毒组（p＜0.01）;Ad-ING4组和Ad-PTEN组的细胞增殖在48h～96h时较正常组明显下降（p＜0.05）。结论：Ad-ING4和Ad-PTEN对SMMC-7721细胞均有显著抑制作用, 尤其是Ad-ING4。